• 제목/요약/키워드: Enterobacterial repetitive intergenic consensus(ERIC) fingerprinting

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리스테리아균의 특성분석을 위한 Molecular Typing 방법의 상호보완 (Enhanced Discrimination of Listeria spp. Using RAPD Fingerprinting Complemented by Ribotyping-PCR)

  • 임형근;홍종해;박경진;최원상
    • 생명과학회지
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    • 제13권5호
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    • pp.699-704
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    • 2003
  • 리스테리아를 보다 효과적으로 typing할 수 있는 방법을 찾기 위해 표준균주 13종을 대상으로 하여 RAPD, ERIC (Enterobacterial repetitive intergenic consensus) fingerprinting, ribotyping-PCR의 분리력을 비교해 보았다. DG107 (primer 6) 또는 DG122 (Lis 11) primer를 이용한 RAPD의 경우 11가지의 유형으로 분류되는 반면, ERIC fingerprinting은 9가지, ribotyping-PCR은 7가지씩의 유형을 보였다. 그러나 2가지 primer를 이용하여 각각 행한 RAPD 결과를 종합하거나, DG122를 이용한 RAPD와 ribotyping-PCR의 결과를 종합할 경우 13가지의 유형으로 모두 분리할 수 있었다.

Repetitive Element-PCR (rep-PCR)을 이용한 Vibrio parahaemolyticus 의 분자유전학적 아형 분류 (Molecular Typing of Vibrio parahaemolyticus by Repetitive Element-PCR (rep-PCR))

  • 김원식;홍승복;이경;이정남;신경섭
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제36권1호
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    • pp.1-6
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    • 2004
  • The enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC)-PCR is a recently described DNA fingerprinting technique based on amplification of repetitive element distributed in bacteria. We applied of ERIC-PCR to clinical isolates of Vibrio parahaemolyticus and other bacteria associated diarrhea. Twenty isolates of V. parahaemolyticus were used for intragenic genotyping, which were isolated from 2001 to 2002 in Chungbuk National University hospital. For interspecies genotyping, V. vulnificus, V. alginolyticus, V. parahaemolyticus, Escherichia coli, Salmonella and Shigella spp. were used. The genotyping were analyzed by ERIC-PCR. The genotyping of V. parahaemolyticus were grouped two major pattern (A, B) and were subdivided into 10 subtypes (A1, A2, B1-B8) by ERIC-PCR. These method distinctly differentiated bacterial species associated diarrhea. Those results show that ERIC-PCR can be reliable and efficient method for genotyping of V. parahaemolyticus and bacteria associated diarrhea.

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Genotypic and Phenotypic Diversity of PGPR Fluorescent Pseudomonads Isolated from the Rhizosphere of Sugarcane (Saccharum officinarum L.)

  • Rameshkumar, Neelamegam;Ayyadurai, Niraikulam;Kayalvizhi, Nagarajan;Gunasekaran, Paramsamy
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제22권1호
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    • pp.13-24
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    • 2012
  • The genetic diversity of plant growth-promoting rhizobacterial (PGPR) fluorescent pseudomonads associated with the sugarcane (Saccharum officinarum L.) rhizosphere was analyzed. Selected isolates were screened for plant growthpromoting properties including production of indole acetic acid, phosphate solubilization, denitrification ability, and production of antifungal metabolites. Furthermore, 16S rDNA sequence analysis was performed to identify and differentiate these isolates. Based on 16S rDNA sequence similarity, the isolates were designated as Pseudomonas plecoglossicida, P. fluorescens, P. libaniensis, and P. aeruginosa. Differentiation of isolates belonging to the same group was achieved through different genomic DNA fingerprinting techniques, including randomly amplified polymorphic DNA (RAPD), amplified ribosomal DNA restriction analysis (ARDRA), repetitive extragenic palindromic (REP), enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC), and bacterial repetitive BOX elements (BOX) analyses. The genetic diversity observed among the isolates and rep-PCR-generated fingerprinting patterns revealed that PGPR fluorescent pseudomonads are associated with the rhizosphere of sugarcane and that P. plecoglossicida is a dominant species. The knowledge obtained herein regarding the genetic and functional diversity of fluorescent pseudomonads associated with the sugarcane rhizosphere is useful for understanding their ecological role and potential utilization in sustainable agriculture.

ERIC-PCR genomic fingerprinting에 의한 주요 식중독 그람 음성 세균 4속의 구별 (Differentiation of Four Major Gram-negative Foodborne Pathogenic Bacterial Genera by Using ERIC-PCR Genomic Fingerprinting)

  • 정혜진;박성희;서현아;김영준;조준일;박성수;송대식;김근성
    • 한국식품과학회지
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    • 제37권6호
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    • pp.1005-1011
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    • 2005
  • 본 연구에서는 높은 분리능을 가지고 있을 뿐만 아니라 실험의 재현성과 경제성의 측면에서도 많은 장점을 갖고 있는 ERIC DNA sequence를 응용한 ERIC-PCR을 이용하여 Salmonella, E. coli, Shigella, Vibrio 등 4속의 주요 그람 음성 식중독유발 세균들의 분리 동정 방법을 확립하고자 하였다. ERIC-PCR 결과, E. coli의 경우 0.3kb, 0.42kb 및 1.2kb의 band가 모든 균주에서 공통적으로 확인되었고, Salmonella속으로부터는 0.22kb, 0.4kb 및 0.7kb의 band가 증폭되었다. Shigella속은 모든 표준균주와 분리균주로부터 0.33kb와 1.25kb의 band가 증폭되었으며, S. sonnei의 경우 위의 주요 2개 band 이외에도 대부분의 균주에서 0.44kb, 2.0kb 및 3.05kb의 band가 증폭되어 다른 종의 Shigella와 구별되는 fingerprinting pattern을 나타내었다. 그리고 V. parahaemolyticus의 경우 표준균주와 분리균주 모두 0.51kb와 1.5kb의 band가 증폭되어 V. cholerae, V. mimicus 등과 같은 다른 종의 Vibrio와 구별되는 fingerprinting pattern을 나타내었다. 이와 같이 4속의 모든 식중독 균주마다 ERIC-PCR후 생성되는 fingerprinting pattern에서 3-5개의 공통적인 band가 증폭되는 것이 확인되어 이를 이용한 속 수준의 분리 동정과 이러한 주요 band들 이외의 부수적인 band들을 고려하여 종 수준까지의 분리도 가능함을 확인하였다. 따라서 본 연구의 결과는 ERIC 반복적 DNA 염기서열을 이용한 ERIC-PCR이 식중독균의 분리 동정 방법으로 사용될 수 있음을 확인하였으며, 나아가 더 많은 속(genus)의 식중독세균을 대상으로 한 새로운 분리 동정 방법을 확립하는데도 응용이 될 수 있을 것이다.

Two Genetically Distinct Groups of Acidovorax citrulli are Present in Watermelon-growing Fields in Korea

  • Choi, Okhee;Cho, Su Kyung;Kang, Byeongsam;Cho, Jaeyeong;Park, Jiyeong;Lee, Yeyeong;Kim, Jinwoo
    • 농업생명과학연구
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    • 제50권2호
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    • pp.53-59
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    • 2016
  • Bacterial fruit blotch(BFB) of cucurbits caused by Acidovorax citrulli(Acc) continues to diminish fruit yields. The aim of this study was to address whether two genetically distinct populations of Acc are present in watermelon-growing fields in Korea. For this purpose, we used the enterobacterial repetitive intergenic consensus polymerase chain reaction(ERIC-PCR) profiling and substrate-utilization profiles. According to the results of ERIC-PCR, group I and II strains showed clearly differentiated PCR-based fingerprinting profiles. Differences between group I and II strains included amplification of unique, group-specific DNA fragments such as the 1.3-, 0.28-, and 0.25-kb fragments in ERIC-PCR. Acc stains belonging to group I did not use L-leucine, whereas group II strains did use the substrate. Our results support the genetic differentiation of Acc strains into two groups and demonstrate that Acc strains from both groups are previously existed in watermelon-growing fields in Korea. Information about the genetic diversity of Acc under the present study will help scientists and managers form strategies to control BFB.

식중독세균 5속의 동시 동정을 위한 ERIC-PCR 반응성분 농도의 최적화 (Optimization of the Concentrations of ERIC-PCR Components to Simultaneously Differentiate Five Foodborne Pathogenic Bacterial Genera)

  • 서현아;박성희;김근성
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.229-236
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    • 2003
  • 본 연구는 식품을 오염시켜 식중독을 유발하는 주요 식중독 세균인 Escherichi, Salmonella, Shigella, Vibrio, Listeria등 5속의 병원성 세균들을 반복성 염기서열을 이용한 ERIC-PCR을 이용하여 동시에 동정할 때 이용되는 주요 PCR 반응성분인 $MgCl_2$, dNTPs, primers, template DNA의 최적 농도를 결정하였다. ,$MgCl_2$ 반응성분은 2 mM을 적용하였을 때부터 일정한 fingerprinting pattern을 얻을 수 있었으므로 2 mM을 $MgCl_2$의 최적농도로 결정하였다. dNTPs의 농도는 250 ${\mu}M$까지 증가함에 따라 6균주 모두 200 ${\mu}M$까지는 농도 증가와 비례하여 단편의 수와 강도가 점증하였으나 그 이상의 농도에서는 단편의 수와 강도가 일정하였다. 그러므로 일정한 ,fingerprinting pattern 을 얻기 위하여 200 ${\mu}M$의 dNTPs만으로도 충분하였다. ERIC primer들은 2 ${\mu}M$의 농도를 적용했을 때부터 일정한 fingerprinting pattern을 나타낼 수 있었으며, 그 이상의 농도를 적용했을 때 단지 단편들의 강도만이 증가하였다. Template DNA도 다른 PCR 반응성분에 대한 실험과 마찬가지로 적용한 DNA 양의 증가에 따라 단편의 간도가 증가하였다. 그러나 대부분의 적용 균주들에 대하여 DNA의 양이 최고일 때와 최대일 때 각각의 얻어지 fingerprinting pattern들을 비교할 때 단편의 수는 별 차이가 없었다.