The aim of the present study was to isolate phosphate solubilizing bacteria (PSB) and to assess their potential tolerance to fungicides. Out of thirty PSB, two strains Klebsiella oxytoca and Enterobacter ludwigii were selected on the basis of their tolerance to fungicides. Both strains were assessed for their phosphate solubilizing ability using three different fungicides (difenoconazole, fluazinam and streptomycin) each with the concentrations of 0, 1, 2 or 3 times of the recommended rate. Both strains showed increased phosphate solubilization with difenoconazole at 1, 2 and 3 times of the recommended rate as compared to the phosphate solubilization of the control. The phosphate solubilization in Klebsiella oxytoca was recorded as 326, 538, 518 and 481 ${\mu}g\;mL^{-1}$ at 0, 1, 2 and 3 times of the recommended rate respectively, whereas in Enterobacter ludwigii it was recorded as 395, 499, 529 and 533 ${\mu}g\;mL^{-1}$ respectively at various doses. Based on the present findings, it may be concluded that both strains have the potential to be used as bio-inoculants which can solubilize phosphate even at the higher doses as compared to the recommended rate of fungicides.
This study examined effects of Enterobacter ludwigii SJR3 showing a high 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) deaminase activity, on growth of tomato plant and its expression of stress-related genes under drought and salt stress. SJR3 strain was inoculated at $10^6cell/g$ soil to 4-week grown tomato plants, and drought and salt stresses were treated. After additional incubation for 1 week, root length, stem length, fresh weight and dry weight of tomato plants treated with SJR3 increased by 37.8, 37.2, 96.8 and 146.6%, respectively compared to those of uninoculated plants in drought stress environment, and they increased by 19.2, 25.4, 19.5, and 105.8%, respectively in salt stress environment. Proline content in tomato leaves increased significantly under stress conditions as one of a protecting substance against stresses, but proline contents in tomato treated with SJR3 decreased by 62.1 and 54.1%, respectively. Relative expression of genes encoding ACC oxidase, ACO1 and ACO4, ethylene response factor genes ERF1 and ERF4, and some other stress-related genes were examined from tomato leaves. Compared to the non-stressed tomato, expressions of all stress-related genes increased significantly in the stressed tomato, but gene expressions in the inoculated tomato were similar to those of no-stressed control tomato. Therefore, E. ludwigii SJR3 may play an important role in mitigating drought and salt stress in plants, and can increase productivity of crops under various abiotic stresses.
Silicon and phosphorus are elements that are beneficial for plant growth. Despite the abundant availability of silicate and phosphate in the Earth's crust, crop nutritional requirements for silicon and phosphorus are normally met through the application of fertilizer. However, fertilizers are one of the major causes of heavy metal pollution. In our study, we aimed to assess silicate and phosphate solubilization by the bacteria Enterobacter ludwigii GAK2, in the presence and absence of phosphate [Ca3(PO4)2] or silicate (Mg2O8Si3), to counteract cadmium stress in rice (Oryza sativa L). Our results showed that the GAK2-treated rice plants, grown in soil amended with phosphate [Ca3(PO4)2] or silicate (Mg2O8Si3), had significantly reduced cadmium content, and enhanced plant growth promoting characteristics including fresh shoot and root weight, plant height, and chlorophyll content. These plants showed significant downregulation of the cadmium transporter gene, OsHMA2, and upregulation of the silicon carrier gene, OsLsi1. Moreover, jasmonic acid levels were significantly reduced in the GAK2-inoculated plants, and this was further supported by the downregulation of the jasmonic acid related gene, OsJAZ1. These results indicate that Enterobacter ludwigii GAK2 can be used as a silicon and phosphorus bio-fertilizer, which solubilizes insoluble silicate and phosphate, and mitigates heavy metal toxicity in crops.
Four bacteria producing viscous exopolysaccharides (EPSs) were isolated from Korean fermented vegetables (Cucumber kimchi, Young radish kimchi, Green onion kimchi) using a selection medium intended for isolating bacteria with tannin-degrading activity. They were identified phylogenetically by 16S rDNA sequence analysis and found to be very close to Enterobacter cowan ii, Escherichia senegalensis, Enterobacter asburiae, and Enterobacter ludwigii. Strain CK31, the most efficient EPS-producer, produced a heteropolysaccharide with an approximate molecular weight of 420 kDa. The neutral sugar fraction of the EPS was composed of rhamnose, fucose, arabinose, mannose, galactose, and glucose.
BACKGROUND: Excessive metals in the soil have become one of the most significant environmental problems. Phytoremediation has received considerable attention as a method for restoring the contaminated soils. The microbes having remarkable metal tolerance and plant growth-promoting abilities could also play a significant role in remediation of metal-contaminated soils, because bioaugmentation with such microbes could promote phytoextraction of metals. Therefore, the present study was focused on evaluating the phytoextraction of heavy metals (Co, Pb and Zn) in Helianthus annuus (sunflower) induced by bioaugmentation of a phosphate solubilizing bacterium. METHODS AND RESULTS: A phosphate solubilizing bacterium was isolated from metal-contaminated soils based on the greater halo size (>3 mm) with solid NBRIP agar medium containing 10 g glucose, 5 g $Ca_3(PO_4)_2$, 5 g $MgCl_2{\cdot}6H_2O$, 0.25 g $MgSO_4.7H_2O$, 0.2 g KCl, 0.1 g $(NH_4)_2SO_4$ in 1 L distilled water. Isolated bacterial strain was assessed for their resistance to heavy metals; $CoCl_2.6H_2O$, $2PbCO_3.Pb(OH)_2$, and $ZnCl_2$ at various concentrations ranging from $100-400{\mu}g/mL$ (Co, Pb and Zn) using the agar dilution method. A pot experiment was conducted with aqueous solutions of different heavy metals (Co, Pb and Zn) to assess the effect of bacterial strain on growth and metal uptake by Helianthus annuus (sunflower). The impact of bacterial inoculation on the mobility of metals in soil was investigated under laboratory conditions with 50 mL scaled polypropylene centrifuge tubes. The metal contents in the filtrate of plant extracts were determined using an atomic absorption spectrophotometer (Perkinelmer, Aanalyst 800, USA). CONCLUSION: Inoculation with Enterobacter ludwigii PSB 28 resulted in increased shoot and root biomass and enhanced accumulation of Co, Pb and Zn in Helianthus annuus plants. The strain was found to be capable of promoting metal translocation from the roots to the shoots of H. annuus. Therefore, Enterobacter ludwigii PSB 28 could be identified as an effective promoter of phytoextraction of Co, Pb and Zn from metal-contaminated soils.
Kim, Young-Il;Jung, Se-Hyung;Seok, Joon-San;Yang, Si-Yong;Huh, Jeong-Weon;Kwak, Wan-Sup
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.35
no.3
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pp.255-260
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2007
This study was conducted to isolate and identify bacteria producing xylanase and cellulase from spent mushroom substrates and to determine the optimal medium conditions for their growth. Bacteria showing high xylanase and carboxymethyl cellulase activities and low protease and amylase activities were strain 201-3 and strain 206-3. Strain 201-3 was identified as Enterobacter ludwigii and named Ent. ludwigii KU201-3. 206-3 was identified as Bacillus cereus and named B. cereus KU206-3. The optimal medium condition of Ent. ludwigii KU201-3 was obtained when 1%(w/v) of soybean meal and 3%(w/v) of sucrose were used as nitrogen and carbon source, respectively. That of B. cereus KU206-3 was obtained when 3%(w/v) of soybean meal and 1%(w/v) of molasses were used as nitrogen and carbon sources, respectively.
Kim, Ki-Kwang;Han, Song-Ih;Moon, Chung-Won;Yu, Yong-Man;Whang, Kyung-Sook
Korean Journal of Microbiology
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v.47
no.1
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pp.66-73
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2011
Bacterial density distributions of gut microbes in the digestive organs of Harmonia axyridis collected from three different sources (JK, CK, and CJ) were $6.0{\times}10^4$ CFU/gut under aerobic culture condition and $8.0{\times}10^6$ CFU/gut under anaerobic culture condition. Seven colony types were observed under aerobic condition and three types of similarity were detected under anaerobic condition. In total, 116 strains, including 34 strains under aerobic condition, were isolated from the digestive organs of H. axyridis. Based on the analysis of the 16S rRNA gene sequence, aerobic gut microbes were assigned to the Proteobacteria, Actinobacteria, Firmicutes, and Deinococcus-Thermus. A large number of isolates belonged to the genus Bacillus and Staphylococcus of the Firmicutes commonly found in H. axyridis from different sites. Anaerobic gut microbes were found to be similar according to colony morphological, phylogenetic analysis using ARDRA. Eighty-two anaerobic gut microbes were clustered into 17 different ARDRA types according to HaeIII. Representative anaerobic gut microbes in each ARDRA group were divided into five species of ${\gamma}$-Proteobacteria based on 16S rRNA gene sequence analysis; Hafnia alvei, Enterobacter ludwigii, Enterobacter kobei, Pseudomonas oryzihabitans and Pseudomonas koreensis. Phylogenetic analysis indicated that about 70% of the isolates belonged to ${\gamma}$-Proteobacteria, suggesting predominance of gut microbes.
It is urgently required to construct safety data on agricultural by-products imported for use as medium materials for domestic mushroom production. However, research on microorganisms is insufficient. This study was conducted to investigate the presence of bacteria that have the possibility of harmful effects on human, plants and mushroom in wheat straw, peatmoss, cottonseed hull, cottonseed meal, and beet pulp imported from Australia, Canada, China, Egypt, Germany. Bacteria were found in the range of $1.35{\times}10^2$ to $8.34{\times}10^6CFU/g$. As a result of 16S rDNA sequence analysis, total of 19 genera and 45 species of bacteria were identified. Bacillus genus was dominant, followed by Paenibacillus genus. At the species level, diverse species was in the order of Firmicute, Proteobacteria and Actinobacteria. Regarding the agricultural by-products, straw and peat moss had more diverse bacteria than other agricultural by-products. Among the indentified bacteria, 6 species of 5 genera (Enterobacter asburiae, Enterobacter ludwigii, Stenotrophomonas maltophilia, Pseudomonas monteilii, Bacillus anthracis, and Cellulosimicrobium funkei) were present as potent harmful bacteria to human. Surprisingly, both the human and plant pathogenic Klebsiella pneumoniae subsp. pneumonia was present. Bacillus altitudinis was present as a plant pathogen. Lysinibacillus sphaericus, an insect pathogen, and Ochrobactrum pseudogrignonense, a mushroom pathogen, were also present. The results of this study confirmed that several kinds of pathogenic bacteria were present in the agricultural by-products for the mushroom cultivation medium imported into Korea. Our work suggests that hygiene inspection and management is urgently needed for imported agricultural by-products to be safely used for mushroom production.
Park, In-Suk;Oh, Ryunkyoung;Lee, Min Jeong;Moon, Ji Young;Kim, Young-Ok;Nam, Bo-Hye;Kong, Hee Jeong;Kim, Woo-Jin;An, Cheul Min;Kim, Dong-Gyun
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.48
no.6
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pp.904-912
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2015
There is a great deal of research interest regarding substitutes for antibiotics because of various obstacles to the efficacy and use of antibiotics. We isolated and analyzed diversity of microbiota which exhibited antibacterial activity against 23 pathogenic bacteria, to develop alternative agent of antibiotics. By investigating the microbiota from rocks on the seashore, we characterized and obtained various antibacterial material-producing bacteria. Thirty-one isolates belong to four genera and seven species, according to 16S rDNA sequence analysis, showed antibacterial activities against 23 pathogenic bacteria. The Identity of 16S rDNA sequences indicated three species of Bacillus, one species of Paenibacillus, one species of Pseudomonas and two species of Enterobacter. Two isolates were similar to Bacillus aerophilus, four isolates were similar to Bacillus pumilus, seven isolates were similar to Bacillus safensis, 15 isolates were similar to Paenibacillus polymyxa, respectively. In addition, one isolate was similar with Pseudomonas poae, one isolate was similar to Enterobacter asburiae, and one isolate was similar to Enterobacter ludwigii, respectively. Variations of antibacterial activity and level among the same species were indicated the diverse strains of isolates. Vibrio vulnificus showed the highest degree of growth inhibition by 29 isolates. Further studies regarding antibacterial materials and bacteria suggest that development of probiotic strains or alternative agents to antibiotics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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