• 한국균학회지
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• 제31권3호
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• pp.181-186
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• 2003

담자균류 80여종에서 laccase 고생산 균주(Fomitella fraxinea; 장수버섯)를 선발하고, F. fraxinea를 이용한 리그닌 분해효소의 생산 및 효소의 대량생산 조건을 검토하였다. 먼저 배지 조성에 따른 생산성을 조사한 결과 Cu등의 무기물의 첨가 유무에 따라 생산되는 효소가 달랐다. 무기물이 첨가되지 않은 배지(Medium I)에서는 manganese peroxidase가 생산되었고, 무기물이 첨가된 배지(Medium II)에서는 laccase가 생산되었는데 플라스크 배양 18일째에는 5.43 U/ml, 20일째에는 5.56 U/ml의 효소활성이 나타났다. 배양방법에서 영양이 충분한 조건에서는 정치배양보다는 진탕배양(120 rpm)에서 효소의 활성이 높았다. 이 균주를 이용한 laccase 대량생산 실험에는 jar fermentor, balloon type bioreactor, air-sparging fermentor를 이용하였다. laccase는 jar fermentor와 air-sparging formentor에서 3,540 U/ml(8일), 3,100 U/ml(6일)의 생산성을 나타내었다. Balloon type bioreactor는 균사의 생장은 좋았지만 효소는 생산되지 않았다. F. fraxinea를 사용하여 air-sparging fermentor로 scale up하여 laccase의 대량생산을 할 수 있다고 판단된다.

• 한국균학회지
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• 제26권1호통권84호
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• pp.69-77
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• 1998

버섯의 항산화 활성을 검색하기 위하여 63종의 버섯자실체를 80% 에탄올로 추출한 후 각각의 버섯추출물이 지질과산화반응, AO 및 SOD의 활성도에 미치는 효과를 관찰하였다. 테미로버섯(D. dickinsii), 뽕나무버섯(A. mellea) 및 아카시재목버섯(F. fraxineu)의 추출물이 간조직 microsome의 지질과산화반응을 억제시켰으며, A. mellea, D. dickinsii, F. fraxinea, 삼색도장버섯(D. tricolor), 송편버섯(T. suaveolens), 옷솔버섯(T. abietinum), 제주쓴맛그물버섯(T. neofelleus), 노란그물버섯(B. obscurecoccineus) 및 산그물버섯(X. subtomentosus) 등의 추출물은 간 세포질 내의 초산화 이온의 생성효소인 AO 활성을 크게 억제시켰다. 한편, D. tricolor, A. mellea, D. dickinsii, 및 F. fraxinea 등의 추출물은 간 세포질의 SOD의 활성을 증가시켰다. 이상의 결과로부터 특히 A. mellea, D. dickinsii 및 F. fraxinea로부터 항산화활성 성분의 분리정제 및 생리활성물질의 개발에 대한 가능성이 제시되었다.

• 한국균학회지
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• 제29권1호
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• pp.67-71
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• 2001

민간약재로 사용되어지는 아카시재목 버섯(Fomitella fraxinea) 자실체의 에탄올 추출물로부터 ethyl acetate 추출, silica gel chromatography, preparative TLC 등의 방법으로 항산화 활성을 나타내는 steroid계 화합물, F-1을 분리 정제하였다. EI-Mass, FT-IR, $^1H$ 및 $^{13}C$ NMR 등 기기 분석에 의하여 F-1은 분자량이 412.65, 분자식이 $C_{28}H_{44}O_2$의 steroid 화합물, ergosta-7,22-diene-3-one-$16{\beta}-ol$임을 확인하였다. F-1의 지질과산화 저해활성은 $10^{\mu}g/ml$의 농도에서 86%의 지질과산화 저해활성을 나타내었으며, $IC_{50}$ 값은 $3.8{\mu}g/ml$이었다. 이 화합물은 항산화제인 ${\alpha}-tocoperol$과 유사한 항산화 활성을 나타내었다.

• 한국균학회지
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• 제23권3호통권74호
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• pp.238-245
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• 1995

장수버섯의 배양적특징(培養的特徵) 및 인공재배(人工栽培) 가능성(可能性)에 대하여 검토(檢討)한 결과(結果) 균사생장(菌絲生長)이 가장 우수(優秀)한 배지(培地)는 CDA배지(培地)였으며, 최적온도(最適溫度)는 $30^{\circ}C$, pH는 6.0이었다. 탄소원(炭素源)은 단당류(單糖類)인 glucose를 첨가(添加)한 배지(培地)에서 가장 우수(優秀)하였고, cellobiose를 첨가(添加)한 배지(培地)에서 가장 저조(低調)하였다. 질소원(窒素源)은 arginine을 첨가(添加)한 배지(培地)에서 가장 양호(良好)하였으며 C/N 첨가비(添加比)는 glucose 3%, arginine 0.25%인 C/N비(比) 12에서 가장 적합(適合)했다. 유기산(有機酸)은 succinic acid, vitamin은 thiamine을 첨가(添加)한 배지(培地)에서 가장 양호(良好)하였다. 인공재배(人工栽培)를 위한 종균제조시(種菌製造時) 가장 적합(適合)한 것은 참나무 톱밥에 첨가재(添加材)로 미강(米糠)을 20% 첨가(添加)한 배지(培地)이었으며, 톱밥재배시(栽培時) 수량(收量)은 참나무, 아카시나무 순(順)으로 높았다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권3호
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• pp.228-234
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• 2006

장수버섯(Fomitella fraxinea)의 균사체 배양액으로부터 laccase를 생산하기 위한 최적 배양조건을 조사하였다. 복합 배지 중에서 MCM이 laccase의 생산에 가장 우수하였으며, laccase를 생산하기 위한 최적 배지조건은 탄소원, 질소원, 인산원 및 무기질원으로 각각 2% dextrose, 0.4% $(NH_4)_{2}HPO_4$, 0.05% $Na_{2}HPO_{4}{\cdot}7H_{2}O$ 및 0.05% KCl의 첨가에 의하여 효소의 생산이 가장 높았다. 따라서 E. fraxinea로 부터 laccase를 생산하기 위한 최적 배지조건은 2% dextrose, 0.4% $(NH_4)_{2}HPO_4$, 0.05% $Na_{2}HPO_{4}{\cdot}7H_{2}O$ 및 0.05% KCl 이다. 이상의 배지를 사용하여 배양온도 $25^{\circ}C$, 초기 pH 8.0에서 10일 동안 배양하였을 때 효소의 생산이 가장 증가함을 알 수 있었다. Staib agar plate 상에서 장수 버섯(Fomitella fraxinea) 균사체의 laccase활성여부를 확인할 수 있었으며 배양액 중의 효소 활성의 최적 pH와 온도는 pH 5.0과 $50^{\circ}C$ 이었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제30권4호
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• pp.325-331
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• 2002

아카시재목 버섯 균사체로부터 혈전용해효소를 생산하기 위한 최적 배양조건을 조사하였다. 복합배지 중 CVM이 가장 우수하였으며, 탄소원, 질소원, 인산원 및 무기질원으로 각각 2% galactose, 0.6% yeast extract와 0.1% $NaNO_3$, 0 0.1 % $K_2HPO_4$, 및 0.05% $MgSO_4$. $7H_2O$의 첨가에 의하여 효소의 활성이 가장 증가하였다. 따라서 F. fraxinea로부터 혈전용해효소를 생산하기 위한 최적 배지조건은 2% galactose, 0.6% yeast extract, 0.1 % $NaNO_3$, 0.1 % $K_2HPO_4$ 및 0.05% $MgSO_4$. $7H_2O$이다. 이상의 배지를 사용하여 배양온도 $25^{\circ}C$ 초기 pH 9에서 10일 동안 배양하였을 때 효소의 생산이 가장 높은 결과를 나타내었다. 배양액 중의 효소의 최적 온도 및 pH는 $40^{\circ}C$ 및 pH 10이었다. 본 효소의 활성이 PMSF와 aprotinin에 의하여 완전히 억제되는 것으로 보아 본 효소가 senne protease 계열의 효소임을 추정할 수 있었다.

• 한국균학회지
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• 제26권2호통권85호
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• pp.275-280
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• 1998

장수버섯(Fomitella fraxinea)의 원형질체 분리와 재생에 영향을 미치는 요인을 조사하고자 본 연구를 수행하였다. 세포벽 분해 효소 종류별 원형질체 분리 시험을 수행한 결과 장수버섯 ASI 17001은 Novozym 234+Cellulase onozuka R-10+${\beta}-Glucuronidase$를 혼합하여 처리하였을 때 원형질체 분리율이 $8.9{\times}10^4/ml$로 가장 높았다. 원형질체 분리시 사용하는 삼투압 조절제로는 0.6 M sucrose가 가장 양호하였으며, 처리시간은 3시간이 가장 양호하였다. 원형질체 재생율은 0.6 M sorbitol에서 0.02%로 다른 조절제에 비하여 양호한 결과를 나타내었으나 KCl는 전혀 재생이 되지 않았다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제16권6호
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• pp.935-942
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• 2007

The stem bark of Rhus verniciflua (RVSB) has been used in herbal medicine to treat diabetes mellitus and stomach ailments for thousands of years in Korea, despite its content of the plant allergen, urushiol. A new biological approach for the removal of urushiol from RVSB using mushrooms is described. All mushroom species (11 sp.) employed in this study were able to grow on RVSB, although the growth rate (mm/day) was lower than the control (sawdust). The components of urushiol congeners [C15 triene (m/z 314), C15 diene (m/z 316), C15 monoene (m/z 318), and C15 saturated (m/z 320)] were purified by HPLC and identified by GC-MS. A C15:3 (3-pentadecatrienly catechol) was found to be most abundant in RVSB. Urushiol analogues decreased remarkably from 154.15 to 10.73 mg/100 g (approximately 93%) by Fomitella fraxinea, whereas Trametes vercicolor showed only a 1.46% degradation capacity despite its 2 fold higher growth rate. Similarly, laccase activity was found to be high for F. fraxinea and low for T. vercicolor. Moreover, approximately 98% detoxification was accomplished by F. fraxinea cultivated on RVSB supplemented with 20%(w/w) rice bran. These findings suggest that mushrooms can be used in the detoxification of RVSB.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권2호
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• pp.264-271
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• 2006

Two fibrinolytic enzymes were purified from the culture supernatant of Fomitella fraxinea mycelia by ion-exchange and gel filtration chromatographies, and were designated as F. fraxenia proteases 1 and 2 (FFP1 and FFP2). The apparent molecular masses of the enzymes were estimated to be 32 kDa and 42 kDa, respectively, by SDS-PAGE and gel filtration chromatography. Both enzymes had the same optimal temperature ($40^{\circ}C$), but different pH optima (10.0 and 5.0 for FFP1 and FFP2, respectively). FFP1 was relatively stable at pH 7.0-9.0 and temperature below $30^{\circ}C$, whereas FFP2 was very stable in the pH range of 4-11 and temperature below $40^{\circ}C$. FFPI activity was completely inhibited by phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) and aprotinin, indicating that this enzyme is a serine protease. The activity of FFP2 was enhanced by the addition of $CO^{2+}$ and $Zn^{2+}$ and inhibited by $Cu^{2+},\;Ni^{2+}$, and $Hg^{2+}$. Furthermore, FFP2 activity was strongly inhibited by EDTA and 1,10-phenanthroline, implying that the enzyme is a metalloprotease. Both enzymes readily hydrolyzed fibrinogen, preferentially digesting the $A{\alpha}$- and $B{\beta}$-chains of fibrinogen over ${\gamma}$-chain. FFP1 showed broad substrate specificity for synthetic substrates, but FFP2 did not. $K_{m}$ and $V_{max}$ values of FFP1 for a synthetic substrate, N-succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA, were 0.213 mM and 39.68 units/ml, respectively. The first 15 amino acids of the N-terminal sequences of both enzymes were APXXPXGPWGPQRIS and ARPP(G)VDGQ(R,I)SK(L)ETLPE, respectively.