Kim, Sun-Hye;Ha, Yu-Mi;Youm, Hyoung-Joon;An, Gil-Hwan;Lee, Bong-Duk;Won, Mi-Sun;Song, Kyung-Bin
Preventive Nutrition and Food Science
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제9권2호
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pp.187-189
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2004
To isolate a mutant strain which overproduces tryptophan, mutants of Candida rugosa were screened after EMS (ethyl methane sulfonate) mutagenesis. Fluorotryptophan, a tryptophan analogue, was used for selection of a tryptophan-overproducing mutant after mutagenesis. Among 50 mutants, several candidates were selected based on intracellular tryptophan content. Amino acid analysis results showed that C3 was the best strain because it had the highest amount of tryptophan among the mutants.
Thr, Trp을 overproduce하는 효모 균주를 분리하기 위하여 Sacchromyces cerevisiae를 UV와 EMS로 mutagenesis한 후 screen하였다. Thr analogue인 hydroxynorvaline이 UV mutagenesis 후 Thr overproducing 하기 위해 사용되었다. 31 mutant 중 아미노산 분석 결과에 의해 TC 5-1이 선정되었고 다시 Trp overproducing 위해 EMS mutagenesis 하였다. 8개의 mutant가 flurotryptophan을 이용하여 Thr, Trp을 overproduce하는 mutant로 선정되었다. 아미노산결과에 의해 그 중 TC 6-1이 최종 효모 균주로 선정되었다.
콩에서 돌연변이를 효율적으로 유기시킬 수 있는 적정 EMS농도를 결정하기 위하여, 황금콩, 장엽콩, 검정콩 001에 30, 50, 70mM EMS세 수준으로 처리 한 다음 M$_1$종자의 포장발아율과 M$_2$ 세대의 돌연변이체 출현빈도율을 조사하였으며 다량 뿌리혹형성 변이체 선발을 위하여 신팔달콩002 종자 약 18,000립에 30mM EMS를 처리하여 M$_2$세대에서 선발하고, 선발된 변이체의 뿌리혹 형성능력을 미국 초다뿌리혹형성 nts계통과 비교한 결과는 다음과 같다. 1. M$_1$종자의 포장출현율은 검정콩 001가 황금콩과 장엽콩보다 높은 경향이었으며, 세 품종 모두 EMS처리 농도가 증가함에 따라 포장출현율이 낮았다. 2. M$_2$세대에서 돌연변이개체는 엽록소 결핍개체가 가장 많이 출현하였는데, 그외에도 생장점괴사, 엽이상, 엽수변이체, 단경 등 다양한 변이양상을 보였다. 3. 30mM EMS처리가 포장발아율도 높고, 돌연변이개체 출현율도 50, 70mM에 비하여 양호한 편으로 판단되었다. 4. 신팔달콩 002로부터 30mM EMS처리에 의하여 M$_2$세대에서 뿌리혹 형성 nts계통보다도 많은 뿌리혹이 형성되었으며, 뿌리혹형성도 일찍 시작되었다.
Van, Kyu-Jung;Jang, Hyun-Ju;Jang, Young-Eun;Lee, Suk-Ha
Journal of Crop Science and Biotechnology
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제11권2호
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pp.119-126
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2008
Since somatic embryogenesis combined with ethylmethane sulfonate(EMS) treatments is the most efficient technique for mutagenesis, the embryogenic capacity of four soybean cultivars was evaluated at different EMS concentrations, treatment times, and preculture durations. Two to 4 mm long immature cotyledons were placed in induction medium after EMS treatment, and the numbers of somatic embryos formed per explant were counted four weeks after culture initiation. We observed genotypic differences in the efficiency of somatic embryogenesis from immature embryos among four cultivars treated with different concentrations of EMS for six hours. Cultivars, Sinpaldalkong 2 and Jack, displayed highly efficient somatic embryogenesis regardless of EMS concentration, whereas very low efficiency or no survival was observed in Jinju 1 and Iksannamulkong cultivars. Preculture duration did not influence the efficiency of somatic embryogenesis. Because Sinpaldalkong 2 exhibited the best somatic embryogenesis, much higher concentrations of EMS were used to test somatic embryo formation under different periods of time in this cultivar. Three and six hour treatments with both 1 and 2 mM EMS yielded higher embryo formation than longer periods of time. Increasing the time with embryos in 2 mM EMS caused a reduction in somatic embryogenesis in Sinpaldalkong 2, but many chlorophyll-deficient soybean variants were identified in the $M_1R_0$ and $M_2R_1$ generations. In addition to Jack, Sinpaldalkong 2 is a good genotype for plant regeneration from EMS-treated immature embryo cultures.
황금콩과 백운콩에 30mM 및 50mM EMS를 각각 종자 1립 당 1ml 수준으로 실온에서 6시 간 처리하여 얻은 $M_1종자를 파종한 다음, 포장출현율 및 $M_1개체들의 형태적 특성의 분포 양상을 검토하고,$M_2세대에서 근류착생 및 기타 돌연변이 출현 양상을 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1.$M_1 종자의 포장출현율은 백운콩이 황금콩보다 비교적 높았으나 EMS 농도 처리간 차이는 없었으며, 엽록소 결핍 개체 발생율은 평균 0.7%였다. 2. 수확시 $M_1개체들의 경장, 개체당 협수 및 립수는 무처리개체에 비하여 감소되는 경향이었으며, EMS 처리 농도간 분포차이는 크지 않았다. 3. $M_2 세대에서 엽록소 결핍 개체 출현율에 의하여 판별된 돌연변이 유기율은 평균 2.2%이었으며, 돌연변이가 유기된 $M_1종자는 chimera 현상을 나타내었으며 돌연변이 세포의 비율은 5.3~84.2%로 나타났다. 4. EMS 처리에 의하여 근류착생이 많은 MA48계통과 근류착생이 거의 안되는 MD69계통을 선발하였는데 MA48계통은 엽연소함량이 많았고 MD69 계통은 엽록소 결핍 현상을 나타내었다.
Iron required by all organisms is related with diverse biological processes. Most eukaryotes need extra iron to maintain their nutrition balance. However, extra iron supplement gives many problem to solubility in the cells. To increase the bio-availability of iron in cells, yeast was applied to carry the iron with solubility. Selection of yeast mutants with enhanced iron uptake were performed by mutagenesis using the alkylation agent EMS. Eleven mutant strains with enhanced iron uptake were selected by the measurement of iron content with atomic absorption spectrometer. The iron content in mutants was 1.5- to 2.5-fold more than that in wild-type. These mutants could be served as iron-fortified nutrients for food and feed.
Ramakrishna, D.;Chaitanya, G.;Suvarchala, V.;Shasthree, T.
Journal of Plant Biotechnology
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제45권1호
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pp.55-62
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2018
In the present study in vitro mutagenesis was used to study the effect of gamma irradiation and EMS on callus induction, morphogenesis and production of multiple shoots from different explants of Citrullus colocynthis (L.) Schrad. Gamma radiations (5 kR to 20 kR) and certain chemicals have been effected on plant growth developments and changes of biochemical metabolisms in plants. Murashige and Skoog (MS) medium containing with auxins such as NAA, IAA, 2,4-D (0.5 ~ 2.0 mg/l), cytokinines BAP, kn TDZ, (0.5 ~ 2.5 mg/l), L-Glutamic acid (1 ~ 2 mg/l) and Coconut milk (10 ~ 20%). After 5 weeks on induction media, explants and callus (EC) were exposed to 5 kR, 10 kR, 15 kR and 20kR, of gamma radiation and treated with 1, 2, 3, 4 and 5 mM ethyl methane sulphonate (EMS) for 30 min. The highest percentage of callusing was observed (70%) stem irradiated with 5 kR and significantly decrease in fresh and dry weight of callus in the below 4 kR doses and above 20 kR doses, there was a progressive decrease in the fresh weight and dry weights when compared to control callus. Maximum percentage of plantlet regeneration (59%) was induced from callus exposed to 15 kR gamma irradiation on MS media fortified with 2.0 mg/l 2,4-D + 2.0 mg/l BAP + 2.0 mg/l L-glutamic acid. Increase in gamma irradiation dose above 15 kR and 5 mM EMS reduced regeneration capacity of callus. Doses higher than 20 kR and 7 mM EMS was lethal to micropropagated plants of Citurullus colocynthis.
Kim, Young-Nam;Kim, Jiseong;Lee, Jeongeun;Kim, Sujung;Lee, Keum-Ah;Kim, Sun-Hyung
Journal of Plant Biotechnology
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제47권4호
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pp.324-329
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2020
Reed (Phragmites spp.) is a rhizomatous plant of the Poaceae family and is known as high tolerant plant to heavy metal contaminants. This plant is widely recognized as a Cd root-accumulator, but improved heavy metal tolerance and uptake capacity are still required for phytoremediation efficiency. To enhance capacity of hyperaccumulator plants, ethyl methane sulfonate (EMS) as chemical mutagen has been introduced and applied to remediation approaches. This study aimed to select EMS-mutagenized reeds representing high Cd resistance and large biomass and to investigate their ability of Cd accumulation. After 6 months cultivation of M2 mutant reeds under Cd stress conditions (up to 1,500 µM), we discovered seven mutant individuals that showed good performances like survivorship, vitality, and high accumulation of Cd, particularly in their roots. Compared to wild type (WT) reeds as control, on average, dry weight of mutant type (MT) reeds was larger by 2 and 1.5 times in roots and shoots, respectively. In addition, these mutant plants accumulated 6 times more Cd, mostly in the roots. In particular, MT8 reeds showed the greatest ability to accumulate Cd. These results suggest that EMS mutagenesis could generate hyperaccumulator plants with enhanced Cd tolerance and biomass, thereby contributing to improvement of phytoremediation efficiency in Cd-contaminated soil or wastewater. Further studies should focus on identifying Cd tolerance mechanisms of such EMS-mutagenized plants, developing techniques for its biomass production, and investigating the practical potential of the EMS mutants for phytoremediation.
6 종(도깨비고비, 참쇠고비, 족제비고사리, 꼬리고사리, 거미고사리 및 변산일엽)의 양치식물에서 돌연변이원 처리에 따른 영향을 구하고 인위적인 돌연변이를 유도하기 위하여, 균질화한 전엽체에 감마선 및 EMS, NMU, $NaN_3$등의 회학돌연변이원과colchicine을 처리하였다. 전엽체 증식률은 전반적으로 처리농도 및 처리시간에 비례하여 감소되는 경향을 보였다. 전엽체의 증식률에 근거할 때, 감마선 처리의 최적 조건은 족제비고사리의 경우 20krad였으며, 그 나머지 종은 $5{\sim}10krad$ 수준이었다. EMS의 적정 처리조건은 50mM에서 3시간이었으며, NMU는 $5{\sim}10mM$에서 $1{\sim}3$시간 수준이었다. 그리고 $NaN_3$ 처리의 적정조건은 $0.5{\sim}1mM$ 에서 $1{\sim}3$시간이었으며, colchicine의 경우 각각의 처리조건에서 전엽체 증식률은 종에 따라 다소 차이를 보였다.
양치식물인 참쇠고비에서 인위적인 돌연변이를 유기하기 위하여, 기내배양한 근경조직에 EMS, NMU 등의 화학돌연변이원과 colchicine을 처리하였다. 식물체 재생률을 근거할 때, EMS의 적정 처리농도는 $20{\sim}50mM$이었으며, NMU는 $5{\sim}10mM$인 것으로 확인되었다. 또한 참쇠고비에서 엽의 색소 및 형태적 변이를 유도하는 데 있어 NMU가 EMS보다 효과적인 것으로 확인되었다. 표현형 변이 식물체의 유전적 변이를 분석하기 위하여 RAPD를 수행한 결과, 두 개의 10-mer primer에서 야생종과 변이주 사이에 다형성 DNA 밴드 패턴이 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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