• 제목/요약/키워드: DsRed2

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피브로인 H-chain 재조합 단백질 발현시스템을 이용한 녹색형광실크 생산 (Production of fluorescent green silk using fibroin H-chain expression system)

  • 김성완;윤은영;최광호;김성렬;박승원;강석우;구태원
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제51권2호
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    • pp.153-158
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    • 2013
  • 본 연구의 목적은 누에형질전환 기술을 이용하여 녹색형광실크를 개발하는 것으로서, 본 실험에서는 피브로인 H-chain의 N-말단과 C-말단을 이용하여 피브로인 재조합 단백질 발현 시스템을 제작하였고, 종결코돈이 없는 EGFP 유전자를 위의 발현 시스템에 클로닝하여 녹색형광실크를 제작하였다. 누에형질전환체 선발을 위해서는 3xP3 promoter와 DsRed2를 이용하여 선발하였고, 1200 개의 누에알에 microinjection 하여 F1 세대에서 8 bloods의 형질전환체를 선발하였다. 선발된 누에형질전환체는 초기배 단계의 눈과 신경조직, 유충과 번데기 그리고 성충의 눈에서 DsRed2 형광단백질이 발현되는 것을 확인 할 수 있었다. 또한 실크의 피브로인에서 EGFP 단백질이 발현되는 것을 확인하기 위해, F2세대의 누에형질전환체 중에서 5령 3일 유충을 해부하여 견사선을 형광현미경으로 관찰하였고, 중부와 후부 견사선에서 형광단백질이 발현되는 것을 확인할 수 있었다. 그리고 F2 세대의 고치와 저온에서 정련한 실크에서도 녹색형광단백질의 발현을 확인할 수 있었고, Western blot 분석에서도 EGFP 재조합 단백질이 피브로인 H-chain과 융합된 형태로 존재하는 것이 확인되었다. 이상의 결과에서 녹색형광실크를 생산하는 누에형질전환체가 성공적으로 제작 되었음을 확인할 수 있었고 이러한 결과를 토대로 새로운 산업소재로서 실크를 활용할 수 있을 것으로 기대한다.

피브로인 H-chain 재조합 단백질 발현시스템을 이용한 청색형광단백질의 발현 (Expression of the blue fluorescent protein in fibroin H-chain of transgenic silkworm)

  • 김성완;윤은영;최광호;김성렬;박승원;강석우;구태원
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제52권1호
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    • pp.25-32
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    • 2014
  • 본 연구의 목적은 누에형질전환 기술과 피브로인 재조합단백질 발현시스템을 이용하여 청색형광실크를 개발하는 것으로서, 본 실험에서는 피브로인 H-chain의 N-말단과 C-말단을 이용하여 피브로인 재조합단백질 발현 시스템을 제작하였고, 종결코돈이 없는 EBFP 유전자를 위의 발현 시스템에 클로닝하여 청색형광실크를 제작하였다. 누에형질전환체 선발을 위해서는 $3{\times}P3$ promoter와 DsRed2를 이용하여 선발하였고, 300개의 누에알에 microinjection하여 F1 세대에서 5 bloods의 형질전환체를 선발하였다. 선발된 누에형질전환체는 초기배 단계의 눈과 신경조직, 유충과 번데기 그리고 성충의 눈에서 DsRed2 형광단백질이 발현되는 것을 확인할 수 있었다. 또한 실크의 피브로인에서 EGFP 단백질이 발현되는 것을 확인하기 위해, F2 세대의 누에형질전환체 중에서 5령 3일 유충을 해부하여 견사선을 형광현미경으로 관찰하였고, 중부 견사선에서 청색형광단백질이 발현되는 것을 확인할 수 있었다. 또한 F2 세대의 고치와 저온에서 정련한 실크에서도 청색형광단백질의 발현을 확인할 수 있었고, Western blot 분석에서도 EBFP 재조합 단백질이 피브로인 H-chain과 융합된 형태로 존재하는 것이 확인되었다. 이상의 결과에서 청색형광실크를 생산하는 누에형질전환체가 성공적으로 제작되었음을 확인할 수 있었고 이러한 결과를 토대로 새로운 산업소재로서 실크를 활용할 수 있을 것으로 기대한다.

Fructose-arginine, a non-saponin molecule of Korean Red Ginseng, attenuates AIM2 inflammasome activation

  • Ahn, Huijeong;Han, Byung-Cheol;Lee, Seung-Ho;Lee, Geun-Shik
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제44권6호
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    • pp.808-814
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    • 2020
  • Background: Korean Red Ginseng extract (RGE) has been reported to act as an inflammasome modulator. Ginsenosides, saponin molecules of RGE, selectively inhibit activation of NLRP3 and AIM2 inflammasomes, while non-saponin molecules of RGE upregulate inflammasome components associated with the initiation of NLRP3 inflammasome activation. In this study, we investigated the effect of non-saponin components of RGE on AIM2 inflammasome activation. Methods: The role of non-saponins of RGE on AIM2 inflammasomes was tested in mouse bone marrow-derived macrophages, a human monocyte-like cell line, and a mouse animal model. Cells or mice were transfected with dsDNA or inoculated with Listeria monocytogenes to activate AIM2 inflammasomes. Several indices of inflammasome activation were examined via immunoblot or ELISA analysis. Results: The non-saponin fraction and saponin-eliminating fraction (SEF) of RGE selectively attenuated the activation of AIM2 inflammasomes, but not that of NLRP3 or NLRC4 inflammasomes. Fructose-arginine, an amino-sugar, was shown to be effective against AIM2 inflammasome activation. Conclusion: Non-saponins of RGE, such as fructose-arginine, might be effective in regulating infectious and autoimmune diseases resulting from AIM2 inflammasome activation.

시판 고춧가루의 품질 특성에 관한 연구 (A Study on the Quality of Commercial Red Pepper Powder)

  • 황성연;안영훈;신길만
    • 한국식품영양학회지
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    • 제14권5호
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    • pp.418-422
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    • 2001
  • 시판되는 4개 사 고춧가루를 구입하여 고춧가루의 품질에 관한 이화학적 특성을 비교 분석하였다. 고춧가루 선호도를 결정하는 것은 색상인데 C사 제품의 L값이 46.667로 가장 높았으며 a, b값도 22.738과 19.941로 제일 높게 나왔다. 고추의 적색소인 capsanthin은 D사가 80.0mg/100g으로 가장 많았으며 A, C, B사가 각각 75.0, 58.9, 51.0mg/100g 순이었고 ASTA color 도 같은 경 향을 보였다. Capsanthin 양과는 달리 L, a, b값 모두 C사가 제일 높게 나왔는데 이는 고춧가루의 입도에 의한 영향 때문으로 여겨진다 각 고춧가루의 pH 차이는 크지 않았으며 유기산은 A, B, D사 제품에서 quinic acid가 가장 많이 검출되었으며 C사 제품은citric acid가 가장 높게 검출되었다. 신미성분 가운데 capsaicin은 D사가 59.93mg/100g으로 가장 많았으며 B사가 25.87mg/100g으로 제일 적었으며 capsaicinoids는 각각 62.93, 28.20mg/100g로 나타나 2배 이상의 차이를 보였다. 미생물의 발생 가능성을 추정할 수 있는 수분활성 도는 A, B, C, D사가 각각 0.584, 0.676, 0.526 및 0.568 로 나타나 A, C, D사 제품은 문제가 없을 것으로 예측되나 B사 제품의 수분활성도가 0.676으로 곰팡이 발생 우려가 있을 것으로 예측되었다.

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다운증후군 환자의 치주질환 원인균의 출현율 (PERIODONTOPATHIC BACTERIA IN DOWN'S SYNDROME)

  • 김선미;양규호;최남기;오종석;강미선
    • 대한소아치과학회지
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    • 제32권4호
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    • pp.717-725
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    • 2005
  • 다운증후군 환자는 치주질환의 진행이 빠르고 치주조직의 파괴가 심하다. 다운증후군 환자의 치주질환 원인균의 출현율을 알아보고자 $7{\sim}19$세 다운증후군 환자 27명과 대조군으로 나이가 비슷한 정신지체자 27명을 대상으로 치태지수와 치은염 정도를 나타내는 치은지수를 측정하고 치은연하 치태에 존재하는 P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola, F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans균을 중합효소연쇄반응을 이용, 검사하고 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 다운증후군 환자와 대조군의 치태지수와 치은지수간에 통계적 유의성은 없었다(p>0.05). 2. 다운증후군 환자에서 F. nucleatum의 출현율이 96.3%로 가장 높았으며 그 다음이 T. forsythia 74.1%, P. gingivalis는 63.0%였으며 A. actinomycetemcomitans는 55.6%, T. denticola는 40.7%로 출현하였다. 정신지체자는 다운증후군 환자와 비슷한 순서로 치주질환 원인균이 출현하였다. 다운증후군 환자가 대조군에 비해 T. denticola를 제외한 4종의 균에서 높은 비율로 나타났으나 치주질환 원인균 출현율에서 유의한 차이를 나타내지 않았다(p>0.05). 3. 연령에 따른 연구에서 $7{\sim}10$세군에서 다운증후군환자의 P. gingivalis는 16.7%로 낮은 출현율을 보였으나 연령의 증가에 따라 출현율이 평균 53.0%로 높아졌다. 반면 A. actinomycetemcomitans균은 $7{\sim}10$세군부터 83.3%로 높은 비율을 보였다(p<0.05) 같은 연령대에서 다운증후군 환자는 대조군에 비해 치주질환 원인균의 출현율이 더 높은 경향을 보였으나 A. actinomycetemcomitans를 제외하고는 통계적인 유의차를 보이지 않았다(P>0.05). 4. P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola가 함께 나타난 경우는 다운증후군 환자와 대조군 모두 33%를 나타내었다. red complex에 A. actinomycetem comitanstans까지가 나타난 경우는 다운증후군 환자에서 22%, 대조군에서 14%로 다운증후군 환자에서 더 높았다. 이상의 결과를 요약해보면 다운증후군 환자군과 정신지체자 대조군 모두에서 치주질환 원인균이 어린 시기부터 매우 높게 출현하였으나 전체적인 두 군간 치태지수, 치은지수. 치주질환 원인균 출현율에서 유의한 차이를 나타내지 않았다. 하지만 A. actinomycetem comitans균은 $7{\sim}10$세군 다운증후군 환자에서 대조군에 비해 높은 비율을 보였다.

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Establishment of In Vitro Test System for the Evaluation of the Estrogenic Activities of Natural Products

  • Kim, Ok-Soo;Choi, Jung-Hye;Soung, Young-Hwa;Lee, Seon-Hee;Lee, Jae-Hwa;Ha, Jong-Myung;Ha, Bae-Jin;Heo, Moon-Soo;Lee, Sang-Hyeon
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제27권9호
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    • pp.906-911
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    • 2004
  • In order to evaluate estrogenic compounds in natural products, an in vitro detection system was established. For this system, the human breast cancer cell line MCF7 was stably trans-fected using an estrogen responsive chloramphenicol acetyltransferase (CAT) reporter plas-mid yielding MCF7/pDsCAT-ERE119-Ad2MLP cells. To test the estrogenic responsiveness of this in vitro assay system, MCF7/pDsCAT-ERE119-Ad2MLP cells were treated with various concentrations of 17f3-estradiol. Treatments of 10$^{-8}$ to 10$^{-12}$ M 17$\beta$-estradiol revealed significant concentration dependent estrogenic activities compared with ethanol. We used in vitro assay system to detect estrogenic effects in Puerariae radix and Ginseng radix Rubra extracts. Treat-ment of 500 and 50 $\mu\textrm{g}$/ml of Puerariae radix extracts increased the transcriptional activity approximately 4- and 1.5-fold, respectively, compared with the ethanol treatment. Treatment of 500, 50, and 5 $\mu\textrm{g}$/ml of Ginseng radix Rubra extracts increased the transcriptional activity approximately 3.2-,2.7, and 1.4-fold, respectively, compared with the ethanol treatment. These observations suggest that Puerariae radix and Ginseng radix Rubra extracts have effective estrogenic actions and that they could be developed as estrogenic supplements.

Anti-Obesity Effect of Lactobacillus acidophilus DS0079 (YBS1) by Inhibition of Adipocyte Differentiation through Regulation of p38 MAPK/PPARγ Signaling

  • Youri Lee;Navid Iqbal;Mi-Hwa Lee;Doo-Sang Park;Yong-Sik Kim
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제34권5호
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    • pp.1073-1081
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    • 2024
  • Obesity is spawned by an inequality between the portion of energy consumed and the quantity of energy expended. Disease entities such as cardiovascular disease, arteriosclerosis, hypertension, and cancer, which are correlated with obesity, influence society and the economy. Suppression of adipogenesis, the process of white adipocyte generation, remains a promising approach for treating obesity. Oil Red O staining was used to differentiate 3T3-L1 cells for screening 20 distinct Lactobacillus species. Among these, Lactobacillus acidophilus DS0079, referred to as YBS1, was selected for further study. YBS1 therapy decreased 3T3-L1 cell development. Triglyceride accumulation and mRNA expression of the primary adipogenic marker, peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ), including its downstream target genes, adipocyte fatty acid binding protein 4 and adiponectin, were almost eliminated. YBS1 inhibited adipocyte differentiation at the early stage (days 0-2), but no significant difference was noted between the mid-stage (days 2-4) and late-stage (days 4-6) development. YBS1 stimulated the activation of p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK) during the early stages of adipogenesis; however, this effect was eliminated by the SB203580 inhibitor. The data showed that YBS1 administration inhibited the initial development of adipocytes via stimulation of the p38 MAPK signaling pathway, which in turn controlled PPARγ expression. In summary, YBS1 has potential efficacy as an anti-obesity supplement and requires further exploration.

염류수준별 고추 생육과 수량에 미치는 식물생육보진미생물(植物生育保進微生物) 접종효과 (Effect of Plant-Growth-Promoting-Bacterial Inoculation on the Growth and Yield of Red Pepper(Capsicum annuum L.) with Different Soil Electrical Conductivity Level)

  • 이영한;양민석;윤한대
    • 한국토양비료학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.396-402
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    • 1996
  • 식물생육촉진 유용미생물을 지리산 일대의 침엽수와 활엽수 밑의 부엽토(腐葉土)에서 선발하고, 고추에 접종하였을때 고추 묘소질과 생육 및 수량에 미치는 영향에 대한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 혼합배양결과 Pseudomonas P배지는 $25^{\circ}C$에 Micrococcus sp., Enterobacter agglomerans, Pseudomonas putida, Pseudomonas fluorescens등 4균주, Sabouraud dextrose배지에서는 $35^{\circ}C$에서 Bacillus subtilis, Cellulomonas sp., Bacillus megaterium, Staphylococcus xylosus등 4균주의 생육이 양호하였다. 2. 혼합균주 처리구는 무처리구에 비해 초장, 분지수등은 증가하였고, EC 수준이 높아질수록 초장은 작아진 반면, 분지수는 혼합균주 처리 58일(日) 이후 EC 2.9ds/m에 비해 EC 8.6 dS/m에서 많아지는 경향이었다. 수량은 혼합균주 처리구가 무처리구에 비해 13% 증수되었고, EC 수준이 높아질수록 감소하는 경향이었다. 3. 시험후 토양의 EC, $P_2O_5$, K, Ca, Mg, $NO_3-N$은 EC 수준이 높아질수록 현저하게 증가하는 경향이었으며, 혼합균주 처리구는 무처리구에 비해 OM 및 $NH_4{^+}-N$은 낮은 반면, EC, $P_2O_5$, K, Ca, Mg, $NO_3-N$은 높은 경향이었다. 4. 시험후 혼합균주 처리구는 무처리구에 비해 수분율이 높은 경향이었으며, EC 수준이 높아 질수록 가밀도 수분율, 공극율 등은 증가하는 경향이었다. 5. 혼합균주 처리구는 무처리구에 비해 과실과 엽에서 T-N, $P_2O_5$, $K_2O$, CaO, MgO함량이 높았으며, EC 수준이 높아질수록 $P_2O_5$, $K_2O$, MgO 함량은 증가한 반면, CaO 함량은 낮아지는 경향이었다.

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인삼전지의 토양특성이 인삼의 생육및 수량에 미치는 영향에 관한 연구 (Influence of Various Soil CharacteriBtics in GinBeng Field or the Growth and the Yield of Ginseng (Panax gisoseng C. A. Meyer))

  • 이일호;육창수;한강완;박찬수;박현석;남기열
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제4권2호
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    • pp.175-185
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    • 1980
  • A study was made to clarify the topographical. and Physical characteristics of ginseng field in terms of soil science and to find the relationship between soil characteristics and ginseng growth, as well as yield of ginseng roots Forty nine farmer's red ginseng field of ginseng growing area were chosen for this study and investigated for two years. The results obtained were as follow. 1. Ginseng fie1ds with high yield which represent the more than 1.8kg of ginseng root per 3.2m2 were found in soil series of Bancheon, Yeongog, Weongog, etc. whose texture were the clay loam to clay soil. On the other hand, ginseng field with low yield were observed in soil series of seogto whose texture was loamy soil with high content of gravels. 2 Soil of ginseng field with high yield had higher content of clay. silt soil moisture and soil pore as compared with soils of low yields. These soil characteristics were positively correlated with stem length stem diameter and root weight of ginseng plsnt and negatively correlated with rate of missing plant 3. The adequate ranges of soil 3 phase from high yield ginseng field were 40 to 50% of solid Phase, 22 to 35% of liquid phase, 25 to 35% of gaseous phase in top soil and 45 to 55% of solid phase. 28 to 30% of liquid phase. 15 to 20% of gaseous phase in subsoil respectively.

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A New-Generation Fluorescent-Based Metal Sensor - iLOV Protein

  • Ravikumar, Yuvaraj;Nadarajan, Saravanan Prabhu;Lee, Chong-Soon;Rhee, Jin-Kyu;Yun, Hyungdon
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제25권4호
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    • pp.503-510
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    • 2015
  • The iLOV protein belongs to a family of blue-light photoreceptor proteins containing a light-oxygen-voltage sensing domain with a noncovalently bound flavin mononucleotide (FMN) as its chromophore. Owing to advantages such as its small size, oxygen-independent nature, and pH stability, iLOV is an ideal candidate over other reporter fluorescent proteins such as GFP and DsRed. Here, for the first time, we describe the feasibility of applying LOV domain-based fluorescent iLOV as a metal sensor by measuring the fluorescence quenching of a protein with respect to the concentration of metal ions. In the present study, we demonstrated the inherent copper sensing property of the iLOV protein and identified the possible amino acids responsible for metal binding. The fluorescence quenching upon exposure to Cu2+ was highly sensitive and exhibited reversibility upon the addition of the metal chelator EDTA. The copper binding constant was found to be 4.72 ± 0.84 µM. In addition, Cu2+-bound iLOV showed high fluorescence quenching at near physiological pH. Further computational analysis yielded a better insight into understanding the possible amino acids responsible for Cu2+ binding with the iLOV protein.