• BMB Reports
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• 제52권6호
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• pp.379-384
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• 2019

Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is widely-considered to be a modulating factor of anoikis and cancer metastasis. We found that, in MDA-MB-231 cells, TP53I11 (tumor protein P53 inducible protein 11) suppressed EMT and migration in vitro, and inhibited metastasis in vivo. Our findings showed that hypoxic treatment upregulated the expression of $HIF1{\alpha}$, but reduced TP53I11 protein levels and TP53I11 overexpression reduced $HIF1{\alpha}$ expression under normal culture and hypoxicconditions, and in xenografts of MDA-MB-231 cells. Considering $HIF1{\alpha}$ is a master regulator of the hypoxic response and that hypoxia is a crucial trigger of cancer metastasis, our study suggests that TP53I11 may suppress EMT and metastasis by reducing $HIF1{\alpha}$ protein levels in breast cancer cells.

• Journal of Preventive Medicine and Public Health
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• 제29권3호
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• pp.495-505
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• 1996

수은이 세포성 면역반응에 미치는 효과와 그 기전을 밝히기 위해 cytokine-EMT-6 cell-NO 모형에 대조군에는 수은을 첨가하지 않았고 나머지 실험군에는 $0.05-0.8{\mu}M$의 mercury chloride를 처리하였다. 그리고 배양시간별, 수은농도별로 세포생존율, 세포성 면역의 지표인 NO를 nitrite로 간접정량하고 대사과정에 필수 에너지요소인 nitrite를 측정한 결과는 아래와 같이 요약된다. 1. EMT-6세포의 세포생존율은 대조군과 36시간째 $0.8{\mu}M(89.50%)$을 제외한 모든 수은첨가군에서 모두 90%이상의 값을 나타내었으며, 배양시간 및 첨가한 수은농도별 군간 차이는 없었고 모든 수은첨가군과에서 대조군에 비해 큰 차이가 없었다. 2. 수은에 노출된 EMT-6 세포의 nitrite 생성량 및 ATP생성량은 배양시간의 경과에 따라 전반적으로 증가하였으며 시간경과에 따른 nitrite 생성량과 ATP 생성량은 첨가한 수은농도의 변화에 따라 각 군간에 현저한 차이를 보였다. 그리고 시간경과의 영향을 보정한 상태에서도 첨가한 수은농도의 변화에 따라 각 군간 차이는 모두 현저하게 나타났다. 한편, Nitrite 생성량과 ATP 생성량은 둘 다 수은첨가군 모두에서 대조군의 값에 비해 현저하게 낮았고, 첨가된 수은농도와 nitrite 생성량 및 ATP 생성량 사이에는 높은 음의 상관관계가 있어 수은농도의 증가에 따라 용량-반응의 관계(dose-dependent)로 감소하는 경향을 보였다. 이상의 결과, 배양조건에 수은의 첨가로 인하여 nitrite 생성량과 ATP 생성량이 동시에 감소하는 바, 수은에 의한 세포성 면역의 저하는 면역세포의 NO 생성량의 감소에 의한 것으로 사료되며, 이는 수은이 세포내 에너지생산에 관련된 대사과정을 억제시키므로 나타나는 결과라고 판단된다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제42권3호
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• pp.288-297
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• 2018

Background: The incidence of colorectal cancer (CRC) is increasing, with metastasis of newly diagnosed CRC reported in a large proportion of patients. However, the effect of Korean Red Ginseng extracts (KRGE) on epithelial to mesenchymal transition (EMT) in CRC is unknown. Therefore, we examined the mechanisms by which KRGE regulates EMT of CRC in hypoxic conditions. Methods: Human CRC cell lines HT29 and HCT116 were incubated under hypoxic (1% oxygen) and normoxic (21% oxygen) conditions. Western blot analysis and real-time PCR were used to evaluate the expression of EMT markers in the presence of KRGE. Furthermore, we performed scratched wound healing, transwell migration, and invasion assays to monitor whether KRGE affects migratory and invasive abilities of CRC cells under hypoxic conditions. Results: KRGE-treated HT29 and HCT116 cells displayed attenuated vascular endothelial growth factor (VEGF) mRNA levels and hypoxia-inducible $factor-1{\alpha}$ ($HIF-1{\alpha}$) protein expression under hypoxic conditions. KRGE repressed Snail, Slug, and Twist mRNA expression and integrin ${\alpha}V{\beta}6$ protein levels. Furthermore, hypoxia-repressed E-cadherin was restored in KRGE-treated cells; KRGE blocked the invasion and migration of colon cancer cells by repressing $NF-{\kappa}B$ and ERK1/2 pathways in hypoxia. Conclusions: KRGE inhibits hypoxia-induced EMT by repressing $NF-{\kappa}B$ and ERK1/2 pathways in colon cancer cells.

• 생명과학회지
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• 제29권11호
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• pp.1179-1191
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• 2019

암세포는 epithelial mesenchymal transition (EMT)를 통해 tumor invasion과 metastasis가 일어나며, 또한 정상세포와 다른 oncogenic metabolic phenotypes 획득 즉, glycolytic switch 등이 암 발생과 진행에 깊이 연관되어 있음이 잘 알려져 있다. High-mobility group box 1 (HMGB1)은 chromatin-associated nuclear protein으로 알려져 있으나, dying cells 또는 immune cells로부터 방출되기도 한다. 방출된 HMGB1은 damage-associated molecular pattern (DAMP)로서 작용하여 EMT 및 invasion, metastasis를 유도함으로서 tumor progression에 기여한다고 알려졌다. 본 연구에서 HMGB1에 의해 EMT와 glycolytic switch 유도되며, 이 과정은 Snail 의존적임을 확인하였다. 또한 HMGB1/Snail cascade는 COX subunits인 COXVIIa와 COXVIIc의 발현 억제를 통해 mitochondrial repression과 cytochrome c oxidase (COX) inhibition을 유도하였다. HMGB1은 Snail를 통해 glycolytic switch의 주요 효소인 hexokinase 2 (HK2), phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 2 (PFKFB2), phosphoglycerate mutase 1 (PGAM1)의 발현을 증가시켰다. 이들 효소는 glycolytic switch에 중요하게 관여하는 것으로 알려져 있다. 이들 해당과정의 효소들을 knockdown한 결과 HMGB1에 의한 EMT를 억제함으로써 glycolysis와 HMGB1-induced EMT가 밀접하게 연관되어 있을 제시하였다. 이상의 연구 결과들은 HMGB1/Snail cascade가 EMT 및 glycolytic switch, mitochondrial repression에 중요하게 작용할 것임을 시사한다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제27권6호
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• pp.533-540
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• 2023

Sweroside is a natural monoterpene derived from Swertia pseudochinensis Hara. Recently, studies have shown that sweroside exhibits a variety of biological activities, such as anti-inflammatory, antioxidant, and hypoglycemic effects. However, its role and mechanisms in high glucose (HG)-induced renal injury remain unclear. Herein, we established a renal injury model in vitro by inducing human renal tubular epithelial cell (HK-2 cells) injury by HG. Then, the effects of sweroside on HK-2 cell activity, inflammation, reactive oxygen species (ROS) production, and epithelial mesenchymal transition (EMT) were observed. As a result, sweroside treatment ameliorated the viability, inhibited the secretion of inflammatory cytokines (TNF-α, IL-1β, and VCAM-1), reduced the generation of ROS, and inhibited EMT in HK-2 cells. Moreover, the protein expression of SIRT1 was increased and the acetylation of p65 NF-kB was decreased in HK-2 cells with sweroside treatment. More importantly, EX527, an inhibitor of SIRT1, that inactivated SIRT1, abolished the improvement effects of sweroside on HK-2 cells. Our findings suggested that sweroside may mitigate HG-caused injury in HK-2 cells by promoting SIRT1-mediated deacetylation of p65 NF-kB.

• 생명과학회지
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• 제27권11호
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• pp.1245-1255
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• 2017

암세포는 정상세포와는 다른 metabolism 특히 glycolytic switch를 나타낸다. Glycolytic switch는 암세포가 정상세포와 달리 산소가 충분한 상태에서도 미토콘드리아에 의존하지 않고 glycolysis를 통해 대부분의 ATP 에너지를 생성하는 현상이다. 또한 암세포는 invasion 및 metastasis 능력을 획득하기 위해 epithelial-mesenchymal transition (EMT)를 나타낸다. EMT와 glycolytic switch는 암세포의 생존 및 증식에 관여하는 중요한 현상이지만, 이들 상호작용 및 그 기작에 대한 연구는 아직 밝혀져 있지 않다. Snail은 EMT를 유도하는 주요한 전사인자이다. 본 연구진은 이전 연구에서 Snail이 발생 및 암성장에 관여하는 전사인자인 Dlx-2에 의해 조절됨을 밝혔다. 또한 Wnt가 Dlx-2/Snail cascade을 통하여 EMT 및 glycolytic switch을 유도함을 밝혔다. 본 연구에서는 glycolytic switch가 Wnt에 의한 EMT에 미치는 영향을 규명하고자 하였다. Dlx-2/Snail의 glycolytic switch target 유전자로 phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 2 (PFKFB2)를 발굴하였다. PFKFB2는 fructose-2,6-bisphosphate (F2,6BP)의 합성 및 분해에 관여하는 효소로서 glycolysis에서 중요하게 작용한다. Wnt에 의해 PFKFB2 발현이 Dlx-2/Snail 의존적으로 증가함을 관찰하였다. 또한 PFKFB2를 knockdown한 결과 Wnt에 의한 EMT가 억제되므로 glycolytic switch가 Wnt에 의한 EMT에 관여할 가능성이 높을 것으로 보인다. 뿐만 아니라 PFKFB2 shRNA가 xenograft mouse model에서 tumor 성장 및 metastasis를 억제하는 것으로 나타났다. 또한 Human 암조직에서 정상조직에 비해 PFKFB2의 발현이 높음을 관찰하였다. 따라서 PFKFB2가 Wnt-Dlx-2/Snail-induced EMT 및 metastasis에서 중요한 역할을 할 것으로 예상된다.

• Journal of Preventive Medicine and Public Health
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• 제32권2호
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• pp.170-176
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• 1999

본 연구는 EMT-6 세포를 이용하여 무기수은, 유기수은 및 카드뮴의 세포독성에 대한 glutathione(GSH)의 방어효과를 알아보고자 하였다. 무기수은, 유기수은 및 카드뮴을 첨가한 배양조건에서 EMT-6 세포의 세포생존율, ${NO_2}^-$ 및 ATP 생성량은 첨가한 중금속의 농도가 증가할수록 용량의존적으로 감소하였다. GSH, OTC 및 BSO를 단독 첨가한 배양조건은 세포의 세포생존율과 NO2- 및 ${NO_2}^-$ 생성량에 영향을 주지 않았다. 수은화합물 및 카드뮴과 GSH를 동시 첨가한 배양조건에서는 세포생존율이 90% 이상 유지되었고, ${NO_2}^-$ 및 ATP 생성량은 기본배양조건과 비슷한 수준으로 나타났다. $16{\mu}M$의 무기 및 유기수은과 $160{\mu}M$의 카드뮴을 첨가한 실험조건에 GSH를 동시 첨가했을 경우 방어효과는 GSH의 농도에 따라 용량의존적으로 증가하였다. 세포내에서 수은 및 카드뮴의 세포독성에 대한 GSH역할을 알아보고자 GSH, OTC, BSO 전처리 실험을 한 결과, GSH의 전처리는 이들이 세포막을 통과하지 못하기 때문에 대조군과 비슷한 양상으로 나타난 반면에 BSO를 전처리한 군에서는 세포내 GSH 농도의 감소로 수은의 세포 독성이 증가하여 대조군에 비하여 ${NO_2}^-$와 ATP 생성량이 현저히 감소하였다. 또한 세포내 GSH의 농도를 증가시키는 OTC를 전처리한 결과 수은의 독성에 대한 방어효과가 시간 및 용량 의존적으로 현저하게 증가하였다. 이러한 실험결과는 수은의 세포독성에 대한 GSH의 방어효과가 GSH 세포내 농도와 밀접한 관련이 있음을 간접적으로 보여주고 있다. 본 연구의 결과는 수은 및 카드뮴의 독성에 대한 GSH의 방어작용이 단순히 -SH기와 중금속의 결합에 의한 결과가 아니라 세포내에서 GSH 분자가 갖는 고유의 기능으로 판단되며, 특히 중금속에 의한 에너지대사의 장애를 GSH가 회복시킬 수 있음을 보여준다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제22권4호
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• pp.341-346
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• 2014

Paeonol is a major phenolic micromolecular component of Moutan cortex Radicis, a traditional Chinese Medicine. It has shown antitumor effects in previous studies; however, the underlying mechanisms remain unknown. This study investigated the mechanism by giving treatments of placebo, cyclophosphamide, paeonol of 150 and 300 mg/kg to 4 groups of mice bearing EMT6 breast cancer. Apoptosis in tumor cells were confirmed by morphology analysis, including hematoxylin, eosin staining and TUNEL staining. The results showed that the weight of EMT6 breast tumor was significantly reduced in the groups treated with both 150 and 300 mg/kg of paeonol. Immunohistochemical and Western blot results showed that the expression of Bcl-2 was down-regulated while the expression of Bax, caspase 8 and caspase 3 was up-regulated respectively. These results suggest that paeonol exhibits antitumor effects and the mechanism of the inhibition is via induction of apoptosis, regulation of Bcl-2 and Bax expression, and activation of caspase 8 and caspase 3.

• Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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• 제36권3호
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• pp.172-176
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• 2010

Postirradiation extraosseous osteogenic sarcomas are uncommon in the head and neck, despite the extensive use of high-dose radiation. It has been described as de novo radiation-induced neoplasm. We present a 73-year-old male who had been treated by radiotherapy for gingival cancer 7 years earlier and later developed extraosseous osteogenic sarcomas (EOSs) of the neck. Microscopically, the neck mass was composed with mesenchymal malignant cells with cartilaginous and osteogenic differentiation. Immunohistochemical stain demonstrated strong positivity of tumor cells for Snail, the one of major epithelial-mesenchymal transition (EMT) inducer. The E-cadherin expression was scarce, showing inverse relationship to Snail expression. Compared with previous squamous cell carcinoma (SCC) of the gingiva, the present EOS sample revealed the remained epithelial cells on cytokeratin immunohistochemistry, suggesting the tumor arise from the cells of epithelial origin. We have also reviewed the previous 6 cases of head and neck EOSs carefully. The clinicopathologic features of the unusual lesion suggest that it is an incomplete EMT of precedent epithelial malignancy rather than de novo pathology.

• 한국식품과학회지
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• 제36권5호
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• pp.812-817
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• 2004

한국 전통약주와 기존에 암세포주에 대한 세포독성이 보고되어 있는 알코올 음료에 대한 항종양 세포독성을 비교하기 위하여 무증자 발효 방법으로 발효시키면서 한약재를 첨가한 전통약주I과 뽕잎, 메밀 등을 첨가한 전통약주II, 비교 시료로 적포도주, 백포도주, 맥주, 일본 청주 등에 대하여 연구하였다. 각 시료에 대하여 10-80배까지 단계적으로 희석하여 DLD-1, HepG2, K562, EMT6, LLC1에 처리하였을 때, 인체유래 대장암 세포주인 DLD-1의 경우 적포도주에서만 강한 세포독성이 확인되었는데, 전통약주I의 경우 그 농축액에서 DLD-1에 대하여 적포도주와 유사한 세포독성을 확인할 수 있었다. 나머지 4종의 암세포주에서는 10-20배 희석배수에서 적포도주, 전통약주I, 전통약주II가 세포독성을 보였으나, 각 암세포주의 종류에 따라서 세포독성은 약간씩 차이를 보였다. HepG2, K562, EMT6의 경우 10배 희석배수에서 모두 비슷한 세포독성을 보인 반면에 마우스 유래 폐암세포주인 LLC1의 경우에는 전통약주I과 전통약주II의 세포독성이 적포도주보다 우수한 것을 확인하였다. 본 연구의 결과에 의하면 이러한 항암효과는 전통약주에 존재하는 미지의 약리성분이 작용하는 것으로 판단되었다.