Ha Woel-Kyu;Won Do-Hee;Yang Hee-Jin;Hwang Kyung-A;Lee Soo-Won
Food Science of Animal Resources
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v.25
no.2
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pp.244-249
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2005
To investigate the effect of Holstein colostrum peptide fraction on proliferation of immune cell, polypeptide fractions were separated from acid whey into 3 fractions depending on molecular weight by ultrafiltration: Fraction I, which contains the polypeptide larger than 10,000 Da, Fraction n, which contains the polypeptide ranging from 1,000 Da to 10,000 Da and Fraction III, which contains the polypeptide smaller than 1,000 Da. EL-4 cell (murine T lymphoma cell) was used to evaluate immune enhancing effect of each fraction from Holstein colostrum. Fraction n showed the highest proliferative effect of the colostrum whey fractions on EL-4 cell at 1mg/mL compared with whole whey and other fractions and this proliferative activity was shown in dose dependent manner. Fraction n showed the highest proliferative effect on PMA (Phorbol 12-myristate 13-acetate) stimulated EL-4 cell. Heated Fraction n showed similar effect to native one on proliferation of both EL-4 cell and PMA stimulated EL-4 cell.
Chae, Jong Seok;Kim, Hae-jung;Park, Weon Seo;Bae, Youngmee;Jung, Kyeong Cheon
IMMUNE NETWORK
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v.2
no.4
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pp.217-222
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2002
Background: Scid.adh is a recently developed murine thymic lymphoma cell line, which has been used as in vitro model for the study of double negative stage III thymocytes. In this study, we compared the expression profile of a number of genes and proteins, which are tightly related to T cell development and apoptosis, in thymic lymphoma cell lines, R1.1, EL-4, and Scid.adh for the developmental staging. Methods: We examined the expression of development marker genes and proteins in three lymphoma cell lines by flow cytometry and RT-PCR. In addition, the expression of apoptosis-related molecules including bcl-2, bax and Fas was also investigated. Results: As previously reported, Scid.adh cell line expressed CD8 and CD25 but not TCR ${\alpha}$ chain, while R1.1 cells expressed TCR ${\alpha}$ chain and both CD4 and CD8 transcripts. These suggest that R1.1 might be in double positive stage, and low level of CD44 expression and the absence of CD25 support this suggestion. In contrast, EL-4 cells showed high level of TCR ${\alpha}$ chain transcript, and low-level of CD4 expression, suggesting that EL-4 is in more mature stage than R1.1. Further, this suggestion was supported by the lack of mT-20 in EL-4 cells, which is expressed in the immature thymocytes, and Scid.adh and R1.1 cell lines, but not in the terminally differentiated thymocytes and peripheral T cells. Among the apoptosis-related gene, transcripts of bcl-2 gene were detected in both R1.1 and EL-4 but not in Scid.adh cells, while bax was expressed in all cell lines. Fas expression was the highest in EL-4 cells and low in Scid.adh cell line. Conclusion: R1.1 cell may represent double positive stage, and EL-4 is more differentiated cell line. In addition, Scid.adh and EL-4 cell lines are suspected to be useful for the study of function of bcl-2 family and Fas during the thymocyte development, respectively.
The changes of plasma prostaglandin $E_2$ level, natural killer cell activity and tumor cell growth were assayed after transplantation of EL-4 leukemia cells in C57BL/6 mice. The results were summarized as follows; 1. Plasma prostaglandin $E_2$ level was increased in EL-4 bearing mice, but indomethacin treated mice group showed low level. 2. The tumor-derived prostaglandin $E_2$ inhibited the post-target binding cytolytic process of natural killer activity. 3. Indomethacin inhibited the growth of prostaglandin secreting EL-4 solid tumor.
Kim, Sung-Hoon;Robert-W. Kozak;Chung, Kyeong-Soo;Ahn, Byung-Zun
Archives of Pharmacal Research
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v.17
no.3
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pp.194-198
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1994
The antitumor effects of the 2E4 and anti--Tac, monoclonal antibodies directed to Il-2 receptor (IL-2R) conjugated with .alpha.-particle emitting radionuclide bismuth-212., were compared. The $^{212}Bi-2E4$ demonstratedspecific cytotocicity to EL4J3, 4, a I$L-2R^+$ cell line, than to EL4J, a $IL-2R^-$ cell line in thymidine incorporation assy. TEX>$^{212}Bi-2E4$ exerted the maximal antitumor effect in that % T/C in C57BL/6 mice implanted with EL4J3.4 ascitic tumor was 331% at the concentration of $50{\;}{\mu}Ci$, while that of $^{212}Bi-anti-Tac$ was 258% at $100{\;}{\mu}Ci$.
Microorganisms growing alcoholic distillery wastes were isolated from soil. Of them, the selected strain EL-9 had a capability of accumulating poly-$\beta$-hydroxybutyrate (PHB) when grown in alcoholic distillery wastes. The strain EL-9 was identified as a genus Actinobacillus based on the morphological, cultural, and biochemical characteristics. The strain EL-9 was named temporarily as Actino- bacillus sp. EL-9. The optimal temperature and pH for cell growth of Actinobacillus sp. EL-9 were 30$\circ$C and 7.0, respectively. The optimal medium compositions for cell growth comprised glucose 2%, NH$_{4}$NO$_{3}$ 0.15%, Na$_{2}$HP0$_{4}$-12H$_{2}$O 0.25%, KH$_{2}$PO$_{4}$ 0.25%, MgSO$_{4}$4-7H$_{2}$O 0.15%, FeSO$_{4}$-7H$_{2}$O 0.005%, CaCl$_{2}$-2H$_{2}$O 0.003% and trace element solution 5m/l. To investigate the optimal conditions for PHB production, two-stage culture technique was used. The result showed that the optimal conditions for PHB production are identical those for cell growth. When propionic acid was added as a cosubstrate, PHB/HV copolymer was produced.
Metformin is a treatment used widely for non-insulin-dependent diabetes mellitus with few side effects and acts by inhibiting hepatic gluconeogenesis and glucose absorption from the gastrointestinal tract. Lymphoma is one of the most common hematological malignancies in dogs. Chemotherapy is used mainly on lymphoma, but further research on developing anticancer drugs for lymphoma is needed because of its severe side effects. This study examined the anticancer effects of metformin alone and in combination with 2-deoxy-D-glucose (2-DG), a glucose analog, on EL4 cells (mouse T cell lymphoma). Metformin reduced the metabolic activity of EL4 cells and showed an additive effect when combined with 2-DG. In addition, cell death was confirmed using a trypan blue exclusion test, Hochest 33342/propidium iodide (PI) staining, and Annexin V/PI staining. An analysis of the cell cycle and mitochondria membrane potential (MMP) to investigate the mechanism of action showed that metformin stopped the G2/M phase of EL4 cells, and metformin + 2-DG decreased MMP. Metformin exhibited anticancer effects as a G2/M phase arrest mechanism in EL4 cells and showed additive effects when combined with 2-DG via MMP reduction. Unlike cytotoxic chemotherapeutic anticancer drugs, metformin and 2-DG are related to cellular glucose metabolism and have little toxicity. Therefore, metformin and 2-DG can be an alternative to reduce the toxicity caused by chemotherapeutic anticancer drugs. Nevertheless, research is needed to verify the in vivo efficacy of metformin and 2-DG before they can be used in lymphoma treatments.
To determine the biological effects of low-dose-rate radiation ($^{137}Cs$, 2.95 mGy/h) on EL4 lymphoma cells during 24 h, we investigated the expression of genes related to apoptosis, cell cycle arrest, DNA repair, iron transport, and ribonucleotide reductase. EL4 cells were continuously exposed to low-dose-rate radiation (total dose: 70.8 mGy) for 24 h. We analyzed cell proliferation and apoptosis by trypan blue exclusion and flow cytometry, gene expression by real-time PCR, and protein levels with the apoptosis ELISA kit. Apoptosis increased in the Low-dose-rate irradiated cells, but cell number did not differ between non- (Non-IR) and Low-dose-rate irradiated (LDR-IR) cells. In concordance with apoptotic rate, the transcriptional activity of ATM, p53, p21, and Parp was upregulated in the LDR-IR cells. Similarly, Phospho-p53 (Ser15), cleaved caspase 3 (Asp175), and cleaved Parp (Asp214) expression was upregulated in the LDR-IR cells. No difference was observed in the mRNA expression of DNA repair-related genes (Msh2, Msh3, Wrn, Lig4, Neil3, ERCC8, and ERCC6) between Non-IR and LDR-IR cells. Interestingly, the mRNA of Trfc was upregulated in the LDR-IR cells. Therefore, we suggest that short-term Low-dose-rate radiation activates apoptosis in EL4 lymphoma cells.
The GroEL heat-shock protein from Fusobacterium nucleatum, a periodontopathogen, activates risk factors for atherosclerosis in human microvascular endothelial cells (HMEC-1) and ApoE-/- mice. In this study, we analyzed the signaling pathways by which F. nucleatum GroEL induces the proinflammatory factors in HMEC-1 cells known to be risk factors associated with the development of atherosclerosis and identified the cellular receptor used by GroEL. The MAPK and NF-${\kappa}B$ signaling pathways were found to be activated by GroEL to induce the expression of interleukin-8 (IL-8), monocyte chemoattractant protein 1 (MCP-1), intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1), vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM-1), E-selectin, and tissue factor (TF). These effects were inhibited by a TLR4 knockdown. Our results thus indicate that TLR4 is a key receptor that mediates the interaction of F. nucleatum GroEL with HMEC-1 cells and subsequently induces an inflammatory response via the MAPK and NF-${\kappa}B$ pathways.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.21
no.2
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pp.46-53
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2008
Background and Objectives : The aim of this study was to investigate the anti-oxidant, anti-allergic and anti-inflammatory ability of the Taglisodog-eum(SHE) extract on the RAW 264.7 and EL4 cells Materials and Methods : Three types of experiments were implemented for this study: first, the experiment to study the anti-oxidant effect of SHE using Riboflavin; second, in vitro experiment to investigate the inhibition of Th 2 cell differentiation by SHE using EL4 cells (IL-4 mRNA expression); third, the suppression of $NF-{\kappa}B$ activation using RAW 264.7 cells (iNOS and COX-2 mRNA expression). Results : The anti-oxidant ability of SHE were dose-dependantly increased. From in vitro, the LPS-induced iNOS and COX-2 mRNA expression were dose-dependantly decreased in the RAW264.7 cells treated with SHE and the PMA-induced IL-4 mRNA expression were also dose-dependantly decreased in EL4 cells. $NF-{\kappa}B$ activation was suppressed, and iNOS & COX-2 production were inhibited by SHE Conclusion : The results suggest that SHE has dose-dependant anti-oxidant ability, and has anti-allergic and anti-inflammatory effects through the suppression of $NF-{\kappa}B$ activation and the inhibition of Th 2 cell differentiation.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.20
no.3
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pp.63-70
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2007
Objectives : Atopic dermatitis is a recurrent or chronic eczematous skin disease with severe pruritus. Although the pathogenic mechanisms of atopic dermatitis are yet unknown, recently hyperresponsive Th2 cells in the acute phase are reported as the important mechanisms. Cheonggisan(CGS) is used in oriental clinics for curing acute skin lesions of eczema, atopic dermatitis or urticaria. There have been no studies on the therapeutic mechanism of CGS for curing atopic dermatitis. We aimed to find out the therapeutic mechanism of CGS on atopic dermatitis, so we observed Th2 cell differentiation in EL 4 cells and $NF-kB$ p65 activation in RAW 264.7 cells. Materials and Methods : EL 4 cells were induced the increase of IL-4 mRNA expression by phorbol-12-myristate-13-acetate(PMA) and 4-tert-Octylphenol(OP) and treated with CGS extract. RAW 264.7 cells were induced the increase of cyclooxygenase(COX)-2 mRNA expression by lipopolysaccharide(LPS) and treated with CGS extract. Results : The PMA and OP induced IL-4 mRNA expression was dose-dependantly decreased in CGS treated EL 4 cells. The LPS-induced COX-2 mRNA expression was dose-dependantly decreased in CGS treated RAW 264.7 cells. Conclusion : The results may suggest that the CGS inhibits Th2 cell differentiation in EL 4 cells and inhibits $NF-kB$ p65 activation in RAW 264.7 cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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