• 한국어병학회지
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• 제23권3호
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• pp.409-420
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• 2010

Effects of various concentrations of garlic powder and garlic extract in the diets on growth, serum chemistry and immune response of olive flounder were determined. Thirty-five juvenile fish averaging 5.1 g were randomly distributed into 21 of 180 L flow-through tanks. Seven experimental diets with various concentrations of garlic powder (GP) and garlic extract (GE) were prepared in triplicate: GP-0 without garlic supplementation, GP-0.5, GP-1, GP-2, GP-3 and GP-5 diets containing garlic powder at the concentrations of 0.5, 1, 2, 3 and 5%, respectively at the expense of wheat flour and finally, GE-0.4 diet containing 0.4% garlic extract were prepared. At the end of the 8-week feeding trial, serum chemistry of fish was measured. In addition, twenty fish from each tank were artificially infected with E. tarda for the following 96 h to monitor cumulative mortality. Weight gain of fish fed GP-0 diet was higher than that of fish fed GP-1, GP-2, GP-3 and GP-5 diets. No difference in serum criteria (total protein, glucose, glutamate oxaloacetate transaminase, cholesterol and triglyceride levels) of olive flounder was found among the experimental diets except for glutamate pyruvate transaminase. Lysozyme activity of fish fed GP-0, GP-1, GP-3 and GE-0.4 diets was higher than that of fish fed GP-5 diet. The highest cumulative mortality was 93.3% in fish fed GP-0 diet at 96 h after E. tarda infection, followed by GP-3, GP-1, GP-5, GP-2, GP-0.5 and GE-0.4 diets. In considering these results, dietary inclusion of garlic powder and garlic extract has no distinctive positive effect on improvement in growth, serum chemistry and immune response of olive flounder in this experimental conditions, therefore, its application should be carefully considered.

• 한국어병학회지
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• 제6권1호
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• pp.11-20
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• 1993

뱀장어의 복강내에 Edwardsiella tarda의 FKC, HKC 및 crude LPS를 주사한 후 경시적으로 순환혈액 중 면역세포 수의 변화와 식작용, 항체가를 비교하여 항원 종류별 뱀장어의 면역 반응을 검토하였다. 백신 투여 뱀장어의 순환혈액 중 림프구 수는 백신 투여 후 6시간까지 감소하였으나 이후 증가하기 시작하여 24시간 후에는 정상치로 회복되었다. 이후 모든 면역 실험구에서는 실험기간 동안 대조구에 비하여 림프구 수가 증가된 상태로 지속되는 경향을 보였다. 한편, 호중구의 출현수를 대조구와 비교하면 백신 투여 후 12시간 이내에 최고치를 나타낸 후 서서히 정상 수준으로 회복되는 경향을 나타내었다. 모든 백신 투여 실험구의 혈청중 항체가는 백신 투여 3주째에 128에 이르러 높은 항체가가 지속되었으나, HKC 면역구의 경우에는 6주후 4로 떨어졌다. 호중구의 식작용에 있어서는 LPS 면역구의 항원 주사 6시간 후와 1주후의 반응 6시간째의 식균지수가 각각 28.3과 3.9로 가장 높았다. 항원 주사 후 12시간째의 식균지수가 반응 6시간째 FKC 면역구 18.8, HKC 면역구 10.7, LPS 면역구 28.3 및 대조구 1.2로서, 1 주 후 각 면역구의 식균지수보다 높게 나타났다. 신선 항혈청의 항균작용은 FKC와 LPS 투여구에서만 나타나고, HKC 투여구에서는 세균 수의 감소를 볼 수 없었다. 그리고, 공격시험에서는 HKC, FKC 및 LPS 면역구의 RPS가 각각 10%, 20% 및 30% 이었으므로, 본 세균은 항원의 처리 방법에 따라 숙주의 방어력 증강에 미치는 효과가 다른 것을 알 수 있었다.

• 한국어병학회지
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• 제22권3호
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• pp.317-326
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• 2009

This study has shown the screening of anti-bacterial activity of three Indian medicinal plant choloroform : methanol (50:50) solvent leaf extracts (i.e. Azadirachta indica, Ocimum sanctum, and Curcuma longa) with different concentrations (10, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.312, and 0.156 mg/ml) under in vitro conditions against fish pathogenic bacteria, Aeromonas hydrophila, Streptococcus iniae, Vibrio harveyi, V. anguillarum, and Edwardsiella tarda isolated from olive flounder farms, Jeju Island, South Korea. The anti-microbial activity of the A. indica and O. sanctum extracts yielded the zones of growth inhibition (ZI) was 3 and 1mm against A. hydrophila at concentration of 0.156 mg/ml when compared to that of tetracycline standard (3 mm). At highest concentration (10 mg/ml) of A. indica, O. sanctum, and C. longa, high inhibition was 9, 7, and 6 mm when compared to that of tetracycline (11 mm) against A. hydrophila. The minimum inhibitory concentration (MIC) of A. indica, O. sanctum, and C. longa at 0.156 mg/ml that yield 9, 10, and 13 CFU/ml for A. hydrophila, 16, 22, and 25 CFU/ml for S. iniae and 18, 22, and 23 CFU/ml for E. tarda compared to the tetracycline. At highest concentration (10 mg/ml) of the three extracts was better inhibiting the growth of A. hydrophila, S. iniae and E. tarda. A. indica, O. sanctum, and C. longa were determined to the potential antioxidant activityon the basis of their scavenging activity of the stable 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) free radical. A. indica extract was 0.625 mg/ml which indicated that the strong anti-oxidant activity. However, O. sanctum and C. longa extracts showed weak anti-oxidant activity at this concentration. Hence, in vitro assay among the pathogens, A. hydropila is better inhibitory activity of the extracts. It is evident that the Indian medicinal plants extracts were subjected to its effectiveness against A. hydrophila, S. iniae, and E.tarda at low concentrations. The obtained results in the present study suggested that the Indian plant extracts is a prevention tools for Korean olive flounder aquaculture pathogens and its need further advance investigation.

• 생명과학회지
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• 제22권6호
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• pp.788-793
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• 2012

본 연구는 어류 병원균의 비 유전성을 가지는 항생제 내성균인 persister cell에 관한 연구이다. Persister cell은 기존의 항생제를 분해하는 저항균체(resistant cell)와는 다른 특성으로 항생제에 대한 저항성을 가지는데, 항생제가 존재하는 환경에서 새로운 기작으로 항생제에 대한 내성을 형성한다. 그래서 기존의 양식장에서 어류를 키울 때 어류에 투여하는 항생제는 일반적인 균주의 사멸 항생제 농도보다 더 높은 농도의 항생제를 투여하게 된다. 특히, E. tarda에 대한 다양한 항생제가 개발되어 있지만 내성균의 출현으로 그 효과가 좋지 않으며, 또한 persister cell에 의한 질병 재발을 방지하기 위해 균사멸 농도보다 훨씬 높은 농도의 항생제를 처리하고 있다. Persiser cell의 특이적인 저감 효과를 확인 하기 위하여 선별된 3종의 식물 추출물(돌외, 예덕나무, 상산)을 항생제와 함께 사용하였으며, 돌외와 예덕나무가 100 ${\mu}g/ml$, 상산은 200 ${\mu}g/ml$의 농도에서 persister cell의 사멸 효과를 나타내었다. 또한 넙치를 이용한 12일간의 누적 폐사율을 조사한 결과, 식물 추출물과 항생제 혼합액의 복강 투여구가 항생제 단독의 복강 투여구 보다 낮은 누적 폐사율이 관찰되었고, 항생제에 첨가한 식물 추출물의 농도가 돌외 30 ${\mu}g/ml$, 예덕나무 10 ${\mu}g/ml$, 상산 10 ${\mu}g/ml$의 농도 투여구에서 가장 낮은 누적 폐사율을 나타내었다. 따라서 본 연구에 사용된 세가지 추출물들(돌외, 예덕나무, 상산)은 항균 활성을 가지지 않은 농도에서 항생제와 병용하여 persister cell의 저감 효과가 있음을 확인하였다.

• 한국수산과학회지
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• 제42권6호
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• pp.614-620
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• 2009

We report non-specific immune responses and its disease resistance against Edwardsiella tarda by alga mixture (HE; Hizikia:Ecklonia) in olive flounder for the first time. Five isonitrogenous (44% crude protein) and isocaloric (17.1 MJ $kg^{-1}$) diets were formulated to have 0%, 2%, 4%, 6% and 8% of the alga mixture. One of five experimental diets was fed triplicate groups of fish (30 fish/group) to apparent satiation in a flow through system. After a two week feeding, blood was sampled at 3, 6, 12, 24 h after the last feeding for a kinetic measurement of nitroblue tetrazolium (NBT) activity and healthy fish with similar sizes in each tank were selected and injected with 1 mL of E. tarda suspension ($1.0\times10^7$ CFU/mL) to evaluate the disease resistance of the fish. Dietary supplementation of alga mixtures resulted in significantly higher non-specific immune responses compared with the fish fed the control diet. The cumulative mortality was significantly lower in the fish groups fed alga mixture containing diets than control group in the challenge test with E. tarda. Therefore, the results in this study indicate that dietary supplementation of Hizikia and Ecklonia mixtures enhance the non-specific immune responses and a disease resistance of olive flounder.

• 한국어병학회지
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• 제23권1호
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• pp.69-83
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• 2010

본 연구에서는 마늘 추출물과 착즙액이 넙치의 비특이적 면역력에 미치는 영향과 투여 방법에 따른 효과를 밝히고자 하였다. 마늘 추출물의 투여는 복강 주사법을, 마늘 착즙액은 침지법을 사용하였다. 마늘 착즙액 침지법은 일정 농도의 착즙액을 해수에 현탁하여 2일 간격으로 3회 침지하였다. 병원균의 공격 시험은 시험어에 마늘 추출물의 일정량을 2일 간격으로 3회 주사한 지2일 후에 실시하였다. 그 결과, 마늘 추출물의 복강 주사 시험구 중 5% 투여구에서 lysozyme의 활성이 가장 유의적인 증가를 나타내었다. 호중구의 수는 1, 5 및 10%를 주사하였을 때 유의적인 증가를 보였다 (p<0.05). SOD activity는 신장에서는 1, 3 및 5% 시험구에서, 간에서는 1 및 5% 시험구가 대조구에 비해 유의적인 증가를 나타내었다 (p<0.05). NBT 환원 시험은 3 및 5% 시험구에서 높은 NBT 환원량을 나타내었다. 마늘 착즙액의 침지 시험에서는 0.25 g/L 시험구에서 체표 점액 lysozyme 활성과 혈청 lysozyme 활성이 가장 높은 유의적인 증가를 하였다. 림프구와 호중구의 수는 0.25, 0.5 및 1.0 g/L 시험구에서 대조구에 비해 유의적인 증가를 보였다 (p<0.05). SOD activity는 신장에서는 모든 시험구에서, 간에서는 0.1, 0.25 및 0.5 g/L 시험구에서 대조구에 비해 유의적인 증가를 나타내었다 (p<0.05). NBT 환원 시험은 0.1, 0.25 및 0.5% 시험구에서 대조구와 비교하여 유의적인 증가를 나타내었다 (p<0.05). 시험구의 생존율은 S. iniae BS10과 E. tarda KE-1의 공격에 대하여 5% 마늘 추출물 복강 투여와 0.25 g/L 마늘 착즙액 침지 시험구의 상대생존율이 가장 높았다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 마늘 추출물과 착즙액이 넙치에 면역능 향상과 어류 질병에 저항성 증강에 효과가 있는 것으로 사료된다.

• 한국어병학회지
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• 제17권3호
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• pp.171-177
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• 2004

본 연구는 양식 넙치, Paralichthys olivaceus에서 희석 백신의 장시간 처리 효과를 조사하였다. 넙치에 상업용 에드워드 백신 (5㎎/ℓ)을 $10^0$, $10^{-1}$, $10^{-2}$ and $10^{-3}$로 희석하여 2분 (short immersion, SI)과 24시간 (prolonged immersion, PI) 침지한 다음 시험어의 비특이적 면역계 (혈청 라이소자임, 살균능)와 특이적 면역계 (응집항체가)의 활성과 Edwardsiella tarda 공격에 대한 방어력의 변화를 조사하였다. 그 결과 에드와드 백신을 $10^{-1}$과 $10^{-2}$로 희석하여 장시간 침지 투여 시험구가 고농도 백신의 단시간 침지 시험구에 비하여 혈청 라이소자임 활성과 보체의 살균능이 높았으며 에드워드균 감염에 대한 방어력도 높았다. 따라서 희석 백신을 장시간 침지 처리하는 방법은 백신 효과를 높일 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국어병학회지
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• 제7권1호
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• pp.37-46
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• 1994

서해안 일원의 가온 양만장 사육조로부터 분리한 E. tarda균에 대한 약제내성검사 및 내성균의 내성인자 전달 시험을 실시하였다. 공시한 항생제에 대한 내성률은 LM, PM, SD, SF 등에는 100%, AP, CH, SM, OT 및 CP 등에는 89% 이상, OA 및 KM에는 70% 정도 그리고 AK, GM 및 EF 등에는 30% 이하의 내성률을 보였으며, 이와같은 내성률은 각 양만장에서 분리한 균주간에 차이를 보이지 않았다. 내성유형은 총 34유형으로 모든 분리균주가 8~14제의 다제내성을 보였으며, 그 중 LM PM SD SF CP CH SM OT AP OA KM(22주, 21.4%) 및 LM PM SD SF CP CH SM OT AP OA(12주, 11.7%) 유형등이 고빈도로 출현하였다. 내성균의 내성인자 전달유형은 총 55형으로 단제에서 13제까지의 다양한 내성인자가 전달되었는데, 그 중 LM PM SD SF CP CH SM OT AP OA(10주. 10%), LM PM SD SF CP CH SM OT AP OA KM(7주, 7%) 및 LM PM SD SF CP CH AP OA(7주, 7%) 등의 다제내성유형이 고빈도의 전달률을 보였으며, 약재별로는 GM, EF 및 AK 등에는 저빈도(0~20%), OT, SM, KM 및 OA 등에는 중등도(49~62%), AP, PM, LM, SF, CP, CH 및 SD 등에는 고빈도(71~94%)로 내성인자를 전달하였다.

• 한국어병학회지
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• 제25권1호
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• pp.21-30
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• 2012

넙치 사료에 열수 추출한 황금을 0, 0.05, 0.1, 1% 흡습시켜 12주동안 사육하는 동안 어류의 비특이면역의 증진 및 질병저항성에 대한 효과를 알아보았다. 황금을 첨가한 사료에서 성장의 유의적인 증가는 없었으나, 초기 4주간 증가하는 경향은 있었다. 혈액학적인 조사 결과에서도 황금 첨가로 인한 넙치의 생리 생태에 부정적인 영향을 나타내지 않았다. 혈청 및 각 조직의 라이소자임 활성은 0.05%의 황금 농도로 흡습시킨 사료 그룹에서 유의적으로 라이소자임 활성이 증가되었다. 백혈구의 식활성을 측정하였을시에 0.05%의 황금 농도로 흡습시킨 사료 그룹에서 유의적으로 백혈구의 식활성이 증가되었다. 병리조직학적 결과에 따르면 넙치 사료에 열수 추출한 황금을 1% 이상 흡습시켜 투여시에는 간 조직에서 괴사가 진행됨을 알 수 있었다. 어류병원세균의 인위감염에 대한 넙치의 질병저항성은 0.05%의 황금 농도로 흡습시킨 사료 그룹에서 E. tarda (GY-01)균에 대하여 상대생존율이 높게 나타났다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 황금 열수 추출물의 넙치에 대한 면역능 향상과 어류 질병의 저항성 증강에 효과가 있는 것으로 사료되나, 1% 이상 첨가시에는 어류생리학적으로 부정적인 영향이 나타나므로 0.05%이하로 투여하여야 할 것으로 판단되었다.

• 한국어병학회지
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• 제8권2호
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• pp.135-148
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• 1995

경골어류의 질병진행과정에 따른 임파조혈조직내 대식세포의 분포변화 특성을 밝히고자 Edwardsiella tarda균과 그 분비독소인 Extracellula products(ECP)를 각각 진골어류의 일종인 틸라피아에 복강 주사한 후, 임상증상을 발현하지 않은 개체에 대하여 비장 및 두신의 병리조직학적 변화를 경시적으로 조사하였다. E. tarda 생균을 주사 1주일후, 비장에서는 주로 유초동맥을 중심으로, 두신에서는 조혈 조직전반에 걸쳐 대식세포 집단이 출현하였다. 또한 이 집단들은 시간이 경과함에 따라 MMC와 유사한 밀집구조를 이루었고, 1주째에는 이들 응집체가 더욱 치밀해지면서 주위의 실질은 어느 정도 회복경향을 보였다. 대식세포 집단은 2주째가 되면서 대부분 사라졌고, 거의 정상적 조직배열상을 보였다. ECP주사에 의한 비장과 두신의 경시적 조직학적 변화는 생균주사의 경우와 매우 유사하였으나 생균주사의 경우에 비해 대식세포의 응집이 더욱 빠르게 일어났을 뿐 아니라, 주사 후 1시간째의 비장 및 두신조직에서도 유초동맥의 증식비후(비장) 또는 대식세포 집단의 출현(두신)이 인정되었다. 따라서 E. tarda 생균 또는 그 ECP를 틸라피아에 주사했을 경우, 임파조혈조직내의 이와 같은 대식세포 행동특성은 에드워드증(Edwardsiellosis) 또는 기타 감염증의 조기진단을 위한 중요한 병리조직학적 정보로 활용될 수 있을 것으로 사료되었다.