• Archives of Pharmacal Research
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• 제21권2호
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• pp.128-134
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• 1998

Nitric oxide synthase, NOS (EC.1.14.13.39), was purified from bovine pancreas over 5,500-fold with a 7.6% yield using 30% ammonium sulfate precipitation, and $2^1$,$5^1$-ADP-agarose and calmodulin-agarose affinity chromatography. The purified bovine pancreatic NOS (bpNOS) showed a single band on SDS-PAGE corresponding to an apparent molecular mass of 160 kDa, whereas it was 320 kDa on non-denaturating gel-filtration. This indicated a homodimeric nature of the enzyme. The specific activity of the purified bpNOS was 31.67 nmol L-citrulline fored/mtn/mg protein and an apparent $K\textrm{m}$ for L-arginine was 15.72 $\mu\textrm{M}$, The enzyme activity was dependent on $Ca^{2+}$ and calmodulin, and to a lesser extent on NADPH, FAD and FMN. $H_4B$ was not required as a cofactor for the activity. In an inhibition experiment with L-arginine analogues, $N^G$-nitro-L-arginine (NNA) had the most potent inhibitory effect on bpNOS, and $N^{G}$, $N^{G1}$-dimethyl-L-arginine (symmetric; sDMA) did not have any inhibitory effect. Immunohistochemical analysis of the bovine pancreas using brain type NOS antibody (anti-bNOS antibody) revealed that acinar cells showed strong immunoreactivity against the antibody.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제20권6호
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• pp.562-568
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• 2012

Cytochrome P450 BM3 (CYP102A1) from Bacillus megaterium is a self-sufficient monooxygenase that consists of a heme domain and FAD/FMN-containing reductase domain (BMR). In this report, the reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and 5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride (CTC) by BMR was evaluated as a method for monitoring BMR activity. The electron transfer proceeds from NADPH to BMR and then to BMR substrates, MTT and CTC. MTT and CTC are monotetrazolium salts that form formazans upon reduction. The reduction of MTT and CTC followed classical Michaelis-Menten kinetics ($k_{cat}=4120\;min^{-1}$, $K_m=77{\mu}M$ for MTT and $k_{cat}=6580\;min^{-1}$, $K_m=51{\mu}M$ for CTC). Our continuous assay using MTT and CTC allows the simple, rapid measurement of BMR activity. The BMR was able to metabolize mitomycin C and doxorubicin, which are anticancer drug substrates for CPR, producing the same metabolites as those produced by CPR. Moreover, the BMR was able to interact with CYP1A2 and transfer electrons to promote the oxidation reactions of substrates by CYP1A2 and CYP2E1 in humans. The results of this study suggest the possibility of the utilization of BMR as a surrogate for mammalian CPR.

• 한국세라믹학회지
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• 제41권12호
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• pp.929-932
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• 2004

페로브스카이트 단일상의 PMN 계 복합화합물을 제조하기 위하여 일반적으로 소량의 MgO가 과잉으로 사용되며, 잉여 MgO는 주로 입내에 석출되며 소결을 저해하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 MgO 대신 $(MgCO_3)_4{\cdot}Mg(OH)_2{\cdot}5H_{2}O$을 사용하여 고상법으로 제조한 PMN-PT-BT(PBT) 전구체 분말을 $500^{\circ}C/1h$에서 열처리한 후, MgO 졸로 표면 개질하여, 과잉의 MgO가 소결 및 물성에 미치는 영향을 조사하였다. 소량의 MgO 졸($0.5{\sim}1.0wt\%$)은 $1000^{\circ}C$ 이하의 온도에서 소결을 크게 촉진시켰다. $0.5wt\%$의 졸이 사용된 PBT 분말은 $900^{\circ}C/2h$ 소결로 소결밀도 $7.62g/cm^3$, 유전율 14800, 유전손실 $1.1\%$를 나타내었으며, 이는 PBT의 $1000^{\circ}C/2h$ 소결체의 물성과 흡사하였다. 또한 MgO 졸로 첨가된 과잉의 MgO는 삼중점과 입계에 주로 석출되어 입성장을 제어함을 알 수 있었다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제36권4호
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• pp.389-396
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• 2003

Maternal nutritional status has been shown to influence pregnancy outcomes. And the elevated maternal plasma homocysteine concentrations have been associated with adverse pregnancy outcomes. We investigated the effects of maternal serum levels of B vitamins and homocysteine, and the C677T MTHFR (5, 10-methylenetetrahydrofolate reductase) polymorphism on pregnancy outcomes. In 177 pregnant women of 24-28 wks of gestation, the MTHFR gene mutation, serum B vitamins and homocysteine concentrations were measured, and their pregnancy outcomes were investigated from medical records. The birth length, and 1- and 5-min Apgar scores of neonates in the T/T mothers were 45.4 $\pm$ 9.3 cm, 7.6 $\pm$ 3.2 and 8.5 $\pm$ 3.8, respectively, which were significantly lower than those in the C/T (48.6 $\pm$ 3.3 cm, 9.0 $\pm$ 0.2, 10.0 $\pm$ 0.2) or the C/C mothers (49.4 $\pm$ 1.9 cm, 9.0 $\pm$ 0.2, 10.0 $\pm$ 0.0). The birth weight, birth length and the gestational age of neonates at delivery from hyperhomocysteinemic mothers whose homocysteine levels higher than 15 $\mu$ mol were 2.5 $\pm$ 1.3 kg, 43.9 $\pm$ 9.0 cm, 35.4 $\pm$ 6.3 wk, respectively, which were significant lower than those from normohomocysteinemic mothers (3.1 $\pm$ 0.6 kg, 48.8 $\pm$ 3.6 cm, 38.5 $\pm$ 2.5 wk). The birth weight and birth length of neonates in mothers whose PLP levels were below the median were significantly lower than those from mothers with the PLP levels above the median. The 1- and 5-min Apgar scores of neonates were lower in mothers with the T/T MTHFR genotype than those with the C/T or C/C only when the serum PLP levels were below the median. The 1-, 5 min Apgar scores and birth length of neonates were lower in mothers with the T/T MTHFR genotype than those with the C/T or C/C only when the serum FMN levels were below the median. In conclusion, maternal B vitamin status, homocysteine and the C677T MTHFR genotype seem to have played an important role on pregnancy outcomes.

• Applied Biological Chemistry
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• 제40권6호
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• pp.501-507
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• 1997

파라과이 원산의 국화과 식물 Stevia rebaudiana Bertoni는 steviol (ent-13-hydroxy kaur-16-en-19-oic acid)을 기본 골격으로 하는 stevia 감미료를 건물 중량의 5-10%를 생합성하여 축적을 한다. 감미성분은 Gibberellin 생합성의 전구체로 알려진 ent-kaurenoic acid (ent-kaur-16-en-19-oic acid; ent-KA)의 7번과 13번의 어느 탄소에 hydroxylation을 시키느냐에 따라 gibberellin 대사와 steviol 대사로 나뉘어진다. ent-KA 13-hydroxylase를 stevia 엽록체의 stroma에 존재하는 것을 확인했다. Stroma 분획 단백질 $100\;{\mu}g$으로 효소 반응의 cofactor 요구성을 조사해 본 결과, 반응 혼합액에 NADPH를 첨가하지 않았을 때는 85%의 효소활성의 감소를 보였고, NADPH 대신 NADH를 첨가해도 34%의 감소를 보였다. anaerobic 조건에서는 2.1%의 활성을 뛰었다. 이 결과로 ent-KA 13-hydroxylase는 NADPH와 $O_2$ 요구성임을 밝혔다. FAD, FMN, riboflavin을 첨가함으로써 FAD는 1.5배, riboflavin은 1.7배의 효소활성 증가 효과가 나타났다. 효소의 기질 특이성을 조사한 결과, t-cinnamic acid, 4-hydroxyphenyl acetic acid, choline과 resorcinol에는 전혀 활성이 검출되지 않았으며, $[^(14)C]-methyl-KA$를 ent-KA 대신에 기질로 사용했을 때는 16.7% 의 활성이 검출되어 ent-KA 13-hydroxylase는 기질특이성이 높은것으로 확인되었다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제55권3호
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• pp.321-329
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• 2022

리보플라빈 (비타민 B₂)은 한국인에게 섭취 부족의 우려가 있는 비타민으로서 에너지 대사를 포함한 산화/환원 반응의 조효소로서 작용한다. 적절한 섭취수준을 평가하는 방법으로는 적혈구에서의 리보플라빈 농도나 EGRAC, 혹은 소변의 리보플라빈 농도를 측정하는 것이다. 적혈구 리보플라빈 수준은 400 nmol/L (15 ㎍/100 mL) 이상을 적정수준, 270 nmol/L (10 ㎍/100 mL) 이하를 결핍으로 하거나 EGRAC 값이 1.2 이하인 경우 적정수준, 1.4이상이면 결핍으로 판정한다. 2020 한국인 영양소 섭취기준 개정 시 19-64세 성인의 2020 리보플라빈 평균필요량은 남자 1.3 mg/d, 여자 1.0 mg/d로 설정되었으며, 64-74세 남자 1.2 mg/d, 여자 0.9 mg/d, 75세 이상 남자 1.1 mg/d, 여자 0.8 mg/d로 성인 보다 낮게 설정되었다. 2020 국민건강영양조사 결과 19세 이상 우리나라 성인의 리보플라빈 평균 섭취량은 1.69 mg/d이며, 권장섭취량 대비 124.9% 였고, 보충제 섭취자들의 보충제로부터의 리보플라빈 섭취량은 평균 10.26 mg/d로 식품으로부터 섭취하는 1.50 mg에 비해 약 6.8배 높은 수준이었다 [18]. 2020 한국인 영양소 섭취기준에서 연령별, 성별 리보플라빈 권장섭취량은 각 생애주기 구간별 평균필요량에 변이계수 10%를 적용하여 평균필요량의 120% 수준으로 설정되었다 리보플라빈의 대표적 식품 급원으로는 유제품, 난류, 육류, 가금류와 생선류의 동물성 식품과 두류, 녹색채소류, 곡류 등이 있으며 2020 국민건강영양조사에 따르면 한국인의 리보플라빈 급원 식품으로 기여도가 높은 식품은 달걀, 라면, 돼지고기, 우유, 간장, 쇠고기, 배추김치, 닭고기, 고추가루, 시리얼 순이다. 최근 리보플라빈의 경우 비타민 보충제 외에도 다양한 건강기능성 식품섭취로 인해 보충제를 섭취하는 사람들의 경우 보충제로부터의 섭취수준이 식품으로부터의 섭취량을 훨씬 초과하고 있어 리보플라빈 영양상태 평가 시 보충제로부터 섭취하는 수준에 대한 평가가 향후 반드시 필요하다. 또한 2020 한국인 영양소 섭취기준 개정에서는 만성 질환 예방에 대한 부분은 아직 과학적 증거의 불충분으로 고려되지 않았으나 향후 만성질환과 관련된 역학연구 및 중재연구가 더 필요하다고 판단된다.