A peripheral nerve when approximation of the ends imparts tension at the anastomosis and with a relatively long segment defect after excision of neuroma and neurofibroma cannnot be repaired by early primary suture. The one of the optimistic reconstruction method of severed peripheral nerves is to restore tension-free continuity at the repair site putting an autogenous nerve graft into the neural gap despite of ancipating motor or sensory deficit of the donor nerve area. To overcome the deficit of the autogenous nerve graft, several other conduits supplying a metabolically active environment which is able to support axon regeneration and progression, providing protection against scar invasion, and guiding the regrowing axons to the distal stump of the nerve have been studied. An author have used ipsilateral femoral vein, ipsilateral femoral vein filled with fresh thigh muscle, and autogenous sciatic nerve for the sciatic nerve defect of around 10 mm in length to observe the regeneration pattern in rat by light and electron microscopy. The results were as follows. 1. Light microscopically regeneration pattern of nerve fibers in the autogenous graft group was more abundant than vein graft and vein filled with muscle group. 2. On ultrastructural findings, the proxial end of the graft in various groups showed similar regenerating features of the axons, myelin sheaths, and Schwann cells. The fascicular arrangement of the myelinated and unmyelinated fibers was same regardless of the type of conduits. There were more or less increasing tendency in the number and the diameter of myelinated fibers correlated with the regeneration time. 3. In the middle of the graft, myelinated nerve fibers of vein filled with muscle group were more in number and myelin sheath was thinner than in the venous graft, but the number of regenerating axons in autogenous nerve graft was superior to that in both groups of the graft. The amount of collagen fibrils and amorphous materials in the endoneurial space was increased to elapsed time. 4. There was no difference in regenerating patterns of the nerve fibers of distal end of the graft. The size and shape of the myelinated nerve fbers were more different than that of proximal and middle portion of the graft. From the above results, the degree of myelination and regenerating activity in autogenous nerve is more effective and active in other types of the graft and there were no morphological differences in either ends of the graft regardless of regeneration time.
Objective: To explore the clinical efficacy of gemcitabine concomitant with nedaplatin and drug resistance in the treatment of non-small cell lung cancer (NSCLC) and associated molecular predicators. Materials and Methods: A total of 68 patients diagnosed with NSCLC by histology served as the study objects and were randomly divided into an observation group treated with gemcitabine concomitant with nedaplatin and a control group with cisplatin concomitant with gemcitabine, 34 cases for each group. Short-term and long-term efficacies, adverse responses as well as the expression of nucleotide excision repair cross complementing 1 (ERCC1), ribonucleotide reductase subunit M1 (RRM1) and lung resistance-related protein (LRP) in NSCLC tissues in both groups were assessed. Results: The short-term objective response rate (ORR) and disease control rate (DCR) were 35.3% (12/34) and 76.5% (26/34) in the observation group and 38.2% (13/34) and 85.3% (29/34) in the control group, respectively, the differences not being statistically significant. The time to progression (TTP) in both groups were 1~12 months, while the median TTP was 135 d and 144 d, respectively. Though the survival was slightly higher in the control group, there were no significant differences in TTP and survival time. The rates of decreased hemoglobin, vomiting and nausea as well as renal toxicity were evidently lower in the observation group, while other adverse responses demonstrated no significant difference. The positive expression rates of ERCC1, RRM1 and LRP were 47.1% (16/34), 61.8% (21/34) and 64.7% (22/34) in the observation group, respectively. Compared with negative ERCC1 expression, ORR had decreasing trend and the overall survival time (OS) decreased significantly in patients with positive ERCC1 expression, which were markedly decreased by the positive expressions of RRM1 and LRP. Conclusions: Gemcitabine concomitant with nedaplatin has significant effects in the treatment of NSCLC, with an adverse response rate obviously lower than for cisplatin concomitant with gemcitabine, suggesting that wider use in the clinic is warranted. Additionally, the positive expressions of ERCC1, RRM1 and LRP may increase patient drug resistance, so they can be applied as the chemotherapeutic predicators to guide individualized therapy of NSCLC patients.
Naini, M Alizade;Mokarram, P;Kavousipour, S;Zare, N;Atapour, A;Zarin, M Hassan;Mehrabani, G;Borji, M
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제17권4호
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pp.2185-2193
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2016
Background: The pathogenesis of sporadic colorectal cancer (CRC) is influenced by the patient genetic background and environmental factors. Based on prior understanding, these are classified in two major pathways of genetic instability. Microsatellite instability (MSI) and CPG island methylator phenotype (CIMP) are categorized as features of the hypermethylated prototype, and chromosomal instability (CIN) is known to be indicative of the non-hypermethylated category. Secreted frizzled related protein 2 (SFRP2), APC1A in WNT signaling pathway and the DNA repair gene, O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT), are frequently hypermethylated in colorectal cancer. Detection of methylated DNA as a biomarker by easy and inexpensive methods might improve the quality of life of patients with CRC via early detection of cancer or a precancerous condition. Aim: To evaluate the rate of SFRP2 and MGMT hypermethylation in both polyp tissue and serum of patients in south Iran as compared with matched control normal population corresponding samples. Materials and Methods: Methylation-specific PCR was used to detect hypermethylation in DNA extracted from 48 polypoid tissue samples and 25 healthy individuals. Results: Of total polyp samples, 89.5% had at least one promoter gene hypermethylation. The most frequent methylated locus was SFRP2 followed by MGMT-B (81.2 and 66.6 percent respectively). Serologic detection of hypermethylation was 95% sensitive as compared with polyp tissue. No hypermethylation was detected in normal tissue and serum and its detection in patients with polyps, especially of serrated type, was specific. Conclusions: Serologic investigation for detection of MGMT-B, SFRP2 hypermethylation could facilitate prioritization of high risk patients for colonoscopic polyp detection and excision.
Purpose: In the finger, there are three major palmar arches in the arterial system. The location of this arches are constant. The middle and distal transverse arches are consistently large (almost 1 mm) and may be used for arterial vessel repairs either proximally or distally, depending on the length and direction needed. This paper describes our experiences in reconstruction and replantation of the finger using rerouting the transverse digital palmar arch. Methods: 31 patients with injuries according to our classification were treated from March of 2005 to October of 2008. In this study the authors subdivided injuries into those with amputation distal to the insertion of the flexor digitorum profundus (Class I, 31 fingers); those with amputation distal to the insertion of the flexor digitorum superficialis (Class II, 4 fingers). Replantation was performed using the artery-only technique with neither vein nor nerve repair. Because the artery has been damaged, it is still possible to make a direct suture by transposing the arterial arch in an inverted Y to I arterial configuration or converting the arch. Venous drainage was provided by an external bleeding method with partial nail excision, medical leech, and repaired margin. Results: The success rate was 87% (n=27) in class I and 75% (n=4) in class II. The authors conclude that crushing and complete avulsion injuries & amputations are salvageable, with acceptable functional results in select patients, especially those with amputation distal to the insertion of the flexor digitorum superficialis. Conclusion: We performed replantation and reconstruction with only-arterial transposing anastomosis successfully, resulting in good recovery of aesthetic and functional outcome. Three major digital palmar arches, especially distal two branches, give us additional treatment options. In the finger replantation and reconstructive techniques using rerouting healthy the transverse digital palmar arch increase the survival rate of the finger.
DNA회복합성과 염색체이상, 자매염색분체 교환 및 복제억제 현상과의 연관성을 추구하기 위해서 $HF_1$, CHO 및 $HeLa S_3$ 세포를 재료로 자외선 또는 MMS를 처리하기전 또는 후에 ara-C를 처리하여 그 효과를 비교 검토하였다. (1) Ara-C는 자외선 및 MMS에 의한 DNA회복합성을 억제하였으며 이 억제효과는 ara-C를 후 처리한 경우 더욱 현저하였다. (2) Ara-C는 자외선이나 MMS에 의한 염색체 이상율을 증가시켰다. 특히 MMS 처리후 ara-C를 처리한 실험군에서는 염색체이상율이 상승효과를 보였는데 이는 염색분체 절단이 증가된 때문이었다. (3) Ara-C는 염색체이상에서와는 달리 자외선이나 MMS에 의한 자매염색분체 교환율을 증가시키지 않았다. 이는 특히 MMS군에서 전처리한 경우에 뚜렷하였다. (4) Ara-C를 처리하면 DNA합성율이 즉시 감소했다가 회복되었다. 그러나 ara-C와 자외선 EH는 MMS를 복합처리하면 DNA 합성양상이 처음에는 ara-C의 영향처럼 보이다가 뒤에는 자외선 또는 MMS에 의한 반응과 같이 나타났다. 이같은 결과들은 ara-C가 DNA 상해요인이 아님에도 염색체이상 또는 염색체분체교환 유발요인으로 작용함을 나타내며, DNA 회복기작이 염색체이상, 자매염색분체교환 및 복제억제 현상과 직접적인 상관성이 없음을 시사하는 것이다.
Redox Factor-1 (Ref-1)은 손상된 DNA의 복구 및 많은 세포내 산화환원에 민감한 transcription factors의 활성화에 기여하는 양면의 역할을 수행하는 단백질이다. 본 연구에서는 혈관내피세포에서의 nitric oxide (NO) 생성과정에서 Ref-1의 역할을 살펴보았다. Ref-1의 세포내 과발현을 위하여 adenoviral vector를 사용하였고 bradykinin으로 자극한 혈관내피세포에서 생성되는 NO 측정을 위하여 fluorophore DAF-2를 사용하였다. Ref-1 과 발현은 bradykinin으로 자극한 혈관내피세포의 NO 생성을 증가시켰다. 또한 자극되지 않은 Ref-1 과발현 세포는 viral vector로 감염되지 않은 그리고 control로 사용한 AdD1312로 감염된 세포보다 높은 fluorescence intensity를 나타내었다. 이와 비슷하게, Ref-1 과발현은 bradykinin으로 자극한 세포뿐만 아니라 자극하지 않은 세포에서도 감염되지 않은 그리고 AdD1312로 감염된 세포와 비교할 때 endothelial NO synthase (eNOS)의 활성을 크게 증가시켰다. 이는Ref-1 자신이 eNOS의 효소활성을 직접 조절할 수 있다는 것을 의미한다. 결론적으로 Ref-1이 혈관계에서 NO생성에 의해 기인되는 endothelium-dependent vasorelaxation에서 중요한 역할을 한다는 것을 시사한다.
To evaluate criteria, indications, and prognosis of the various reconstructive methods on the patients with intraoral soft tissue defect who had been treated at Dept. of Oral and Maxillofacial Surgery, Pusan National University Hospital from 2003 to 2005, we have reviewed the clinical data of the patients and analysed. The results were as follows: 1. Tongue flaps have been mainly applied on anterior portion of palate and maxilla. The survival rate was high percent, but the cooperation of patient was inevitable for the success. 2. Palatal mucosa rotational flaps were available on relative large defect on palate, oroantral fistula site. The side effect was a scaring band from secondary healing on denuded donor palate site. Sometimes the band came to be a hinderance to swallowing, phonation. 3. Forearm free flap was a workhorse flap for everywhere in intraoral defects. We had used the flap on cheek, floor of mouth, tongue without any significant complications. But the application of the flap was required for long operation time, which was disadvantageous to the old, weak patients. 4. Cervical platysmal flap could be easily applicable for buccal cheek, floor of mouth after excision of the cancer lesion. The design of the flap could be made simultaneously on neck dissection, but the danger of cancer remnants on the flap always might be remained. 5. Buccal fat pad pedicled flap must have been a primary flap for repair of oroantral fistula especially on posterior maxilla. The flap survival will be expected if the considerations for above reconstructive methods on site, size, condition of defects primarily could be made.
T4 endonuclease V (T4 endo V) [EC 3. 1. 25. 1], found in bacteriophage T4, is responsible for excision repair of damaged DNA. The enzyme possesses two activities: a cyclobutane pyrimidine dimer DNA glycosylase (CPD glycosylase) and an apyrimidic/apurinic endonuclease (AP lyase). T4 denV (414 bp cDNA) encoding T4 en do V (138 amino acid) was synthesized and expressed using either an expression vector, pTriEx-4, in E. coli or a baculovirus AcNPV vector, pBacPAK8, in insect cells. The recombinant His-Tag/T4 endo V (rHis-Tag/T4 endo V) protein expressed from bacteria was purified using one-step affinity chromatography with a HiTrap Chelating HP column and used to make rabbit anti-His-Tag/T4 endo V polyclonal antibody for detection of recombinant T4 endo V (rT4 endo V) expressed in insect cells. In the meantime, the recombinant baculovirus was obtained by cotransfection of BacPAK6 viral DNA and pBP/T4 endo V in Spodoptera frugiperda (Sf21) insect cells, and used to infect Sf21 cells to overexpress T4 endo V protein. The level of rT4 endo V protein expressed in Sf21 cells was optimized by varying the virus titers and time course of infection. The optimal expression condition was set as follows; infection of the cells at a MOI of 10 and harvest at 96 h post-infection. Under these conditions, we estimated the amount of rT4 endo V produced in the baculovirus expression vector system to be 125 mg/l. The rT4 endo V was purified to homogeneity by a rapid procedure, consisting of ion-exchange, affinity, and reversed phase chromatographies, based on FPLC. The rT4 endo V positively reacted to an antiserum made against rHis-Tag/T4 endo V and showed a residual nicking activity against CPD-containing DNA caused by UV. This is the first report to have T4 endo V expressed in an insect system to exclude the toxic effect of a bacterial expression system, retaining enzymatic activity.
본 연구에서는 피부재생 화장품 소재로 활용하고자 저분자화 시킨 Polydeoxynucleotide (PDRN)의 창상 치유 효과를 조사하였다. 이를 위하여 연어 정소 유래 PDRN 단백질 제거공정, 내독소 제거공정을 거쳐 순수분리 정제하였고 분자량 저감공정을 거쳐 기존 PDRN 보다 피부 침투율을 높인 고순도 PDRN을 제조하였다. 상처 치료 과정 중 PDRN 처리에 의한 효능을 평가하기 위해 sprague-dawley rats (SD)의 배부에 bioxy punch를 이용한 4개의 창상을 유발하고, 시료를 포함한 총 5종의 실험시료를 마리당 $500{\mu}L$씩 도포한 후 7일 간격으로 4주간 피부조직 변화를 관찰하였다. 상처에 PDRN을 도포한 후, 절개된 상처의 표피화와 수축이 더 빨라졌고, 창상면적에 있어서 PDRN의 도포는 양성대조군인 $Fucidin^{(R)}$ 도포군과 비교하여 유의하게 줄어들었다. 염색한 조직의 현미경 관찰 결과에서는 양성대조군이 가장 빠르게 재상피화가 이루어졌으며, 그 다음으로는 PH군, PD군, HA군으로 교원질 재합성 및 형성 수준을 보였다. 또한, 병변의 형질전환성장인자($TGF-{\beta}$) 및 혈관 내피성장인자(VEGF) 등의 성장인자에서도 염색 조직의 결과와 유사하게 나타났다. 이러한 결과를 종합하여 볼때, 저분자화된 PDRN은 창상에 치료효과가 있다고 판단되며, 화장품 및 의료산업 분야의 기능성 소재로 활용 가능할 것으로 판단되어 진다.
Objective: The present study was executed to explore the molecular mechanism of fibroblast growth factor 10 (FGF10) gene in bovine adipogenesis. Methods: The bovine FGF10 gene was overexpressed through Ad-FGF10 or inhibited through siFGF10 and their negative control (NC) in bovine adipocytes, and the multiplicity of infection, transfection efficiency, interference efficiency were evaluated through quantitative real-time polymerase chain reaction, western blotting and fluorescence microscopy. The lipid droplets, triglycerides (TG) content and the expression levels of adipogenic marker genes were measured during preadipocytes differentiation. The differentially expressed genes were explored through deep RNA sequencing. Results: The highest mRNA level was found in omasum, subcutaneous fat, and intramuscular fat. Moreover, the highest mRNA level was found in adipocytes at day 4 of differentiation. The results of red-oil o staining showed that overexpression (Ad-FGF10) of the FGF10 gene significantly (p<0.05) reduced the lipid droplets and TG content, and their down-regulation (siFGF10) increased the measurement of lipid droplets and TG in differentiated bovine adipocytes. Furthermore, the overexpression of the FGF10 gene down regulated the mRNA levels of adipogenic marker genes such as CCAAT enhancer binding protein alpha (C/EBPα), fatty acid binding protein (FABP4), peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ), lipoprotein lipase (LPL), and Fas cell surface death receptor (FAS), similarly, down-regulation of the FGF10 gene enriched the mRNA levels of C/EBPα, PPARγ, FABP4, and LPL genes (p<0.01). Additionally, the protein levels of PPARγ and FABP4 were reduced (p<0.05) in adipocytes infected with Ad-FGF10 gene and enriched in adipocytes transfected with siFGF10. Moreover, a total of 1,774 differentially expressed genes (DEGs) including 157 up regulated and 1,617 down regulated genes were explored in adipocytes infected with Ad-FGF10 or Ad-NC through deep RNA-sequencing. The top Kyoto encyclopedia of genes and genomes pathways regulated through DEGs were the PPAR signaling pathway, cell cycle, base excision repair, DNA replication, apoptosis, and regulation of lipolysis in adipocytes. Conclusion: Therefore, we can conclude that the FGF10 gene is a negative regulator of bovine adipogenesis and could be used as a candidate gene in marker-assisted selection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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