Escherichia coli O157:H7 and Salmonella ser. typhimurium are pathogens involved in food poisoning in numerous countries. This study aimed to obtain knowleges on the survival of E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typhimurium ATCC 14028 in fermentedmilk products which were on sale in Suwon Yakult supplier. To the final concentration of 103~104 cfu/$m\ell$ of E. coli O157:H7 KSC 109 or S. wer. typhimurium ATCC 14028 in the fermented milks, Metchnikoff, Ace, Yakult, Mastoni and Super 100 were inoculated with these pathogens and then were stored at 4$^{\circ}C$ and viable cells of these pathogens were periodically counted. The results showed that the survival of two pathogens differed in the different types of fermented milks tested. Number of suriviving E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typimurium ATCC 14028 cells (initial inoculum, 103~104 cfu/$m\ell$) were decreased to 101, 102 cfu/$m\ell$ in Ace after 100 hours, and were decreased gradually to 101 cfu/$m\ell$ in Yakult after 250 hours. In the other fermented milks, viable cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased but those of S. ser. typhimurium ATCC 14028 was decreased gradually to 102 (Mastoni), and to 101 cfu/$m\ell$ (Super 100) after 250 hours. It appeared that S. ser. typhimurium ATCC 14028 was more susceptible than E. coli O157:H7 KSC 109 at low pH. Vibale cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased in most of fermented milks tested except Ace and Yakult, but in general, S. ser. typhimurium ATCC 14028 was drastically decreased in most of the fermented milks. The major ingibition factor against these pathogens in the fermented milks during storage at 4$^{\circ}C$ appeared to be the acidity and the metabolites produced by the starters bacteria used in fermented milk products.
A sensitive reverse transcriptase-PCR (RT-PCR) method to detect viable Escherichia coli O157:H7 in milk was established. The primer sets were designed based on the nucleotide sequences of the rfbE (per) and wbdN genes in the O157 antigen gene cluster of E. coli O157:H7. RT-PCR using five different primer sets yielded DNA with sizes of 655, 518, 450, and 149-bp, respectively. All five of the E. coli O157:H7 strains were detected by RT-PCR, but 11 other bacterial species were not. The sensitivity of RT-PCR was improved by adding yeast tRNA as a carrier to the crude RNA extract. The RT-PCR amplifying the 149-bp DNA fragment was the most sensitive for detecting E. coli O157:H7 and the most refractory to the bactericidal treatments. Heat treatment at $65^{\circ}C$ for 30 min was the least inhibitory of all bactericidal treatments. Treatment with RNase A strongly inhibited the RT-PCR of heated milk but not unheated milk. This study described RT-PCR methods that are specific and sensitive with a detection limit of 10 E. coli O157:H7 cells, and showed that pre-treating milk samples with RNase A improved the specificity to detect viable bacteria by RT-PCR.
본 연구는 황련, 금은화, 그리고 백작약 등 한약재 복합 추출물의 E. coli O157:H7에 대한 항균효과와, 한약재 복합추출물과 dioctahedral smectite의 합제의 E. coli O157:H7 감염 마우스에 대한 효과를 평가하기 위해 수행되었다. 한약재 복합추출물, CLP1000을 이용하여 E. coli O157:H7에 대한 항균효과 확인 시험을 수행한 결과, CLP1000 10%와 20%를 첨가한 배지에서 E. coli O157:H7의 성장을 각각 30%와 47%를 억제하는 효과가 관찰되었다. 또한, E. coli O157:H7을 김염시킨 마우스에 CLP1000, dioctahedral smectite (DHS), 그리고 CLP1000와 DHS 합제 (CLPS1000)를 각각 7 일 동안 경시별로 마우스 분변 중의 E. coli O157:H7 균수의 변화를 관찰한 결과, 투여 3일째에, 10% CLPS1000을 투여한 군에서 대조군과 비교하여 E. coli O157:H7의 균수가 유의성 있게 감소하였으며(p < 0.05), 투여 7일째에는 10% CLP1000 (p < 0.05)과 10% CLPS1000을 투여한 군에서 대조군과 비교하여 E. coli O157:H7의 균수가 유의성 있게 감소하는 결과를 나타내었다. 따라서 본 연구의 결과로부터, CLPS1000을 E. coli O157:H7에 감염된 마우스에 투여할 경우 감염증상을 완화 시킬 수 있을 것으로 기대된다.
가금류 가공등에서 사용이 허가된 Trisodium Phoshate(TSP)와 구강 청결제로 사용되면서 안전한 물질로 알려진 Cetylpyridinium chloride(CPC)를 이용하여 in vitro에서 E. coli O157:H7 및 Listerial monocytogenes에 대하여 살균작용을 조사하였다. E. coli O157:H7 및 Listerial monocytogenes에 대해서는 TSP는 $1{\times}10^{-2}\;M$ 농도에서} $37^{\circ}C$, 30분간 반응으로 각각 30~40%와 40~50%의 살균효과를 보였으며, CPC는 $5{\times}10^{-7}\;M$ 농도에서 $37^{\circ}C$, 30분간 반응으로 각각 90~95%와 95~99%의 살균효과를 보였다. 또한, TSP와 CPC는 온도와 pH에 따라 E.coli O157:H7 및 Listerial monocytogenes에 대한 살균작용이 영향을 받았는데, 온도가 높을수록 두 물질 모두 그 살균 효과 컸으며, TSP는 pH가 높을수록, CPC는 pH가 낮을수록 살균효과가 컸다. 이러한 결과로 보아 TSP와 CPC도 E. coli O157:H7 및 Listerial monocytogenes의 오염방지를 위하여 사용이 가능할 것으로 본다.
While searching for healthier diets, people became more attentive to agricultural organic products. However, organic foods may be more susceptible to microbiological contamination because of the use of livestock manure compost and liquid manure, potential sources of pathogenic bacteria. This study was undertaken to investigate the persistence of Salmonella enterica, Escherichia coli O157:H7, and Listeria monocytogenes in soil, liquid manure amended soil, and liquid manure. Loamy soil, liquid manure amended soil, and liquid manure were inoculated with S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes. Samples were incubated in consistent moisture content at $25^{\circ}C$. Samples had been periodically collected during 120 days depending on the given conditions. S. enterica and E. coli O157:H7 survived over 120 days in loamy soil and over 60 days in liquid manure amended soil, respectively. L. monocytogenes decreased faster than other pathogens in soil. S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes survived for up to 5 days in liquid manure. S. enterica and E. coli O157:H7 in soil decreased by 2 to $2.5log\;CFU\;g^{-1}$ for 120 days. S. enterica and E. coli O157:H7 in liquid manure amended soil decreased slowly for 21 days. However, S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes sharply decreased after 21 days. S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes in soil increased by 0.5 to $1.0log\;CFU\;g^{-1}$ for 7 days. Foodborne pathogens in soil and liquid manure amended soil gradually decreased over time.
Kim, Eun-Jin;Chang, Hyun-Joo;Kwak, Soojin;Park, Jong-Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권12호
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pp.2060-2065
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2016
Characteristics of E. coli O157:H7-specific infection bacteriophages (O157 coliphages) and broad-host-range bacteriophages for other E. coli serotypes (broad-host coliphages) were compared. The burst sizes of the two groups ranged from 40 to 176 PFU/infected cell. Distributions of the virulence factors stx1, stx2, ehxA, and saa between the two groups were not differentiated. Broad-host-range coliphages showed lower stability at $70^{\circ}C$, in relation to O157 coliphages. However, O157 coliphages showed high acid and ethanol tolerance by reduction of only 22% and 11% phages, respectively, under pH 3 and 70% ethanol for 1 h exposure. Therefore, these results revealed that the O157 coliphages might be more stable under harsh environments, which might explain their effective infection of the acid-tolerant E. coli O157:H7.
Kim, Giyoung;Moon, Ji-Hea;Park, Saet Byeol;Jang, Youn-Jung;Lim, Jongguk;Mo, Changyeun
Journal of Biosystems Engineering
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제38권4호
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pp.335-340
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2013
Purpose: This study was performed to develop a lateral flow strip sensor for the detection of pathogenic Escherichia coli O157:H7 in various samples. Also, feasibility of using an image analysis method to improve the interpretation of the strip sensor was evaluated. Methods: The lateral flow strip sensor has been fabricated based on nitrocellulose lateral-flow membrane. Colloidal gold and E. coli O157:H7 antibodies were used as a tag and a receptor, respectively. Manually spotted E. coli O157:H7 antibody and anti-mouse antibody on nitrocellulose membrane were used as test and control dots, respectively. Feasibility of the lateral flow strip sensor to detect E. coli O157:H7 were evaluated with serially diluted E. coli O157:H7 cells in PBS or food samples. Test results of the lateral flow strip sensor were measured with an image analysis method. Results: The intensity of the test dot started to increase with higher concentration of the cells were introduced. The sensitivities of the sensor were both $10^4$ CFU/mL Escherichia coli O157:H7 spiked in PBS and in chicken meat extract, respectively. Conclusions: The lateral flow strip sensor and image analysis method could detect E. coli O157:H7 in 20 min, which is significantly quicker than conventional plate counting method.
본 연구는 황련, 감초, 오미자 그리고 산수유 한약재 복합추출물의 $E.$$coli$ O157:H7에 대한 항균효과와, 한약재 복합추출물과 염소산나트륨 합제의 $E.$$coli$ O157:H7 감염 마우스에 대한 항균효과를 평가하기 위해 수행되었다. 한약재 복합추출물, CGSC10을 이용하여 $E.$$coli$ O157:H7에 대한 항균효과 확인 시험을 수행한 결과, CGSC10 5, 10, 그리고 20%를 첨가한 배지에서 30시간 동안 배양한 후, $E.$$coli$ O157:H7의 성장이 각각 34.7, 60.2, 그리고 76.4% 억제되는 효과가 관찰되었다. 또한, $E.$$coli$ O157:H7을 감염시킨 마우스에 CGSC10, 염소산나트륨, 그리고 CGSC10와 염소산나트륨 합제(CGSCS10)를 음용수를 통해 투여한 결과, 투여 3일째부터, 모든 투여군에서 대조군과 비교하여 $E.$$coli$ O157:H7의 균수가 유의성 있게 감소하였으며($p$ < 0.001), 투여 7일째에는, 10% CGSC10, 15mM 염소산나트륨, 그리고 CGSCS10을 투여한 군에서 대조군과 비교하여 $E.$$coli$ O157:H7의 균수가 각각 27.1, 67.7, 그리고 83.3% 정도 감소하는 결과를 나타내었다. 따라서 본 연구의 결과로부터, CGSCS10을 $E.$$coli$ O157:H7에 감염된 마우스에 음수로 투여할 경우, 감염증상을 완화 시킬 수 있을 것으로 기대된다.
Inhibitory effect of Escherichia coli O157 adhered to Caco-2 cells by the cells of Lactobacillus plantarum K11 and the cell-free culture supernatant (CFCS) and bacteriocin prepared from this strain was investigated. As the cell counts of viable L. plantarum K11 previously adhered to Caco-2 were increased, the rate of adhesion and adherent cell counts of E. coli O157 was lower. However, because the heated L. plantarum K11 rarely have the adhesion ability to Caco-2, the adhesion rate and adherent cell counts of E. coli O157 were high. In addition, the inhibitory effects of E. coli O157 adhesion by the CFCS and bacteriocin of L. plantarum K11 were dose-dependent manner. Therefore, the inhibition of adhesion of E. coli O157 to Caco-2 may result from the antimicrobial substances such as lactic acid and bacteriocin. Moreover the inhibitory activity of adhesion by the heated bacteriocin for 30 min at 100oC was similar to activity of non-treated bacteriocin, but the activity was disappeared by treatment with protease.
본 연구는 병원성 Escherichia coli O157:H7 균주에 의한 식중독을 미연에 예방하고자 우육에 본 균주를 오염, 동결시켜 전자선에 의한 살균효과를 조사하였다. $37^{\circ}C$에서는 배양 16시간째에 최대균수를 나타내었고 $4^{\circ}C$에서는 균주의 증식이 거의 없었다. E. coli O157:H7 균주는 대수기나 정지기 모두가 $0^{\circ}C$ (chilled)와 $-18^{\circ}C$ (frozen)에서 배양시 약 $10^{7}\;CFU/mL$의 균수를 나타내었고 $-18^{\circ}C$에서는 $20^{\circ}C$ 보다 균주의 사멸율이 높았다. 동결육에 오염된 E. coli O157:H7 균주의 방사선 감수성은 $D_{(10)}$ 값이 0.45 kGy, 불활성화계수가 $3{\sim}5\;kGy$에서 $6.67{\sim}11.11$로 각각 나타났다. 본 결과로서 전자선 조사는 동결육에 오염된 E. coli O157:H7 균주의 제거방법으로 매우 효과가 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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