The application of plant-growth-promoting rhizobacteria (PGPR) supports the growth of plants in contaminated soil while ureolytic bacteria can immobilise heavy metals by carbonate precipitation. Thus, dual treatment with such bacteria may be beneficial for plant growth and bioremediation in contaminated soil. This study aimed to determine whether the PGPR Pseudomonas fluorescens could work in synergy with ureolytic bacteria to assist with the remediation of cadmium (Cd)- and lead (Pb)-contaminated soils. Pot experiments were conducted to grow radish plants in Cd- and Pb-contaminated soils treated with PGPR P. fluorescens and the results were compared with dual inoculation of P. fluorescens combined with ureolytic Staphylococcus epidermidis HJ2. The removal rate of the metals from the soil was more than 83% for Cd and Pb by the combined treatment compared to 17% by PGPR alone. Further, the dual treatment reduced the metal accumulation in the roots by more than 80%. The translocation factors for Cd and Pb in plant tissues in both treatments remained the same, suggesting that PGPR combined with the carbonate precipitation process does not hamper the transfer of essential metal ions into plant tissues from the soil.
The dual inoculation response of soybean with rhizobium and mycorrhiza was examined in pot vermiculite and field soils. In order to select a symbiotically compatible mycorrhiza with Bradyrhizobium japonicum, a highly germinating spore among 60 strains from 32 upland soils in southern part of Korea was obtained in Acaulospora sp., Gigaspora sp. and Glomus sp., respectively. As a result of dual inoculation of Glycin max cv. Dajangkong and Eunhakong both with $1{\times}10^8$cells of B. japonicum YCK 213 and 10 spores of each mycorrhiza in vermiculite pot, only Glomus sp. treatment together with the rhizobium showed significant increase ($P{\leqq}0.05$) both in shoot dry wt and nodule mass of not Eunhakong but Dajangkong. In red-yellow soils with pH 5.2($1:5H_2O$) and 203 mg of Lancaster P per kg of soil, in which $10^3$ cells of B. japonicum and $10{\pm}0.2$ spores of mycorrhizae per gram of soil were naturalized, grain yield of G. max cv. Dajangkong was increased to 3.9% by dual inoculation both of $4.8{\times}10^6$cells of B. japonicum and 10 spores of mycorrhizae per two seeds under condition applied with 30 kg $P_2O_5$ and 34 kg $K_2O$ per hectare compared to conventionally fertilized plot (2.75 MT $ha^{-1}$) added with 30 kg N $ha^{-1}$. However, there was not significant.
To screen antagonistic fungi against plant pathogens, dual culture assay (DCA) and culture filtrate assay (CFA) were performed with unknown soil-born fungi. Among the different fungi isolated and screened from the soil, fungal isolate ANU-301 successfully inhibited growth of different plant pathogenic fungi, Colletotrichum acutatum, Alternaria alternata, and Fusarium oxysporum, in DCA and CFA. Morphological characteristics and rDNA internal transcribed spacer sequence analysis identified ANU-301 as Aspergillus terreus. Inoculation of tomato plants with Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL) induced severe wilting symptom; however, co-inoculation with ANU-301 significantly enhanced resistance of tomato plants against FOL. In addition, culture filtrate (CF) of ANU-301 not only showed bacterial growth inhibition activity against Dickeya chrysanthemi (Dc), but also demonstrated protective effect in potato tuber against soft rot disease. Gas chromatography-tandem mass spectrometry analysis of CF of ANU-301 identified 2,4-bis(1-methyl-1-phenylethyl)-phenol (MPP) as the most abundant compound. MPP inhibited growth of Dc, but not of FOL, in a dose-dependent manner, and protected potato tuber from the soft rot disease induced by Dc. In conclusion, Aspergillus terreus ANU-301 could be used and further tested as a potential biological control agent.
A severe Phytophthora rot of strawberry caused by a species of Phytophthora has been widely occurred at major cultivation areas of Kimhae on August in 1997. Incidence of the disease was obtained in the range of 69.2~83.6% in surveyed 4 fields and showed an average of 75.2%. A species of Phytophthora was mostly isolated from the crown of infected strawberry plants and all the isolates were identified as P. nicotianae var. nicotianae (=P. parasitica). The fungus showed strong pathogenicity on strawberry by inoculation test. As a result of the leaf inoculation using mycelial disks of the fungus, both leaves and petioles were darkly browned, and were finally blighted. As a result of the root inoculation of zoospore suspension, both roots and crowns were rotten with dark brown. Although the fungus produced sporangia either on V-8 juice agar medium or liquid medium, the sporangia observed on the liquid medium appeared to be broadly turbinate and noncaducous. Moreover the fungus cultured on the liquid medium often produced sporangia having two papilla. The number of zoospores in sporangia was found to be ranged from 3 or 4 to as many as 20 or 25. In addition, the released zoospore from the sporangium became the cystospore during the prolonged culture of the fungus. The sporangia were measured as av. 49$\times$35 ${\mu}{\textrm}{m}$ with l/b ratio of 1.43. All isolates from crowns were heterothallic and A1 mating type since oospores were abundantly formed on clarified V-8 juice agar by dual culture with P. capsici A2 mating type. Aplerotic oospores were sized 24-26 ${\mu}{\textrm}{m}$. Antheridia were always amphigynous and recoreded an average of 12$\times$10 ${\mu}{\textrm}{m}$. Hyphal swlling were easily observed, and terminal or intercalary chlamydospores were abundantly formed on V-8 juice agar as well as in C/Z solution and sized av. 28.2 ${\mu}{\textrm}{m}$. This is the first report of Phytophthora rot of strawberry in Korea.
This study was performed to investigate the effects of adding a dual starter on the chemical and sensory characteristics of red wine made of Campbell Early grape. The yeast starter, Saccharomyces cerevisiae, and lactic acid bacteria (LAB) starter, Oenococcus oeni, were used for inoculation in the winemaking process for alcoholic fermentation and malolactic fermentation (MLF), respectively. After 200 days of incubation, the chemical compositions of yeast/LAB-added wine (YL-wine) were compared with those of no-starter-added wine (control) and yeast-added wine (Y-wine). The results show that no significant differences were observed in pH, total sugar, and alcohol content among the wine samples, but the malic acid content in YL-wine was significantly reduced, and various esters and higher alcohols were synthesized. The sensory test revealed that the addition of dual starters resulted in improved overall acceptability in wine. This study emphasizes the importance of O. oeni in addition to yeast in making Campbell Early wine.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.41
no.3
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pp.176-182
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2021
Ensiling is the most preferred technology to preserve the silage quality with high nutrients by the presence of lactic acid bacteria. In this study, lactic acid bacteria RJ1 and S22 were used to make the silages from different leguminous plants such as alfalfa, hairy vetch and red clover. Experimental groups were divided into control and LAB inoculated groups. LAB inoculated group; all legumes treated with a mixture of RJ1 and S22 and made an anaerobic condition for 45d. Without the addition of LAB considered the control group. The results showed that the lactic acid content was higher in all silages in response to LAB treatment and acetic acid content was slightly increased except red clover by LAB compared to control silages. A poor silage quality marker butyric acid was reduced all legume silages in response to LAB inoculation than control silages. The organic acid is closely associated with microbial population experimental silages. We noted that higher LAB and lower yeast were found in the silage in response to LAB treatment. The contents of crude protein (CP), acid detergent fiber (ADF), neutral detergent fiber (NDF), and total digestible nutrient (TDN) were not altered significantly between control and LAB treated silages. Overall data suggested that the inclusion of additional LAB potentially enhance the silage quality and preserved the nutrients for long period.
Citrus melanose is one of important disease in citrus cultivation, reducing quality of citrus fruits and resulting in economic loss. Like other diseases in citrus, melanose was mainly protected by chemical fungicide in the field. Recently, alternative method of disease control is highly required due to the side effect of the chemicals. In this study four rhizobacterial strains TRH423-3, MRL408-3, THJ609-3, and TRH415-2 are selected by dual-culture testing its antifungal activity against Diaporthe citri causing citrus melanose. To investigate the protection efficacy of the selected rhizobacterial strains to citrus melanose, the bacteria were pre-treated on citrus leaves following inoculation with melanose pathogen. Pre-treatment with all selected rhizobacterial strains showed disease suppression in which the levels of protection rates were different by the rhizobacterial strains. Additional treatment with the rhizobacterial strains after the pathogen inoculation enhanced protection rates in all cases. The strain MRL408-3 and TRH423-3 were identified as Burkholderia gladioli, TRH415-2 as Pseudomons fluorescens and THJ609-3 as Pseudomonas pudia as a result of analyzing the internal transcript spaces of the rhizobacterial strains rDNA. The selected rhizobacterial strains may be valuable as biological control agents in the environment-friendly citrus farm in which chemical application is limited.
Mass culturing of two beneficial organisms used as biofertilizers for crops would reduce the risks in production and minimize the capital involved and this demands appropriate media that supports both organism and also selection of organisms that are not antagonistic to each other. A study was initiated to culture a nitrogen fixer (Rhizobium) and phosphate solubilizer (Bacillus megaterium) in a single medium and to study their growth patterns and shelf life in carrier. The growth of Rhizobium and Bacillus megaterium was assessed in different media and a slight modification in the traditional yeast extract mannitol media promoted the growth of both the organisms. The growth of the individual organisms in the modified medium was assessed by estimating the population at regular intervals and compared to their original medium. Maximum population of Rhizobium and phosphobacteria was at 60 hr when the phosphiobacteria inoculation of later was after 48 hr of Rhizobium inoculation. The shelf life of the individual inoculants in the inoculant containing both the organism in a sterile carrier base revealed no significant differences compared to individual organisms inoculated in a sterilized carrier. The population of both organisms in carrier based mixed inoculant remained at $10^8$ cells till 90 days.
Unfortunately, there is no technique which is stable and repetitive to produce transgenic chicken, although various ways of gene transfer including PGC-and embryonic cell-mediated gene transfer, DNA microinjection, virus inoculation and sperm cells have been employed. The aims of this study were 세 develop and establish such a stable, repetitive and efficient way of gene transfer giving a faithful gene expression during development after the reconstruction of embryo in an UV-irradiated egg. A dual reporter plasmid (pJJ9), a fusion gene containing lacZ and GFP driven by a CMV promoter was used to exploit either merits of both reporting markers. lacZ with strong signal or GFP with vital marking. Electroporated embryonic blastodermal cells (EBCs) in the presence of the pJJ9 DNA faithfully showed 377 bp PCR product and lacZ or GFP expressions in the identical cells in vitro of in vivo. Furthermore, analyses of expression pattern of the foreign DNA demonstrated that microinjected EBCs cells into the UV-irradiated recipient egg should participate in normal developmental process, for example, proliferation and differentiation into various tissues. Thirty percentages of the manipulated eggs showed lacZ expression in their tissues. These results together with the specific procedures used in this study should facilitate avian transgenesis.
Stem rots caused by Rhizoctonia solani and Sclerotinia sclerotiorum have been known as devastating diseases in balloon flower plants. Antifungal activities of four fungicides, azoxystrobin, polyoxin B, trifloxystrobin and validamycin A were evaluated in vitro, showing effective suppression with mycelial growth of the fungal isolates on PDA media. Efficacies of the four fungicides were also demonstrated in stem tissues of balloon flower plants against R. solani and S. sclerotiorum. A commercially available Bacillus subtilis strain Y1336 was tested in terms of antagonistic biological control of stem rot disease of balloon flower plants. The bacterial strain revealed its antifungal activities against R. solani and S. sclerotiorum demonstrated by dual culture tests using paper discs and two plant pathogenic fungi on PDA media, as well as by plant inoculation assay, indicating that this antagonistic bacterial strain can be incorporated into disease management program for balloon flower stem rot diseases together with the four chemical fungicides.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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