• Archives of Pharmacal Research
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• 제21권3호
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• pp.305-309
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• 1998

Human cytochrome P450 1A2 is one of the major cytochrome P450s in human liver. It is known to be capable of activating a number of carcinogens such as arylamines and heterocyclic amines. In order to develop the new bacterial mutagenicity test system with human P450, a full length of human P450 1A2 cDNA inserted into pCW bacterial expression vector was introduced to Escherichia coli WP2 uvrA strain which is a well-known E. coli strain for bacterial reverse mutagenicity assay. Expressed human P450 1A2 showed typical P450 hemoprotein spectra. Maximum expression was achieved at 48 hrs after incubating at $30^{\circ}C$ in terrific broth containing ampicillin, IPTG and other supplements. High level expression of P450 1A2 in E. coli WP2 uvrA membranes was determined in SDS-PAGE. The well-known mutagens 2-aminoanthracene and MElQ increased the revertant colonies of E. coli WP2 uvrA expressing human P450 1A2 without an exogenous rat hepatic post-mitochondrial supernatant (S9 fraction) in a dose-dependent manner. The results show that the functional expression of human P450 in bacterial mutagenicity tester strain will provide a useful tool for studying the mechanism of the mutagenesis and carcinogenesis of new drugs and environmental chemicals.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제14권3호
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• pp.259-264
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• 1999

Xylooligosaccharide의 세균에 대한 돌연변이 유발성을 검색하기 위하여 Salmonella typhimurium의 히스티딘 요구성균주 TA100, TA1535, TA98 및 TA1537의 4개 균주와 대장균 Escherichia coli의 트립토판 요구성 균주인 WP2 uvrA를 이용해 복귀돌연변이 시험을 실시하였다. 시험 물질은 증류수에 용해하여 처리하였으며, 대사 활성계 미적용 및 적용하에 $5000\;\mu\textrm{g}/plate$를 최고농도로 하고 공비 2로서 5단계 농도군(313, 625, 1250, 2500 및 $5000\;\mu\textrm{g}/plate$)과 음성 및 양성 대조군으로 시험군을 구성해 본 시험을 실시하였다. 시험 결과 시험물질을 처리한 모든 농도군에서 복귀돌연변이 집락 수는 음성대조군과 비슷한 정도로 관찰되었다. 이상의 결과에서, xylooligosaccharide는 본 시험 조건 하에 사용한 균주들에 복귀돌연변이를 유발하지 않는 것으로 사료되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제31권1호
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• pp.246-251
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• 1999

다양한 유전형질을 갖고 있는 E. coli WP series, E. coli TK series 및 E. coli GW series 변이주들을 이용하여 chloropropanol의 변이원성 기구를 해석하였다. 3종류의 chloropropanol 모두 E. coli WP2s와 WP67에서는 돌연변이활성이 나타났으나 E. coli WP2와 CM611에서는 변이원성이 거의 나타나지 않았으며 2,3-DCP>3-MCPD>1,3-DCP 순으로 돌연변이 활성을 나타내었다. E. coli WP2s와 비교하여 E. coli WP2 $(WP2s\;uvrA^+)$에서 돌연변이활성이 크게 감소한 반면 균 생존율이 상당히 증가한 결과로부터 절제수복에 의해 쉽게 제거되는 DNA 손상임을 확인할 수 있었으며, E. coli CM611(WP2s lexA102)에서 돌연변이활성 및 균 생존율 모두 상당히 감소된 결과로부터 이들 물질에 의한 주요 DNA 손상이 SOS 수복 의존성임이 시사되었다. 또한 E. coli TK610 (umuC)에서의 돌연변이율과 균 생존율은 그 대조 균주인 E. coli TK603 $(umuC^+)$에 비하여 상당히 감소하여 chloropropanol에 의한 돌연변이 유발은 umuC가 관여하는 SOS 수복을 통하여 일어나는 것으로 확인되었다. E. coli GW1105 [lexA3 (Ind)]와 GW1107 [lexA51 (Def)] 두 균주에서 ${\beta}-galactosidase$의 활성이 chloropropnaol 첨가에 의해 변화하지 않았기 때문에 SOS 반응의 repressor로 작용하는 LexA에 대하여 chloropropnol이 직접적으로 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 따라서 chloropropanol에 의한 DNA 손상은 가장 기본적인 수복계라 할 수 있는 절제수복에 의하여 제거될 수 있으며, 돌연변이의 발생은 주로 SOS 수복계를 통하여 일어남을 확인할 수 있었다.

• KSBB Journal
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• 제16권5호
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• pp.486-492
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• 2001

숙지황 물추출물로부터 분리된 fraction(RG-III) 의 항돌연변이원성의 기작을 E. coli GW, B/r 균주를 이용하여 조사하였다. SOS 유도를 반영하는 $\beta$-galactiosidase 활성이 E. coli GW 1060, 1103, 1107, 1105에서 증가되지 않았다. RG-III는 RecA는 단백질의 합성을 증폭시키거나 LexA 산물의 분해를 저해하지 않았으므로 SOS en 기능의 발현이 영향을 미치지 못했다. 따라서 DNA 수복의 경로가 다른 E. coli B.r 변이주를 사용하여 4NQO와 MNNG에 대한 세포내 항돌연변이원성과 생존효과를 조사하였다. ZA159(uvrB, 최)를 제외한 WP2, WP2s, WP67, CM561, CM611에서 RG-III는 4NQO에 대한 생존력을 미약하게나마 증가시켰으나, 이러한 생존력 재활성을 수복모드에 의해 설명할 수 없었다. WP2, WP2s, WP67, CM561, CM611에서 RG-III는 MNNG로 유도된 돌연변이원성과 치사력을 증가시킴에도 불구하고 ZA159(uvr B, chl)에서는 감소시켰다. 4NQO의 변이원성을 두드러지게 억제하였으나 ZA159(uvr B, chl)에서 상승효과가 상대적으로 감소되었다. 이러한 결과들은 RG-III가 4NQO의 변이원성을 방어하는 차단제임을 시시하여, chl 산물의 기능과 유사한 작용을 하는 것으로 사료된다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제19권4호
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• pp.193-197
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• 2004

산삼배양추출물의 세균에서의 돌연변이 유발성 검색을 위하여 Salmonella typhimurium의 히스티딘 요구성 균주 LA100, TA1535, TA98 및 TA1537의 4개의 균주와 대장균 Escherichia coli의 트립토판 요구성 균주인 WP2 uvrA를 이용해 복귀돌연변이 시험을 실시하였다 시험물질은 멸균생리식염수에 용해하여 처리하였다. 대사활성계 적용 및 미적용시 모든 균주에 대해 0, 62, 185, 556, 1,667 및 5,000{\mu}g/plate의 범위를 설정하고 각각 음성 및 양성대 조군으로 시험군을 구성해 본 시험을 실시하였다. 시험 결과 모든 균주에서 최고농도에 이르기까지 집락수의 일관성 있는 증가는 나타나지 않았다. 이상의 결과를 종합할 때, 시험물질 산삼배양추출물은 본 시험조건 하에 사용한 시험균주들의 복귀돌연변이를 유발하지 않는 것으로 사료된다.

• 농약과학회지
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• 제15권4호
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• pp.374-382
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• 2011

제초제인 methiozolin에 대한 유전독성 영향을 평가하기 위하여 in vitro 시험으로 복귀돌연변이시험과 염색체 이상시험을 수행하였고, 그리고 in vivo 시험으로 소핵시험을 수행하였다. Salmonella typhimurium, 균주 TA98, TA100, TA1535 및 TA1537 및 Escherichia coli WP2uvrA를 이용한 복귀 돌연변이 시험에서 직접법과 대사활성화법(S9 mixture) 모두 $5,000{\mu}g$/plate에서 돌연변이 수는 음성 대조군과 유의차가 없었다. Chinese hamster lung(CHL) 세포를 이용한 구조적, 숫적 염색체 이상시험결과 직접법과 대사활성화법의 경우 methiozolin을 투여한 모든 군(80, 40, $20{\mu}g$/mL)의 세포에서 염색체 이상이 관찰되지 않았다. ICR 마우스를 이용한 소핵시험에서는 methiozolin의 복강투여가 골수세포에서 다염성 적혈구(polychromatic erythrocytes) 및 소핵(micronucleous)을 가진 다염성 적혈구의 출현율을 조사하였는데, 모든 농도(1,500, 1,000, 500 mg/kg)에서 음성대조군과 유의한 차이가 나타나지 않아 소핵을 유발하는 독성이 없는 것으로 판단된다. 이상의 결과로부터 제초제인 methiozolin은 세균, 세포 및 동물체내에서 유전독성을 유발하지 않는 물질로 사료된다.

• Toxicological Research
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• 제29권4호
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• pp.279-283
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• 2013

Acanthopanax koreanum Nakai, a well known traditional herb grown in Jeju Island, South of Korea, has been used as a tonic and sedative agent, as well as in the treatment of diabetes and immune diseases. Mutagenicity of two lignans, syringaresinol and tortoside A isolated from A. koreanum, was assessed using Salmonella/microsome (Ames) test. Tester strains used were Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, and Escherichia coli WP2uvrA. The mutagenic activity was determined both in the absence or presence of S9 mixture. As a result, tortoside A did not cause any increase in the number of $his^+$ revertants in S. typhimurium and E. coli WP2uvrA strains in the presence or absence of S9 mix, compared to the controls. Similarly, low concentrations of syringaresinol (750 and 1,500 ${\mu}g$/plate) did not show any mutagenic properties in all bacterial strains, in the presence or absence of S9 mixture. However, in the high concentration of syringaresinol (3,000 ${\mu}g$/plate), the number of revertants were increased in TA1535 strains, in the absence of S9 metabolic activation. Therefore, in vivo experiments such as comet assay are needed to further determine the genotoxic/carciogenic potential of syringaresinol isolated from A. koreanum.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권7호
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• pp.1192-1200
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• 2004

감마선 조사(10 kGy)된 멸치 액젓의 유전독성 학적 안전성 시험을 수행하기 위해 Salmonella Typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537과 E. coli WP2 uvrA 균주를 사용한 복귀돌연변이시험과 Escherichia coli PQ37을 이용한 SOS chromotest 및 CHL 세포를 이용한 염색체 이상시험을 활성대사효소계 미적용 및 적용하에 실시하였고, ICR마우스의 골수세포를 이용한 in vivo 소핵세포실험을 수행하였다. 감마선 조사(10kGy)된 멸치액젓은 위의 3가지 in vitro실험에서 비조사 된 멸치액젓과 마찬가지로 음성으로 나타났다. 또, 감마선 조사 및 비조사된 멸치 액젓의 in vivo소핵세포실험에서도 소핵이 발견되지 않았다. 따라서 10kGy까지 감마선 조사된 멸치 액젓은 위 수행된 in vitro 및 in vivo 유전독성 시험을 실시한 결과, 음성을 나타낸 것으로 보아 유전독성학적으로 돌연변이원성이 없는 것으로 확인되었다.

• Toxicological Research
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• 제29권3호
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• pp.217-219
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• 2013

Hypertension is a serious health problem due to high frequency and concomitant other diseases including cardiovascular and renal dysfunction. Olmesartan cilexetil is a new antihypertensive drug associated with angiotensin II receptor antagonist. This study was conducted to evaluate the mutagenicity of olmesartan cilexetil by bacterial reverse mutation test using Salmonella typhimurium (TA100, TA1535, TA98, and TA1537) and Escherichia coli (WP2 uvrA). At the concentrations of 0, 62, 185, 556, 1667, and 5000 ${\mu}g$/plate, olmesartan cilexetil was negative in both Salmonella typhimurium and Escherichia coli regardless of presence or absence of metabolic activation system (S9 mix). These results demonstrate that olmesartan cilexetil does not induce bacterial reverse mutation.

• 대한한의학회지
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• 제32권1호
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• pp.67-83
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• 2011

Objectives: The purpose of this study was to examine the single dose toxicity with oral administration and genotoxicities of Ssanghwa-tang fermented with Lactobacillus acidophyllus. Materials and Methods: Clinical signs, weight changes, lethal doses$(LD_{50})$, and postmortem evaluation were determined by Globally Harmonized Classification System(GHCS) in a single-dose oral toxicity study. In vitro mammalian chromosomal aberration test was conducted with Ames test by cell proliferation suppression assessment using the cultivated CHO-K1(Chinese hamster ovary fibroblast) origins. Bacterial reversion assay was performed using Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and Escherichia coli (WP2uvrA). In vivo micronucleus test was performed using ICR mouse bone marrow. Results: No clinical sign was observed and none of the groups with doses up to 2000 mg/kg showed significant acute oral toxicity in the single dose oral administration. None of the sample doses taken during the 6 to 18 hour groups showed significant aberrant metaphases comparing to the negative control group in the in vitro mammalian chromosomal aberration test. No evidence of mutagenicity was seen for Escherichia coli (WP2uvrA) or Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537). No significant increase in the frequency of micronuclei was seen in the micronucleus test. Conclusion: These results indicate that the $LD_{50}$ value of Ssanghwa-Tang fermented with Lactobacillus acidophyllus may be over 2000 mg/kg and it have no acute oral toxicity and genotoxicity.