본 연구는 돼지에 있어서 정원줄기세포를 포함하는 정소세포를 recipient 돼지의 정소 내로 이식할 수 있는 기법을 개발하기 위하여 시행되었다. 공여세포는 $10{\sim}14$일령의 돼지로부터 채취된 정소에서 효소처리법을 이용하여 회수하였고, recipient의 정소 내로 이식하기 전 형광 마커(PHK26)로 표지하였다. 외과적 수술을 통하여 recipient 돼지부터 정소를 꺼낸 후 초음파 기기와 이식 장치를 이용하여 형광표지된 공여세포를 recipient 정소의 세정관 내로 이식하였다. 14주령의 recipient 정소에 $5{\sim}7ml$의 공여 세포부유액을 주입하여 정소 내 50% 이상의 세정관 내로 새포부유액의 주입이 가능하였고, 세포부유액이 주입된 세정관 내에서 형광표지된 정소세포들이 고루 이식되어짐이 관찰되었다. 본 연구에서 개발한 이식 기법을 이용하여 효율적인 정소세포의 이식이 가능함에 따라 향후 돼지 정원줄기세포의 연구 및 활용법 개발에 획기적인 돌파구가 마련될 것으로 기대된다.
During the last 20 years organic semiconductors have attracted considerable attention due to their interesting physical properties followed by various technological applications in the area of electronics and opto-electronics. It has been a long time since organic solar cells were expected as a low-cost energy-conversion device. Although practical use of them has not been achieved, technological progress continues. Morphology of the materials, organic/inorganic interface, metal cathodes, molecular packing and structural properties of the donor and acceptor layers are essential for photovoltaic response. We have fabricated solar cell devices based on zinc-phthalocyanine(ZnPc) as donor(D) and fullerine($C_{60}$) as electron acceptor(A) with doped charge transport layers, $Alq_3$ as an electron transport or injection layer. We observed the photovoltaic characteristics of the solar cell devices using the Xe lamp as a light source.
Kim, Dong-Uk;Yoo, Ji-Ho;Lee, Yong-Joo;Kim, Kwan-Soo;Cho, Hyun-Soo
BMB Reports
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제41권1호
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pp.48-54
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2008
PM0188 is a newly identified sialyltransferase from P. multocida which transfers sialic acid from cytidine 5'-monophosphonuraminic acid (CMP-NeuAc) to an acceptor sugar. Although sialyltransferases are involved in important biological functions like cell-cell recognition, cell differentiation and receptor-ligand interactions, little is known about their catalytic mechanism. Here, we report the X-ray crystal structures of PM0188 in the presence of an acceptor sugar and a donor sugar analogue, revealing the precise mechanism of sialic acid transfer. Site-directed mutagenesis, kinetic assays, and structural analysis show that Asp141, His311, Glu338, Ser355 and Ser356 are important catalytic residues; Asp141 is especially crucial as it acts as a general base. These complex structures provide insights into the mechanism of sialyltransferases and the structure-based design of specific inhibitors.
During the last 20 years organic semiconductors have attracted considerable attention due to their interesting physical properties followed by various technological applications in the area of electronics and opto-electronics. It has been a long time since organic solar cells were expected as a low-cost energy-conversion device. Although practical use of them has not been achieved, technological progress continues. Morphology of the materials, organic/inorganic interface, metal cathodes, molecular packing and structural properties of the donor and acceptor layers are essential for photovoltaic response. We have fabricated solar cell devices based on zinc-phthalocyanine(ZnPc) as donor(D) and fullerine$(C_{60})$ as electron acceptor(A) with doped charge transport layers, $Alq_3$ as an electron transport or injection layer. We observed the photovoltaic characteristics of the solar celt devices using the Xe lamp as a light source.
Cell therapy (CT) is a group of techniques to treat human disorders by transplantation of cells which have been processed and propagated independent of the living body. Blood transfusion and bone marrow transplant have been the primary examples of cell therapy. With introduction of stem cell (SC) technologies, however, CT is perceived as the next generation of biologies to treat human diseases such as cancer, neurological diseases, and heart disease. Despite potential of cell therapy, insufficient guidelines have been implemented concerning safety test and regulation of cell therapy. This review addresses the safety issues to be resolved for the cell therapy, especially SC therapy, to be successfully utilized for clinical practice. Adequate donor cell screening must preceed to ensure safety in cell therapy. In terms of SC culture, controlled, standardized practices and procedures should be established. Further molecular studies should be done on SC development and differentiation to enhance safety level in cell therapy. Finally, animal model must be further installed to evaluate toxicity, new concepts, and proliferative potential of SC including alternative feeder layer of animal cells.
Kim, Young-Myeong;Choi, Byung-Min;Kim, Yong-Seok;Kwon, Young-Guen;Kibbe, Melina R.;Billiar, Timothy R.;Tzeng, Edith
BMB Reports
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제41권2호
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pp.164-169
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2008
The tumor suppressor gene p53 regulates apoptotic cell death and the cell cycle. In this study, we investigated the role of p53 in nitric oxide (NO)-induced apoptosis in vascular smooth muscle cells (VSMCs). We found that the NO donor S-nitroso-N-acetyl-penicillamine (SNAP) increased apoptotic cell death in p53-deficient VSMCs compared with wild-type cells. The heme oxygen-ase (HO) inhibitor tin protoporphyrin IX reduced the resistance of wild-type VSMCs to SNAP-induced cell death. SNAP promoted HO-1 expression in both cell types. HO-2 protein was increased only in wild-type VSMCs following SNAP treatment; however, similar levels of HO-2 mRNA were detected in both cell types. SNAP significantly increased the levels of non-heme-iron and dinitrosyl iron-sulfur clusters in wild-type VSMCs compared with p53-deficient VSMCs. Moreover, pretreatment with FeSO4 and the carbon monoxide donor CORM-2, but not biliverdin, significantly protected p53-deficient cells from SNAP-induced cell death compared with normal cells. These results suggest that wild-type VSMCs are more resistant to NO-mediated apoptosis than p53-deficient VSMCs through p53-dependent up-regulation of HO-2.
Radial forearm free flap (RFFF) has been established itself as a versatile and widely used method for reconstruction of the head and neck, although it is still criticized for high mortality of donor site. Delayed wound healing, cosmetic deformity, vascular compromise and potentially reduced wrist function have many plastic surgeons hesitate to adapt it as a first choice in micro-reconstruction. To overcome these drawbacks, some techniques for donor-site repair such as V-Y advancement with full thickness skin graft (FTSG), application of artificial dermis ($Terudermis^{(R)}$) or acellular dermal matrix ($AlloDerm^{(R)}$), and double-opposing rhomboid transposition flap have been reported. Authors performed 4 cases of RFFF in old-aged patients of the head and neck cancer from April 2005 to February 2006. We compared the outcomes of donor site of RFFF which were resurfaced with split thickness skin graft (STSG) only and STSG overlying an $AlloDerm^{(R)}$. Patients were all males ranging from 59 to 74 years old (mean, 67.5). Three of them had tongue cancers, and the other showed hypopharyngeal cancer. All cases were pathologically confirmed as squamous cell carcinomas. We included the deep fascia into the flap, so called subfascially elevated RFFF in three cases, and in the other one, we dissected the RFFF suprafascially leaving the fascia intact. The donor site of the suprafascially elevated RFFF was resurfaced with STSG only. Among three of subfascially elevated RFFFs, donor-sites were covered with thin STSG only in one case, and STSG overlying $AlloDerm^{(R)}$ in two cases. All RFFFs were survived completely without any complication. The donor site of the suprafascially elevated RFFF was taken well with STSG only. But, the partial graft loss exposing brachioradialis and flexor carpi radialis muscle was unavoidable in all the subfascially elevated RFFFs irregardless of $AlloDerm^{(R)}$ application. Considering that many patients of the head and neck cancer are in old ages, we believe the RFFF is still a useful and versatile choice for resurfacing the head and neck region after cancer ablation. Its reliability and functional characteristics could override its criticism for donor site in old-aged cancer patients.
Background: In kidney transplantation, donor specific transfusion may induce tolerance as a result of some immune regulatory cells against the graft. In organ transplantation, the immune state arises from a relationship between the immunocompromised graft and the immunocompetent host. However, a reverse immunological situation exists between the graft and the host in hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). In addition, early IL-2 injections after an allogeneic murine HSCT have been shown to prevent lethal graft versus host disease (GVHD) due to CD4+ cells. We investigated the induction of the regulatory CD4+CD25+ cells after a transfusion of irradiated recipient cells with IL-2 into a donor. Methods: The splenocytes (SP) were obtained from 6 week-old BALB/c mice ($H-2^d$) and irradiated as a single cell suspension. The donor mice (C3H/He, $H-2^k$) received $5{\times}10^6$ irradiated SP, and 5,000 IU IL-2 injected intraperitoneally on the day prior to HSCT. The CD4+CD25+ cell populations in SP treated C3H/He were analyzed. In order to determine the in vivo effect of CD4+CD25+ cells, the lethally irradiated BALB/c were transplanted with $1{\times}10^7$ donor BM and $5{\times}10^6$ CD4+CD25+ cells. The other recipient mice received either $1{\times}10^7$ donor BM with $5{\times}10^6$ CD4+ CD25- cells or the untreated SP. The survival and GVHD was assessed daily by a clinical scoring system. Results: In the MLR assay, BALB/c SP was used as a stimulator with C3H/He SP, as a responder, with or without treatment. The inhibition of proliferation was $30.0{\pm}13%$ compared to the control. In addition, the MLR with either the CD4+CD25+ or CD4+CD25- cells, which were isolated by MidiMacs, from the C3H/He SP treated with the recipient SP and IL-2 was evaluated. The donor SP treated with the recipient cells and IL-2 contained more CD4+CD25+ cells ($5.4{\pm}1.5%$) than the untreated mice SP ($1.4{\pm}0.3%$)(P<0.01). There was a profound inhibition in the CD4+CD25+ cells ($61.1{\pm}6.1%$), but a marked proliferation in the CD4+CD25- cells ($129.8{\pm}65.2%$). Mice in the CD4+CD25+ group showed low GVHD scores and a slow progression from the post-HSCT day 4 to day 9, but those in the control and CD4+CD25- groups had a high score and rapid progression (P<0.001). The probability of survival was 83.3% in the CD4+CD25+ group until post-HSC day 35 and all mice in the control and CD4+CD25- groups died on post-HSCT day 8 or 9 (P=0.0105). Conclusion: Donor graft engineering with irradiated recipient SP and IL-2 (recipient specific transfusion) can induce abundant regulatory CD4+CD25+ cells to prevent GVHD.
Kim, Jun Sik;Jo, Hyeon Jong;Kim, Nam Gyun;Lee, Kyung Suk
Archives of Plastic Surgery
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제39권6호
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pp.655-658
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2012
Squamous cell carcinoma infrequently occurs at the soft palate. Although various methods can be used for reconstruction of soft palate defects that occur after resecting squamous cell carcinoma, it is difficult to obtain satisfactory results from the perspective of the functional restoration of the soft palate. A combination of bilateral palatal mucomuscular flap for the oral side and superiorly based posterior pharyngeal flap for the nasal side were performed on two patients who were diagnosed with squamous cell carcinoma of the soft palate in order to reconstruct the soft palate defects after surgical resection. After surgery, the patients were followed-up for a mean period of 11 months. The flaps were well maintained in both patients. The donor site defects were epithelialized and completely recovered. Additionally, no recurrence of the primary sites was shown. Slight hyponasality was observed in the voice assessments that were conducted 6 months after surgery. No food regurgitation or aspiration was observed in the swallowing tests. We used a combination of bilateral palatal mucomuscular flap and superiorly based posterior pharyngeal flap to reconstruct the soft palate defects that occurred after resecting the squamous cell carcinomas. We reduced the donor site complications and achieved functionally satisfactory outcomes.
Interspecies somatic cell nuclear transfer (iSCNT) is a useful method to preserve endangered species and to study the reprogramming event of a nuclear donor cell by the oocyte. Although several studies of iSCNT using murine cells and bovine oocytes have been reported, the development of murine-bovine iSCNT embryos beyond the 8-cell stage has not been successful. In this paper, we examined the developmental potential of embryos reconstructed with a murine embryonic fibroblast as the nuclear donor and a bovine oocyte as the cytoplasm recipient. The reconstructed embryos were cultured in CZB (murine medium) or CR1aa (bovine medium). In addition, for the development of a murine-bovine iSCNT blastocyst, the antioxidant ${\beta}$-mercaptoethanol (${\beta}ME$) was supplemented to CR1aa medium. Furthermore, to verify the mouse genome activation in murine-bovine iSCNT embryos, RT-PCR analysis of murine Xist was performed. The development of the murine-bovine iSCNT embryos cultured in CR1aa was significantly higher than that in CZB (p<0.05). With respect to the effect of BME on the development of the murine-bovine iSCNT blastocyst, addition of BME produced a significant increase in blastocyst development (p<0.05). Karyotype analysis confirmed that the reconstructed embryos were derived from murine cells (40XX). The Xist gene was gradually increased from the 8-cell stage to the blastocyst stage. This is the first report of blastocyst development of iSCNT embryos derived from murine somatic cells and bovine oocytes. These results demonstrate that bovine cytoplasm can support the development of later stages of a preimplantation embryo from murine-bovine iSCNT.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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