한국산 재래종 호박 완숙과의 총세포벽 물질, 펙틴, 총단백질, 단백질을 구성하고 있는 아미노산 및 유리아미노산의 함량을 비교 조사하였다. 과육의 단백질 함량은 ‘제주 2’가 $2,830\;{\mu}g/g$으로 가장 높았고 '상주'는 $1,319\;{\mu}g/g$으로 가장 낮았다. 세포벽물질은 ‘강화’가 2,961 mg%로 가장 높았고, '남해'는 1,582 mg%로 가장 낮았다. 또한 세포벽 물질 내 펙틴의 함량은 ‘강화'(2,198 mg%), '제주 2'(2,178 mg%) 및 ’제주 1'(1,461 mg%)의 순서로 높았다. 또한 세포벽 물질 내 펙틴은 수용성과 불용성 펙틴이 주류를 이루고 있음을 알 수 있었다. 아미노산 함량조성은 품종에 따라 다소 차이는 있지만 glutamic acid, aspartic acid, lysine, leucine 및 valine이 주를 이루어 전체 아미노산 함량의 50% 이상을 차지하였고, 특이하게도 '제주 2'는 aspartic acid와 threonine이 검출되지 않았다. 한편 완숙과 호박의 과육 내 유리 아미노산은 8종의 필수아미노산(histidine, isoleucine, leucine, lysine, phenylalanine, methionine, threonine 및 valine)을 비롯해 총 34종류의 유리아미노산이 검출되었고 aspartic acid와 asparagine의 함량이 전체 유리아미노산 중 50% 이상으로 가장 높았다. 또한 이뇨작용과 관련된 ornithine, citrulline, arginine이 모든 품종에서 검출되었으며 ornithine과 citrulline은 품종간에 큰 차이가 없었으나 arginine은 ‘남해’가 4.3 mg%이었으며, ‘태안’이 29.34 mg%로 품종간에 7배의 큰 차이를 보였다.
가공 후 폐기되는 수산가공부산물의 이용성을 높이고, 식품첨가물로서의 식품 산업 적용에 대한 가능성을 조사하기 위하여 잉어 및 연어의 두부를 이용하여 열수추출물을 제조하고 이들의 일반적인 성상을 검토한 결과 제조된 열수추출물은 모두 지질은 검출되지 않았으며, 단백질 함량이 약 $80\%$ 정도로 아주 높게 나타났다. 열수추출조건에 따른 일반성분은 아무런 상관관계를 보이지 않았으며, 수율에 있어서 열수추출물은 가수량이 많고 가열시간이 증가할수록 증가하는 경향을 보였다. 잉어 및 연어 두부 열수추출물 모두 가열시간이 증가할수록 가수분해도가 증가한 반면 가수량은 작을수록 가수분해도가 높게 나타났다. 구성아미노산 조성을 살펴본 결과, 전체 아미노산 중에서 Glu가 가장 많은 부분을 차지하였으며 필수아미노산의 경우는 식물성 단백질에 부족하기 쉬운 Lys의 함량이 높게 나타났다. 유리아미노산은 $\delta$-Hydroxylysine의 함량이 가장 높았으며, L-Glutamic acid와 L-Histidine은 잉어 두부 열수추출물이 연어보다 5배정도 높은 함량을 보여주었다. 열수추출물의 유동곡선을 살펴본 결과, 열수추출물 용액은 전형적인 Newtonian 유체임을 알 수 있었다. 표준 백색판을 기준으로 하여 측정한 열수추출물의 색도는 전체적으로 백색도는 낮고 적색도와 황색도는 높게 나타났다.
본 연구는 양 육수의 선행연구가 이루어지지 않은 가운데 육수의 제조 시 소금을 첨가 하였을때 표준화된 육수개발의 정확한 방향을 제시하고 고압추출기를 이용한 균일화를 이룬 대량생산의 개발을 시도하고자 하였다. 염도 측정의 결과는 소금 첨가량이 증가할수록 양 육수의 염도는 시료간의 유의적(p<0.001)으로 높아지는 경향을 보여, 소금 0.4% 첨가군이 0.57로 가장 높은 염도값을 나타내었고, 당도는 소금 첨가량이 증가할수록 양 육수의 당도는 유의적(p<0.001)으로 높아지는 경향을 보였다. 아미노산 분석에서 0.1% 첨가군이 32종, 0.2%, 03% 첨가군이 34종, 0.4% 첨가군이 33종 검출되었다. 검출량 또한 소금 0.3% 첨가군이 가장 많았고, 그 다음은 0.2% 첨가군> 0.4% 첨가군 > 0.1 첨가군 > 대조군 순서로 소금첨가량 증가 시 유리아미노산 함량이 높아지는 것을 알 수 있었다. 또한 실험군의 경우 필수 아미노산 9종이 검출되었고, 어린이의 성장에 필요한 histidine과 arginine이 모든 시료에서 검출되었다. 모든 시료 중에 arginine의 함량이 가장 높은 것으로 나타났고, 각 필수 아미노산은 첨가량에 따라 유의적인 차이를 나타내었다. 관능감사 중 특성차이검사 결과 색의 강도(color intensity)는 소금 0.1% 첨가군이 4.86으로 가장 높았으며, 소금 0.4% 첨가군이 3.24로 가장 낮은 값을 나타냈으나 소금의 첨가량에 따라 증감의 차이가 없었다. 삼킨 후의 느낌(after Taste)은 0.3%를 첨가 하였을 때 가장 높게 평가되었으며 각 시료 간 에는 유의적(p<0.001)인 차이를 보였다. 외관(appearance)은 대조군이 4.32로 가장 높았으며, 소금 0.2% 첨가군이 3.63으로 가장 낮은 값을 나타내었다. 맛(taste)의 기호도에서는 소금 0.3% 첨가군이 4.09로 가장 높았고, 각 시료 간에는 유의적인 차이를 보였다. 전체적인 기호도(overall quality)에서는 소금 0.3% 첨가군이 4.23으로 가장 높은 값을 나타냈고, 대조군이 3.52로 가장 낮은 값을 나타내었으며, 각 시료 간에는 유의적인 차이를 보였다. 이상의 실험결과 양 육수를 제조할 때 소금첨가량은 0.3%가 가장 적합한 것으로 사료된다. 양 육수 제조 시 적절한 소금의 첨가는 필수 아미노산의 용출을 촉진하며 위생적 안정을 확보하고 관능적으로 더욱 뛰어난 품질의 육수를 제조할 수 있다는 가능성을 볼 수 있었다.
Moon, H.K.;Kim, J.W.;Heo, K.N.;Kim, Y.H.;Kim, S.W.;Kwon, C.H.;Shin, I.S.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제7권4호
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pp.537-546
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1994
This experiment was carried out to compare the effects of six different plant protein sources such as soybean meal, extruded full-fat soybean, canola meal, rapeseed meal, cottonseed meal and perilla meal as a sole protein source of diets on growth performance and amino acid bioavailabilities in growing-finishing pigs. A total of 54 pigs with average 25 kg of body weight were used as experimental subjects for a 65-d feeding trial. Digestion trial was carried out with seven ileal-cannulated pigs. The most rapid rate of weight gain was observed in pigs fed soybean meal and full-fat soybean, the moderate one in pigs fed canola meal and cottonseed meal and the least one in pigs fed rapeseed meal and perilla meal (p<0.005). Feed efficiency was better for groups fed soybean meal and full-fat soybean than other protein meals (p<0.05). The apparent ileal digestibilities of essential amino acids of soybean meal and full-fat soybean (82.5% and 81.6%) were significantly (p<0.05) higher than those of other protein sources (61.2 to 69.4%). Regardless of protein sources, the apparent ileal digestibility of arginine was highest, whereas that of histidine was lowest among essential amino acids. Proline had the lowest digestibility among non-essential amino acids. True amino acid digestibilities tended to be higher than apparent amino acid digestibilities. The differences between true and apparent ileal digestibilities were greater in canola meal, rapeseed meal or cottonseed meal than other protein sources. The differences was greatest in praline except for cottonseed meal. The fecal digestibility appeared to be higher than the ileal digestibility. The differences between fecal and ileal digestibilities were greater in canola meal, rapeseed meal, cottonseed meal and perilla meal than in soybean meal and full-fat soybean. In general, praline was the most disappeared amino acid in the hind gut, while the net synthesis of lysine in the large intestine was observed in all protein sources except perilla meal. It is appropriate that swine feeds should be formulated based on true ileal amino acid digestibility of protein sources for pig's normal growth.
Meat and bone meal is a valuable protein and mineral source in diets of production animals and contributes to the protein, energy and mineral component of diets. The aim of the present study was to more accurately characterise the apparent ileal amino acid digestibility of meat and bone meals produced in New Zealand and evaluate routine in vitro assays used in practise to measure meat and bone meal quality. A total of 94 commercial meat and bone meals from 25 New Zealand rendering plants over a two and a half year period were analysed for proximates, gross energy, gross amino acid content (incl. hydroxyproline, hydroxylysine and lanthionine), apparent ileal amino acid digestibility, pepsin nitrogen digestibility, protein solubility and bone content. The mean crude protein content of the 94 meat and bone meal samples was 56.8% with a range of >35% units and a coefficient of variation of 9.8%. The mean crude fat and ash content were 10.0 and 28.4% respectively. These latter components showed a large range (16 and 43%, respectively) with coefficients of variation above 22%. Amino acid digestibility between samples was highly variable with lysine and sulphur amino acids digestibility ranging between 45.8-89.0 and 38.2-85.5%, respectively. Pearson correlation coefficients are presented between crude protein content and individual gross amino acids, crude protein content and individual digestible amino acid content, and pepsin N digestibility and individual digestible amino acid content. There was a significant relationship between the digestible amino acid nitrogen content and the crude protein content while pepsin nitrogen digestibility was not correlated to ileal amino acid nitrogen digestibility (r=-0.06). Meat meals with a high protein content had relatively low hydroxyproline and hydroxylysine levels something that was attributed to the levels of collagen from bone. The data indicated that lanthionine (formed upon heat treatment of cysteine with a hydroprotein) is not a good indicator of the heat treatment employed to meat and bone meals. Step-wise multiple regression equations to predict the apparent digestible content of amino acids from rapid in vitro assays are presented. The most selected variables included ash and crude fat content. In general the equations derived for the essential amino acids had a higher degrees of fit (R2) compared to the non-essential amino acids. The R2 for the essential amino acids ranged from 0.43 for histidine and 0.68 for leucine. These equations provide a means of more rapidly estimating the apparent ileal digestible amino acid content (protein quality) of meat and bone meal using standard analyses.
본 시험은 각각의 필수아미노산 결핍사료 섭취에 의한 단기간의 섭식반응과 methionine 결핍(-Met) 사료 섭취시 뇌내 각 부위에 나타나는 Fos 면역반응을 조사하여 아미노산 결핍이 뇌내 섭식반응과 관련있는 부위를 명확히 알고자 수행하였다. 실험사료의 단백질원은 정제아미노산을 이용하였다. 시험에 이용된 모든 사료의 질소원은 순수 아미노산 혼합물을 이용하였으며, 사료내 단백질 함량은 15%로 하였다. 사료는 하루 6시간 동안 섭취하도록 적응을 시켰으며(17:00${\sim}$21:00, meal feeding method), 사료섭취량과 증체량은 사료급여 7일째부터 매시간 측정하였다. 실험 1에서는 각 필수아미노산 결핍사료가 사료섭취량, 체중 변화 및 섭식패턴에 미치는 영향을 관찰하였고, 실험 2에서는 Fos 면역조직 화학적 방법을 사용하여 methio- nine 결핍사료에 대하여 회피 반응을 나타내는 동안에 활성을 보이는 뇌의 영역을 확인하였다. 각 필수아미노산 결핍사료 섭취에 따른 초기 섭식 억제 정도는 methionine이 가장 강하게 나타난 반면 threonine이 가장 약하였다. 결핍사료 급여 3일째의 사료섭취량은 대조구 사료에 비하여 histidine(71%), leucine(68%), isoleucine (66%), threonine(63%), tryptophan(61%), valine (55%), phenylalanine(52%), methionine(51%), lysine(44%), arginine(24%) 순으로 억제되었다. 뇌 신경 영역에 Fos 면역활성은 PPC, amygdala 및 endopyriform cortex(EPC) 부분이 대조구에 비하여 강한 활성을 나타냈으나, LH, VMH 및 PVM에서는 대조구와 처리구가 비슷하게 나타냈다. 따라서 본 연구의 결과로 미루어 뇌내 PPC는 필수아미노산 결핍에 반응하는 초기 인식부위라는 것을 확인할 수 있었다.
Park, Jin-Seu;Lee, Han-Gyu;Lee, Yoon;Kang, Young-Hee;Rhim, Hyang-Shuk;Choi, Soo-Young
BMB Reports
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제33권4호
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pp.337-343
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2000
The human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), transactivator of transcription (Tat), is one of the viral gene products that is essential for HIV-1 replication. The HIV-l Tat protein regulates transcription from an HIV-1 long terminal repeat (LTR) and affects the gene expression of cellular proteins during infection. In order to develop an expression system to overexpress and simply purify HIV-1 Tat proteins, the HIV-1 Tat coding sequences that contain one or two exons were amplified using PCR and cloned into a pET vector, which contains a consecutive stretch of six histidine residues at the amino-terminus. The reconstituted vectors were overexpressed in the E. coli strain and the soluble recombinant proteins were purified to be homogeneity in a single step by $Ni^{+2}-nitrilotriacetic$ acid Sepharose chromatography under nondenaturing conditions. Recombinant HIV-1 Tat proteins were shown to transactivate the HIV-1 LTR promoter in a dose-dependent manner when introduced into mammalian cells. In addition, treatment of human endothelial cells with purified Tat proteins resulted in a significant increase in the level of vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) expression. These results indicate that the recombinant HIV-1 Tat proteins are active in transactivating viral and cellular promoters. The expression and purification system described in this study will facilitate in characterizing the biological functions of the Tat proteins.
A bacterial strain PN33 producing large amounts of extracellular pectin lyase (PNL, EC 4.2.2.10) was isolated from soil. The isolated bacterium was identified as a strain of Bacillus sp. Production of PNL by the strain was induced only by pectins, with a higher degree of esterification, which had been added to the culture medium as a sole carbon source. The optimal medium for PNL production was determined to consist of 10 g pectin, 2 g yeast extract, 4 g $K_2HPO_4{\cdot}3H_2O$, 0.6 g $MgSO_4$, and 0.11 g $CaCl_2$ per liter (pH 7.0). The PNL activity in the culture supernatant reached the highest level of 132 mU/ml after 32 h cultivation at $37^{\circ}C$ in the optimal medium. The PNL produced was purified to homogeneity by ammonium sulfate fractionation (50~80%), and cation exchange and size exclusion chromatographies. The molecular mass of the enzyme was estimated to be approximately 52 kDa by SDS-PAGE. Almost the same mass was determined by nondenaturing PAGE, indicating that the functional enzyme had a monomeric structure. As expected, the PNL exhibited higher activities on the highly esterified pectins whereas it gave no detectable activity on polygalacturonic acid. The enzyme showed the highest activity at the acidic pH of 6.0, exceptional for a bacterial PNL. Maximum activity was measured at $40^{\circ}C$, although the stability f the purified enzyme was poor at this temperature. alcium (1 mM) was found to activate the PNL activity by $50\%$, and also remarkably increased the thermal stability f the enzyme. Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) and iethylpyrocarbonate (DEPC) inhibited the PNL activity lmost completely at the concentration of 5 mM. This result ndicates that some serine and histidine residues of the nzyme may play an essential role for catalytic function of he enzyme.
Park, Hyoung-Goo;Lim, Young-Ran;Han, Songhee;Jeong, Dabin;Kim, Donghak
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권5호
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pp.983-989
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2017
NADPH-P450 reductase (NPR) transfers electrons from NADPH to cytochrome P450 and heme oxygenase enzymes to support their catalytic activities. This protein is localized within the endoplasmic reticulum membrane and utilizes FMN, FAD, and NADPH as cofactors. Although NPR is essential toward enabling the biochemical and pharmacological analyses of P450 enzymes, its production as a recombinant purified protein requires a series of tedious efforts and a high cost due to the use of $NADP^+$ in the affinity chromatography process. In the present study, the rat NPR clone containing a $6{\times}$ Histidine-tag (NPR-His) was constructed and heterologously expressed. The NPR-His protein was purified using $Ni^{2+}$-affinity chromatography, and its functional features were characterized. A single band at 78 kDa was observed from SDS-PAGE and the purified protein displayed a maximum absorbance at 455 nm, indicating the presence of an oxidized flavin cofactor. Cytochrome c and nitroblue tetrazolium were reduced by purified NPR-His in an NADPH-dependent manner. The purified NPR-His successfully supported the catalytic activities of human P450 1A2 and 2A6 and fungal CYP52A21, yielding results similar to those obtained using conventional purified rat reductase. This study will facilitate the use of recombinant NPR-His protein in the various fields of P450 research.
This study was performed to develop and evaluate cookies prepared with various amounts (0 g, 12.5 g, 25 g and 37.5 g) of mealworm powder to serve as not only sports snacks but also for the general population as a new protein source. In the chromaticity of mealworm cookies, lightness and yellowness decreased whereas redness increased with more mealworm powder. The hardness of the mealworm cookies increased as more mealworm powder was added. In sensory evaluation, higher preference was shown with the measure of color, taste, and overall preference for mealworm cookies prepared with 50% mealworm powder (MP2). For the general composition of MP2, the moisture, carbohydrate, crude protein, crude fat and crude ash were higher compared with the control cookie. For the mineral contents of MP2, the contents of Ca (33.44 mg/100 g), P (225.13 mg/100 g), Mg (82.21 mg/100 g), Na (246.22 mg/100 g), and K (503.49 mg/100 g) were higher compared with the control cookie. The essential amino acids (valine, isoleucine, leucine, methionine, threonine, phenylalanine, and histidine) in MP2 were also higher compared with the control cookie. It was concluded that MP2 can be used as a new protein source for not only the maintenance of muscle but also for the prevention of muscle loss in old people.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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