Optimal operation in chromatography is needed to save operation time and the solvent used in multiple chromatographic runs. To this end, many simulation studies of chromatography process have been performed. The relationship between the distribution coefficient and the ionic strength is important in gradient elution ion chromatography. Experimental runs and computer simulations were carried out under linear gradient elution condition in order to compare the experiments and the simulation. Experiments were performed with formic acid under isocratic conditions to determine the simulation equation parameters. Computer simulation was based on three equations which related distribution with ionic strength as follows; K=${\alpha}$I(sup)-${\beta}$, K=A+BI+Cl$^2$and K=y(sub)0+A$_1$$.$e(sup)(-I/m$_1$). The effects of gradient slope on the chromatograms are discussed, and good agreement between the experimental and the simulated results is shown.
Separation of lithium isotopes was investigated by chemical ion exchange with a hydrous manganese(IV) oxide ion exchanger using an elution chromatography. The capacity of manganese(IV) oxide ion exchanger was 0.5 meq/g. One molar CH3COO Na solution was used as an eluent. The heavier isotope of lithium was enriched in the solution phase, while the lighter isotope was enriched in the ion exchanger phase. The separation factor was calculated according to the method of Glueckauf from the elution curve and isotopic assays. The single stage separation factor of lithium isotope pair fractionation was 1.021.
We attempted to purify radiolabeled RNA using Sephadex G-15 and G-50 chromatography instead of commercial RNA purification kit. In the Sephadex G-15 chromatography the major portion of RNA was eluted in the fractions ranging from 3rd to 5th whereas broad elution profile of RNA was obtained from the Sephadex G-50 chromatography. The elution profile and purity of RNA obtained from Sephadex G-15 chromatography was very similar to that by commercial RNA purification kit. Furthermore, operating time required for purification of RNA by Sephadex G-15 was rather smaller than that by commercial kit. Overall results suggest that the purification of radiolabeled RNA using Sephadex G-15 is more money and time saying than using commercial RNA purification kit.
이상계 용매시스템을 이용하여 물질을 고순도로 대량 분리 할 수 있는 기술인 countercurrent chromatography를 이용하여 인삼으로부터 생리황성 성분인 saponin을 대량 분리 농축하였다. 용매 조성별 인삼 saponin의 분배계수에 따른 인삼 saponin 분리에 적합한 용매시스템은 chloroform/methanol/water(40/39/21, v/v/v)으로 결정되었으며 HSCCC의 작동 조건은 chloroform/methanol/water 용매시스템의 하층부를 이동상으로 한 head to tail mode에서 이동상의 유속 5mL/min, 인삼추출물 injection량 $200{\mu}L$, 컬럼회전속도 800 rpm의 조건이 적합한 것으로 판단되었다. 이러한 조건하에서 분리된 인삼saponin의 양은 $550.7{\mu}g$으로 HSCCC에 주입한 인삼 추출물 $200{\mu}L$중에 존재하는 총 saponin의 양 $865.5{\mu}g$에 비교하여 전체 수율은 63.6%로 나타났으며 TLC로 각 분획의 순도를 확인할 수 있었다.
Ligand Exchange를 원리로 하여 Nickel Ion을 포함하고 있는 Chelating Resin인 dowex A-1을 써서 Elution Chromatography에 의하여 Amine의 혼합물을 분리하는 방법을 기술하였다. 이 실험에서 암모니아 수용액을 Eluent로 썼다. 이 방법은 특히 방향족아민의 분리에 효과 있음을 알게 되었다.
The purpose of this article, the first part of series, is to describe the general theory applicable to various chromatographic procedures. History of chromatography, separation of matters, classification of chromatography, underlying principles of separation in chromatography, covering resolution, column efficiency, column selectivity, and capacity factor, movement of solute in chromatographic phase, including elution development, displacement development, and frontal analysis, were discussed. Mathematical description of plate theory and thermodynamic viewpoint of retention were emphasized.
Serratia marcescens ATCC 25419를 질소원이 풍부한 BHI 배지에서 황산 암모늄 분별 침전을 시킨 후 DAEA-Sephacel chromatography, Phenyl-Sepharose hydrophobic chromatography, Sephacryl S-400 gel filtration, native gel elution을 거쳐 ALS isozyme Rf 0.83을 분리하였다. 분리한 ALS isozyme Rf 0.83의 native 형태는 gel filtration을 이용하여 분자량을 측정한 결과, 531,400이었고, SDS-PAGE를 수행한 결과 55,000의 large subunit와 38,900의 small subunit로 구성된 multimer임을 알 수 있었다.
The possibilities for HPLC analysis of lipids have been revolutionised by the availability of evaporative light-scattering detectors, with which the response is independent of the nature of the mobile phase and does not depend On the presence of specific chromophores in the lipids. It was thus possible to develop an HPLC procedure, involving ternary gradient elution, for separating all the lipid classes in animal tissues in a single step. Although reversed-phase HPLC has been widely used for the analysis of molecular species of lipids, sliver ion chromatography can be a valuable alternative. For example, a stable silver ion column for HPLC was developed which permitted resolution of molecular species of triacylglycerols, even from such complex samples as fish oils, again With light-scattering detection and gradient elution. The capacity for HPLC resolution of diastereomeric diacyl-sn-glycerol derivatives, prepared from triacylglycerols. has lead to a new simple method for stereospecific analysis of the latter.
Gromwell colorants were extracted with methanol and dried. Four fractions were obtained by silica gel adsorption column chromatography using step-wise elution method. Relative ratio of four fraction is 1.00:0.07:0.22:0.30(Fl:F2:F3:F4) and gromwell colorants mainly consist of Fl, F3 and F4. IR analysis shows that each fraction has similar structure. Main component of gromwell extracts is acetyl derivative of naphthoquinone, and the rest are isobutyl derivative and isovaleryl derivative etc., in order. Gromwell colorants exhibit relatively good affinity to protein and polyamide fibers, but low affinity to cellulose and regenerated cellulose fibers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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