Suzuki, T.;Takagi, M.;Yamamoto, M.;Boediono, A.;Saha, S.;Sakakibara, H.;Oe, M.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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1997.05a
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pp.9-15
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1997
치밀 난구세포로 둘러싸인 소 난자를 $38^{circ}C$. 5% $CO_2$ 배양기에시 5% superovulated cow serum(SCS)이 첨가된 m-TCM 199 medium 으로 $20{\sim}22$ 시간 배양하였으며, 수정능이 획득된 정자와 체외수정하였다. 7일${\sim}$8일경의 수정란을 1.3M methyl cellosolve(MC), 1.1M diethylene glycol(DEG), 1.8M ethylene glycol(EG), 1.6M propylene glycol(PG) 및 1.1M 1,3-butylene glycol(BG) 용액에서 10분간 평형시킨 후 0.25 ml 스트로내에 장전하였다. 스트로를 $0^{\circ}C$의 alcohol bath freezer에 넣고 $-6^{\circ}C$까지 $-1^{\circ}C$/분 속도로 냉각, 식빙 후 10분간 정체시켰으며, $-0.3^{\circ}C$/분 또는 $-0.5^{\circ}C$/분으로 $-30^{\circ}C$까지 냉각 후 스트로를 액체질소에 침지하여 보관하였다. 수정란이 들어있는 스트로를 $30^{\circ}C$ 온수에서 융해하였으며, 수정란을 TCM 199 medium 으로 옮긴 후 5% SCS가 첨가된 TCM 199 medium 에서 48시간 배양하였다. 수정란이 양호한 형태를 유지하며 나중의 발육단계로 진행된 것을 생존한 것으로 간주하였다. 각 종류의 동해방지제에서 동결된 수정란의 일부는 융해 후 동해방지제를 제거하지 않고 직접 비외과적으로 이식하였다. 동결-융해 후 동해방지제의 종류에 따른 탈출배반포 발달율은 EG 50.0%, MC 53.6%, DEG 56.9%, PG 58.0% 그리고 BG 11.5%였다. $-0.3^{\circ}C$/분 또는 $-0.5^{\circ}C$/분 으로 냉각한 수정란의 생존율은 두 그룹간에 유의적인 차이가 없었으나 (P<0.05), 탈출배반포 발달율은 -0.5분 $^{\circ}C$/분(22.6%, 12/53)보다 $-0.3^{\circ}C$/분(64.6%, 31/48) 냉각시에 유의적으로 높았다(P<0.01). 동해방지제의 종류에 따른 수정란의 수태율은 MC 48%(10/21). DEG 30%(3/10), EG 74%(20/27) 및 PG 40%(4/10) 였다. 이러한 결과로 보아 MC, DEG, EG 그리고 PG는 소의 체외수정란의 동결을 위한 동해방지제로서 이용될 수 있음을 보여주었다.
The purpose of this study to examine the effect of intermittent fasting and resistance exercise on sex hormone and glucose metabolism of middle-aged women for 12 weeks. The two groups classified that one group(EG) was done intermittent fasting and resistance exercise both, the other group(CG) was controled. The group of EG was applied doing intermittent fasting 1 time for 24 hours a week, and doing resistance exercise 3 times for 60 minutes a week. The intensity of the exercise was 60%. Each measurement variable measured before and after 12 weeks to investigate the effect. During this study got the result with this step. First, EG have shown small interaction with sex hormone. Second, EG have shown small interaction with resistance exercise. Therefore, this study give us positive result to effect of intermittent fasting and resistance exercise on sex hormone and glucose of middle-aged women for 12 weeks. However, it has limitation to verify effect of intermittent fasting and resistance exercise.
This study was to establish an effective dilution technique in a vitrification of bovine blastocysts for the field trial. For vitrification, blastocysts were exposed in glycerol (G) and ethylene glycol (EG) mixture in m-DPBS supplemented with 10% FBS. Blastocysts were first exposed to 10% (v/v) G for 5 min, and subsequently were transferred to 10% G plus 20% EG (v/v) for 5 min. Finally, embryos were transferred to 25% G plus 25% EG (v/v) for 30 see and were placed in nitrogen vapor for 3 min, and then were plunged into L$N_2$. At thawing, the straw containing blastocysts was placed in air for 10 sec, and then plunged into a water bath at $25^{\circ}C$ until all ice had disappeared. They were placed in $25^{\circ}C$ and 36$^{\circ}C$ water according to treatment group for different time. Also, in vitro survival was assessed by the re-expansion and hatched rates at 24 hand 48 h postwarming, respectively. The results obtained in these experiments were summarized as follows; 1) In the survival rates of vitrified bovine blastocysts according to different dilution time at thawing, the data of 1 min group (86.6, 56.6%) were higher than those of other treatment groups (2 min; 93.5, 35.4%, 2.5 min; 76.9, 30.7%, 3 min; 88.8, 36.1% and 3.5 min; 83.7, 8.1%). 2) When the in vitro survival of vitrified groups according to different developmental stage was examined at 48 h after thawing using 1 min dilution method, the hatching rates of fast developed embryos (expanded blastocyst: 81.3%: early hatching blastocyst: 86.2%) were higher than that of delayed developed one (early blastocyst: 46.6%). 3) In addition, when the in vitro survival of vitrified groups according to different embryo age was compared, the hatched rates at 48 h after thawing of Day 7 (66.6%) and Day 8 embryos (60.0%) were significantly higher than that of Day 9 embryos (22.7%) (P<0.05). These results demonstrate that vitrified bovine IVM/IVF/IVC blastocysts can be successfully survived in vitro using one-step dilution (1 min) method.
This study was carried out to provide information on the effect of nutrition education program for diabetic patients at the Guri City's Public Health Center. Subjects of this study were 31 persons(male 7, female 24) who attended all courses of "2002 Diabetes Education Class". They were indicated as the 'education group'(EG). Eating and living habits of EG were investigated before the education. EG's weight and blood glucose (post prandial 2 hours, PP2) were examined as well. EG's PP2 reduction was compared with a 'control group'(CG) who didn't join any course in that class. All of the subjects were non-insulin-dependent diabetes mellitus(NIDDM) patients. EG's average age was 62.4$\pm$8.8. Before taking the course, EG's PP2 was 251.5$\pm$29.6mg/dl, and body mass index(BMI) was 26.3$\pm$2.3 on average. Most of them were stressed out from their daily lives and usually had no exercise. Most people of EG ate meals rapidly and liked sweet and fatty foods. After the course of training, EG's weight and BMI before the training were not decreased significantly. However, all of the EG's PP2s, which were measured 4 times(before the meal at the special lunch session, after 2 hours at this meal, after 2 weeks and 4 weeks dietary assembly), were decreased in comparison with the PP2 which was checked prior to joining the training. EG's average PP2 was more reduced than CG's one. In addition, all groups' PP2s were decreased for 8 weeks. After all, this nutritional education at the public health center was effective in glycemic control for diabetes mellitus patients. Especially, when the dietary assembly as practical training was included in the educational process, the patient's dietary intake and PP2 was improved more effectively. Therefore, this study suggests that nutrition work at public health centers is necessary for the Health Promotion Policy.
Purpose: The purpose of this study was to investigate the effect of balance training using a training mat on the postural balance of the elderly individuals. Methods: Thirty-five participants were selected from a falling prevention class and were randomly allocated to two groups; 17 in an exercise group (EG, $72.7{\pm}5.1$ years) and 18 in the control group ($74.9{\pm}4.0$ years). The EG underwent balance training using training mats for 60 minutes a day, 2 days a week, for 4 weeks. Postural balance parameter (timed up and go test, functional reach test, and one leg standing) were measured pre- and post- training. Results: The EG showed significant improvements in all variables that were analyzed. Conclusion: This study confirmed that balance training using a training mat effectively improves the postural balance in elderly people at risk for falling.
Proceedings of the Korean Nuclear Society Conference
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1998.05a
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pp.806-811
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1998
핵연료 피복관의 산화반응 현상은 중대사고시 원자로와 격납건물의 건전성을 위협하는 중요한 원인중의 하나이다 본 논문에서는 MELCOR에서 사용증인 Urbanic-Heidrich 상관식과 SCDAP/RELAP5/MOD3.1에서 사용중인 MATPRO-EG&G 상관식을 사용하여 산화 반응 모델이 노심손상에 미치는 영향을 울진원전3,4호기를 대상으로 MELCOR의 입력변수의 변화에 따른 민감도를 분석하였다. 분석결과, Urbanic-Heidrich 상관식이 MATPRO-EG&G상관식에 비해 핵연료 용융시작을 약 394초, 원자로 노심 하부에서의 용융물 재배치 (relocation)시작을 약 434초 가량 빨리 초래하여 사고진행에는 큰영향이 없음을 나타내고 있으나 노심하부 파손시점까지 발생한 수소량은 Urbanic-Heidrich 상관식이 MATPRO-EG&G상관식에 비해 약 1.4배정도 더 많이 발생시켜 격납건물 건전성에 대한 영향이 매우 크므로 보다 자세한 모델검토가 요구된다.
This study was conducted to establish the method for preserving PGCs that enables long-term storage in liquid nitrogen for developmental engineering or preservation of species. The purpose of this study is to clarify the effects of freeze-thaw treatment on viability of PGCs in chickens. PGCs were collected separately from a germinal gonad of an early embryo of 5.5~6 day (stage 28) of Isa brown, Korean Oge (KO), White Leghorn and Commercial breeds. PGCs separated from a germinal gonad of an early embryo of 5.5~6 day (stage 28) are suspended in a freezing medium containing a freezing and protecting agents (e.g. dimethyl sulfoxide (DMSO), ethylene glycol (EG) and glycerol). The PGCs were then purified using magnetic activated cell sorting (MACS) method. The viability of PGCs after thawing was $87.4{\pm}0.4%$ and $89.4{\pm}0.2%$ with the 10% EG treatments with no significant difference between the Isa brown and Commercial breeds. The viability of PGCs after freeze- thawing was significantly higher for Isa brown ($87.4{\pm}0.4%$) and Commercial breeds ($89.4{\pm}0.2%$) than Korean Oge (KO) ($77.6{\pm}1.1%$) and White Leghorn ($76.2{\pm}0.9%$)(p<0.05) using 10% EG cryoprotectant. This study established a method for pre- serving chicken PGCs that enables systematic storage and labeling of cryopreserved PGCs in liquid ($LN_2$) at agermplasm repository and ease of entry into a data base. In the future, the importance for this new technology is that poultry lines can be conserved while work is being conducted on improving the production of germline chimeras.
Suzuki, T.;Takagi, M.;Yamamoto, M.;Boediono, A.;Saha, S.;Sakakibara, H.;Oe, M.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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1997.05a
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pp.27-34
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1997
Bovine oocytes surrounded with compact cumulus cells were cultured for 20 to 22 hours($38^{\circ}C$, 5% $CO_2$) in modified TCM-199 medium supplemented with 5% superovulated cow serum(SCS) and inseminated by in vitro capacitated spermatozoa. Day 7 to 8 embryos were equilibrated for 10 minutes in 1.3M methyl cellosolve(MC) <1.1M diethylene glycol(DEG), 1.8M ethylene glycol(EG), 1.6M propylene glycol(PG) and 1.1 M 1,3-butylene glycol(BG) solutions. They were then loaded into 0.25ml straws, placed into an alcohol bath freezer at $0^{\circ}C$, cooled from $0^{\circ}C$ to $-6^{\circ}C$ at $-1^{\circ}C$/minute, seeded, held for 10 minutes, and stored in liquid nitrogen. After thawing in $30^{\circ}C$ water, the embryos wee rehydrated in TCM-199 medium and then cultured for 48 hours in TCM-199 plus 5% SCS. Embryos were considered viable if they progressed to later developmental stages with a good morphology. Some of the embryos frozen in each cryoprotectant were thawed and transferred non-surgically without removing the cryoprotectant. Hatched embryos survived freezing and one-step dilution as follows : EG(50.0%), MC(53.6%), DEG(56.9%), PG(58.0%) and BG(11.5%). The survival rate of embryos cooled at -0.3^{\circ}C$ vs. $-0.5^{\circ}C$/minute was not significantly different(P<0.05), however, blastocysts hatched most often (P<0.01) in vitro when cooled at a rate of $0.3^{\circ}C$/minute(64.6%), 31/48) than at $-0.5^{\circ}C$/minute(22.6%, 12/53). Pregnancy rates resulting from embryos frozen in the different cryoprotectants were as follows : MC(48%, 10/21); DEG(30%, 3/10); EG(74%, 20/27); and PG(40%, 4/10). These results indicate that MC, DEG, EG and PG have utility as cryoprotectants for the freezing and thawing of IVF Bovine embryos.
The purpose of this study was to determine toxic effect of sucrose and trehalose prior to cryopreservation on nuclear maturation and embryonic development in immature bovine oocytes. All cryoprotectant was prepared in tissue culture medium 199-HEPES (TCM 199-HEPES) with 10% fetal bovine serum (FBS). Immature oocytes were exposed to 1.2M ethylene glycol (EG) and 0.1M sucrose or 1.2M EG and 0.1M trehalose for 3 min and then were exposed to 3.2 M EG and 0.25 M sucrose or 3.2 M EG and 0.25 M trehalose for 1 min. Oocytes treated with cryoprotectants were exposed to 0.25 M sucrose or 0.25 M trehalose for 5 min and then 0.1 M sucrose or 0.1 M trehalose for 5 min. Depending on type of sugar added to cryopreservation solution, oocytes were allocated to sucrose group and trehalose group, respectively. Oocytes exposed to TCM 199-HEPES with 10% FBS were considered as control. Oocytes were cultured in TCM 199 supplemented with 10% FBS, 5 ng/ml epidermal growth factor, 0.01 IU/ml luteinizing hormone, and $1\;{\mu}g/ml$ estradiol for 24 h in $39^{\circ}C$, 5% $CO_2$. Nuclear maturation was assessed by staining oocytes with 1% aceto-orcein. Oocytes were fertilized in vitro and were cultured in TCM 199 supplemented with 10% FBS, 5 mM sodium pyruvate, and antibiotics in $39^{\circ}C$, 5% $CO_2$. The rates of cleavage and blastocyst, and cell number in blastocyst were assessed. Metaphase II rates were not different among experimental groups regardless of type of sugar. The cleavage rate of trehalose group (73.3%) was significantly higher (p<0.05) than those of sucrose group (62.8%) and control group (60.8%). The blastocyst rate was significantly higher in trehalose group (p<0.05). Mean cell number in blastocyst were not different among experimental groups, although cell number of blastocyst in trehalose group was significantly higher on day 7 (p<0.05). In conclusion, sucrose and trehalose were not toxic to immature bovine oocytes prior to cryopreservation. In particular, trehalose was more effective on embryonic development.
This study was undertaken to investigate the influence of exposure and removal of four different cryoprotectants (CPAs) on the ATP content of cumulus cell-enclosed (COs) and cumulus cell-denuded (DOs) immature porcine oocytes. The in vitro nuclear maturation of the COs, exposed to and removed from the CPAs was also assessed. Both COs and DOs were exposed to 1.5 M concentrations of each CPA (ethylene glycol (EG); propylene glycol (PG); dimethyl-sulfoxide (DMSO); and glycerol (G)) for durations of 5, 15, and 30 minutes at room temperature ($23.5{\pm}1.5^{\circ}C$), and immersed in physiological saline supplemented with 20% (v/v) fetal bovine serum for 5 minutes ($39^{\circ}C$) to remove each CPA. Before, during and after exposure to each CPA, the ATP content of both the COs and the DOs was measured. After removal from each CPA an aliquot of the COs was matured for 44${\pm}$2 h, and their nuclear maturation rates were measured up to the metaphase stage of the second meiotic division (the M-II stage). The maturation rates up to the M-II stage were not significantly different between all the groups that were exposed to each CPA for 5 minutes. For 15 and 30 minute exposures, the maturation rates of the COs exposed to PG, DMSO and EG were almost the same as those of the control groups; however, the rates of G group exposed for 15 and 30 minutes were significantly lower (p<0.05) than the control group. These groups were also found to have a decrease in the ATP content of COs and DOs during and after exposure for the same periods (p<0.05). In addition, although the ATP contents of the COs after exposure to EG for any period were the same as the controls, the ATP content of the DOs exposed to EG for any period were significantly lower (p<0.05) than those of the controls. When the ATP content of the COs and DOs of each CPA were compared, the DOs exposed to PG were found to have a significantly greater level (p<0.05) than DOs exposed to G for any duration. In addition, the ATP content of DOs exposed to PG for 30 min and removal was also higher (p<0.05) than when exposed to DMSO for the same period. These findings indicate that PG may be a useful CPA for the cryopreservation of immature porcine oocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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