This study was to test whether Hanwoo in vitro matured oocytes can be successfully cryopreserved by a new vitrification procedure using MVC method. For the vitrification, oocytes were pretreated in 10% ethylene glycol (EG10) for 5-10 min, exposed in EG30 for 30 sec, each oocytes were individually put on the inner wall of 0.25 $m\ell$ straw, and then straws were directly plunged into L$N_2$. Thawing was taken by 4-step procedures [1.0 Msucrose (MS), 0.5 MS, 0.25 MS, and 0.125 MS] at 37$^{\circ}C$. In vitro developmental capacity (survival, cleavage ($\geq$2-cell) and blastocyst rates) in vitrified group was no significant difference compared to that in other treatment groups (exposed; 100.0, 74.4, 32.3% and control; 100.0, 78.3, 36.3%): high mean percentage of oocytes (91.2%) was survived, 69.4% of them were cleaved and 27.9% of cleaved embryos were developed to blastocyst. Especially, after transfer of in vitro developed embryos in vitrified group, four of six recipient animals were found to pregnant and three of them were ongoing pregnant by manual palpation at 250 days after transfer. However, among them, two healthy female calves (23 and 25kg) were born. This result demonstrates that MVC method is very appropriate freezing method for the Hanwoo in vitro matured oocytes and that ovum bank can be maintained efficiently by MVC cryopreservation method.
Kim, Sung Chan;Kang, Seung Ha;Choi, Eun Young;Hong, Yeon Hee;Bok, Jin Duck;Kim, Jae Yeong;Lee, Sang Suk;Choi, Yun Jaie;Choi, In Soon;Cho, Kwang Keun
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.29
no.1
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pp.126-133
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2016
A gene from Actinomyces sp. Korean native goat (KNG) 40 that encodes an endo-${\beta}$-1,4-glucanase, EG1, was cloned and expressed in Escherichia coli (E. coli) $DH5{\alpha}$. Recombinant plasmid DNA from a positive clone with a 3.2 kb insert hydrolyzing carboxyl methyl-cellulose (CMC) was designated as pDS3. The entire nucleotide sequence was determined, and an open-reading frame (ORF) was deduced. The ORF encodes a polypeptide of 684 amino acids. The recombinant EG1 produced in E. coli $DH5{\alpha}$ harboring pDS3 was purified in one step using affinity chromatography on crystalline cellulose and characterized. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis/zymogram analysis of the purified enzyme revealed two protein bands of 57.1 and 54.1 kDa. The amino terminal sequences of these two bands matched those of the deduced ones, starting from residue 166 and 208, respectively. Putative signal sequences, a Shine.Dalgarno-type ribosomal binding site, and promoter sequences related to the consensus sequences were deduced. EG1 has a typical tripartite structure of cellulase, a catalytic domain, a serine-rich linker region, and a cellulose-binding domain. The optimal temperature for the activity of the purified enzyme was $55^{\circ}C$, but it retained over 90% of maximum activity in a broad temperature range ($40^{\circ}C$ to $60^{\circ}C$). The optimal pH for the enzyme activity was 6.0. Kinetic parameters, $K_m$ and $V_{max}$ of rEG1 were 0.39% CMC and 143 U/mg, respectively.
Kim, Hyun;Cho, Young Moo;Ko, Yeoung-Gyu;Kim, Sung Woo;Seong, Hwan-Hoo;Yamanouchi, Keitaro
Journal of Embryo Transfer
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v.29
no.3
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pp.235-240
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2014
Ethylene glycol (EG) has been successfully used as a cryoprotectant for vitrification of mammalian embryos (including human embryos) due to its low formula weight and high permeation into cells compared with other cryoprotectants, including propylene glycol (PROH). Cryopreservation is able to store the surplus pre-embryos for freezing and furthermore thawing and transfer in a subsequent cycle. This study was carried out to evaluate the effects of embryonic stage, cryoprotectant, and freezing-thawing method on the rates of survival and development of the cryopreserved mouse early embryo and finally to establish the cryopreservation method of surplus embryos obtained during assisted reproductive technology (ART). Female ICR mice (6~8 weeks old) were induced to superovulate by sequential intraperitoneal injection of 5 IU PMSG and 5 IU hCG 48 h apart. Mouse embryos were collected according to its developmental stage after the injection of hCG. Embryos were cryopreserved not only during cryoprotectant step (1~4 step) but also in a variety of media (HTF, IVF medium, D-PBS) and cell stage. The results were as follows : There is no clear advantage in these freezing media of rapid method, but 4 cell and 8 cell of slow method (2, 3 and 4 step) have advantage in D-PBS. The development of embryos according to cell stage become greater in 8 cell stage. In the treatment steps of cryopreservation, the development of embryo to blastocyst was similar among rapid method, but the development of 4 cell and 8 cell embryos to blastocyst according to slow method was better than rapid method.
Park, Mi Seon;Min, Byung Hwa;Park, Jung Jun;Lim, Hyun Jeong;Myeong, Jeong-In;Jeong, Min Hwan
The Korean Journal of Malacology
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v.29
no.3
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pp.251-258
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2013
This study aims to find out a suitable cryoprotective agent (CPA) for cryopreservation and its optimum concentration in order to conduct planned artificial seed production of Pacific oyster, Crassostrea gigas and to preserve superior sperm. For this, we tried to understand toxicity and the effect of cryopreservation by CPA type and concentrations first and then looked into cell damage of the sperm after thawing. Toxicity analysis on the sperm of Pacific oyster according to different CPA and immersion time shows that dimethyl sulfoxide (DMSO) comes first when it comes to survival rate and mobility followed by ethylene glycol (EG), glycerol and methanol. To identify the optimum CPA and its level, filtered seawater was used as a diluent before cryopreservation for 30 days. As a result, cryopreserved sperm of Pacific oyster with 15% of DMSO showed the highest survival rate and activation. Also, we observed the cryopreserved and thawed sperm with Scanning electron micrographs by CPAs and concentrations. Consequently, DSMO showed the lowest cell damage followed by EG, methanol, glycerol and the level was 15, 20, 10, 5% respectively. In a nutshell, it is proven that the optimum CPA and its level is 15% of DMSO.
Kim, Young-Hee;Cha, Jae-Han;Jin, Hongzhou;Lee, Do-Gyu;Ha, Pan-Bong;Park, Mu-Hun
The Journal of Korea Institute of Information, Electronics, and Communication Technology
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v.13
no.1
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pp.48-57
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2020
MCU used in applications such as wireless chargers and USB type-C require MTP memory with a small cell size and a small additional process mask. Conventional double poly EEPROM cells are small in size, but additional processing masks of about 3 to 5 sheets are required, and FN tunneling type single poly EEPROM cells have a large cell size. In this paper, a 110nm MTP cell using a vertical PIP capacitor is proposed. The erase operation of the proposed MTP cell uses FN tunneling between FG and EG, and the program operation uses CHEI injection method, which reduces the MTP cell size to 1.09㎛2 by sharing the PW of the MTP cell array. Meanwhile, MTP memory IP required for applications such as USB type-C needs to operate over a wide voltage range of 2.5V to 5.5V. However, the pumping current of the VPP charge pump is the lowest when the VCC voltage is the minimum 2.5V, while the ripple voltage is large when the VCC voltage is 5.5V. Therefore, in this paper, the VPP ripple voltage is reduced to within 0.19V through SPICE simulation because the pumping current is suppressed to 474.6㎂ even when VCC is increased by controlling the number of charge pumps turned on by using the VCC detector circuit.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.27
no.6
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pp.795-801
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2013
The purpose of this study is to investigate effects of White Ginseng-Ejung-tang (EG) and Red Ginseng-Ejung-tang (ER) water extract on production of various cytokines such as interleukin (IL)-21, IL-25, IL-$28{\beta}$, erythropoietin (EPO), Exodus-2, monocyte chemotactic protein (MCP)-5, macrophage inflammatory protein (MIP)-$3{\alpha}$, MIP-$3{\beta}$, Fractalkine, and TARC in RAW 264.7 mouse macrophages stimulated by lipopolysaccharide (LPS). Levels of cytokines were measured by High-throughput multiplex bead array cytokine assay based on xMAP (multi-analyte profiling beads) technology. ER significantly decreased levels of IL-21, IL-25, IL-$28{\beta}$, EPO, Exodus-2, MCP-5, MIP-$3{\alpha}$, MIP-$3{\beta}$, TARC, and fractalkine for 24 h incubation at the oncentrations of 25 and 100 ${\mu}g/mL$ in LPS-induced RAW 264.7 (P < 0.05). But EG did not show any significant effect. These results suggest that ER has anti-inflammtory property related with its inhibition on the production of IL-21, IL-25, IL-$28{\beta}$, and chemokines such as EPO, MCP-5, MIP-$3{\alpha}$, MIP-$3{\beta}$, Fractalkine, Exodus-2, and TARC in LPS-induced macrophages.
This study aimed to determine the effect of lower trapezius muscle strengthening exercises on pain, neck disability index (NDI), cervical range of motion (ROM), and lower trapezius muscle strength in patients with unilateral neck pain. Following baseline measurements, the subjects (N=40) with unilateral neck pain were randomized into one of two 5 weeks exercise intervention groups: a experimental group (EG, $n_1=20$) that received strength training of the lower trapezius muscles or a control group (CG, $n_2=20$) that received routine physical therapy program. Each group participated in the intervention for 30 minutes, 3 times a week, for 5 weeks. All participants performed 2 repetitions of each intervention per day. The numeric pain rating scale for pain, NDI, ROM, and lower trapezius strength were recorded both pre- and post-intervention for both groups. Paired t-tests were used to determine significant changes post-intervention compared with pre-intervention and independent t-tests were used to analyze differences in the dependent variables between the 2 groups. After the 5-weeks intervention, both groups experienced significantly decreased pain and disability level (p<.05) and significantly increased cervical flexion, extension, lateral flexion, and rotation ROM (p<.05). The EG that received strength training of the lower trapezius muscles showed greater improvements in pain and functional disability level, cervical rotation, and lower trapezius strength than the CG (p<.05). These results suggest that a lower trapezius strengthening exercises reduce neck pain and neck disability level and enhance cervical ROM and lower trapezius strength level in patients with unilateral neck pain.
[ $LaMeO_3$ ](Me = Cr, Co) powders were prepared using the polymeric precursor method. The effects of the chelating agent and the polymeric additive on the synthesis of the $LaMeO_3$ perovskite were studied. The samples were synthesized using ethylene glycol (EG) as the solvent, acetyl acetone (AcAc) as the chelating agent, and polyvinylpyrrolidone (PVP) as the polymer additive. The thermal decomposition behavior of the precursor powder was characterized using a thermal analysis (TG-DTA). The crystallization and particle sizes of the $LaMeO_3$ powders were investigated via powder X-ray diffraction (XRD), field emission scanning electron microscopy (FE-SEM), and particle size analyzer, respectively. The as-prepared precursor primarily has $LaMeO_3$ at the optimum condition, i.e. for a molar ratio of both metal-source (a : a) : EG (80a : 80a) : AcAc (8a) inclusive of 1 wt% PVP. When the as-prepared precursor was calcined at $700^{\circ}C$, only a single phase was observed to correspond with the orthorhombic structure of $LaCrO_3$ and the rhombohedral structure of $LaCoO_3$. A solid-electrolyte impedance-metric sensor device composed of $Li_{1.5}Al_{0.5}Ti_{1.5}(PO_4)_3$ as a transducer and $LaMeO_3$ as a receptor has been systematically investigated for the detection of NOx in the range of 20 to 250 ppm at $400^{\circ}C$. The sensor responses were able to divide the component between resistance and capacitance. The impedance-metric sensor for the NO showed higher sensitivity compared with $NO_2$. The responses of the impedance-metric sensor device showed dependence on each value of the NOx concentration.
We investigated the survival, $\beta$-galactosidase activity and cellular permeability of lactic acid bacteria such as Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus casei subsp. casei IFO 3533, Streptococcus thermophilus KCTC 2185, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis ATCC 4797, and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus ATCC 11842 in anaerobic condition of pH 1.5-3.5 range. Numbers of all tested viable cells did not decrease at pH 3.5, but decreased rapidly at pH 1.5 and pH 2.5 during 2 hour incubation at modified EG medium. Immediately after 2 hour incubation, the decrease in population at pH 1.5 and pH 2.5 was about 6-8 and 5-7 log cycles/ml, respectively. Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 showed the higest survival of all tested bacteria. The $\beta$-galactosidase activity from Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus ATCC 11842 and Streptococcus thermophilus KCTC 2185 decreased rapidly at pH 1.5 and 2.5, but there was a little decrease at pH 3.5. The cellular permeability that was measured by the leakage of intracellular materials increased with decrease of pH. These results suggest that the ingested lactic acid bacteria may be destroyed in contact with low pH of gastric acid.
Yeon-Seop Lee;Seung-Soo Yang;Seul-Gi Jang;Ji-Hee Seol;Ji-Eun Lee;Dong-Jin Lee
Journal of The Korean Society of Integrative Medicine
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v.11
no.2
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pp.141-147
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2023
Purpose : This study aimed to find out the effect of aerobic exercise using Bruce protocol on heart rate, oxygen saturation, and blood pressure after recovery from COVID-19 infection. Methods : In this study, 34 students from D University located in J city were targeted, COVID-19 infected group (17 people) and non-COVID-19 non-infected group (17 people). The Bruce protocol using a treadmill was applied to the aerobic exercise of this study. The Bruce protocol has in the first stage of METs 4 (slope 10 %, speed 2.7 km/h). The second stage was METs 5 (slope 12 %, speed 4 km/h), and the third stage was METs 6 (slope 14 %, speed 5.4 km/h). All measurements were measured 3 times and the average value was used. Results : As a result of this study, as a result of comparing heart rate changes according to aerobic exercise using the Bruce protocol. EG group and the CG group increased significantly according to the progressive exercise load (METs 4~5), and in the third stage of the Bruce protocol between groups, The EG group showed a significantly lower heart rate. As a result of comparing changes in oxygen saturation and blood pressure, there was no significant difference between the EG and C groups according to the gradual exercise load. Conclusion : In conclusion, there was no difference between normal and pressure when MET of moderate intensity exercise (4 to 6) was applied to the effect on heart rate, oxygen saturation, and blood pressure in healthy adults who were fully recovered from COVID-19. Secondary side effects may occur when high intensity exercise with a MET of 6 or higher, so it is strongly recommended that hospitals or specialized institutions measure exercise and physical ability according to individual exercise intensity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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