Background Adipocyte differentiation is completed by changing gene expression. Chromatin is closely related to gene expression. Therefore, its structure might be changed for adipocyte differentiation. Mouse 3T3-L1 preadipocytes have been used as a cell model to study molecular mechanisms of adipogenesis. Objective To examine changes of chromatin modification and expression of histone modifying enzymes during adipocyte differentiation. Methods Microscopic analysis and Oil Red O staining were performed to determine distinct phenotype of adipocyte differentiation. RT-PCR and Western blot analysis were used to examine expression levels of histone modifying enzymes during adipocyte differentiation. Histone modifications were examined by immunostaining analysis. Results Expression levels of P300 and cbp were increased during adipocyte differentiation. However, acetylation of histones was not quantitatively changed postdifferentiation of 3T3-L1 cells compared to that at pre-differentiation. RT-PCR and Western blot analyses showed that expression levels of hdac2 and hdac3 were increased during adipocyte differentiation, suggesting histone acetylation at chromatin level was homeostatically controlled by increased expression of both HATs and HDACs. Tri-methylation level of H3K9 (H3K9me3), but not that of H3K27me3, was significantly decreased during adipocyte differentiation. Decreased expression of setdb1 was consistent with reduced pattern of H3K9me3. Knock-down of setdb1 induced adipocyte differentiation. This suggests that setdb1 is a key chromatin modifier that modulates repressive chromatin. Conclusion These results suggest that there exist extensive mechanisms of chromatin modifications for homeostatic balance of chromatin acetylation and deconstruction of repressive chromatin during adipocyte differentiation.
Background: Nasopharyngeal carcinoma (NPC), a malignancy arising from the epithelial lining of the nasopharynx, is distinct from others cancers in terms of its epidemiologic features. It is rare in most parts of the world except for a few regions with populations of Mongoloid origin. Objectives: To study the expression pattern of Epstein Barr virus (EBV) encoded oncoproteins EBNA1 and LMP1 in different histological types of NPC and to correlate expression patterns with sex, age and histological types. Materials and Methods: A total of 40 formalin-fixed, paraffin-embedded NPC biopsy samples and tissues from 20 healthy controls were collected to study the expression level of EBNA1 and LMP1 using immunohistochemistry. Results: EBNA1 and LMP1 expression was found in 92.5% and 90% respectively, of the cases and none of the control specimens. The expression patterns of EBNA1 and LMP1 were determined to be statistically significant (p<0.05) when correlated with sex, age and histological distributions. Also immunohistochemistry was found to be a sensitive technique in the detection of EBV. Conclusions: The study reveals that the potent oncoproteins EBNA1 and LMP1 were over expressed in our population cohort. Our findings are to some extent inconsistent with earlier reports as our population showed a higher expression of both EBNA1 and LMP1 compared to other studies.
한국환경보건학회 2004년도 International Conference Global Environmental Problems and their Health Consequences
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pp.185-187
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2004
The co-administration of BPA and BBP induced slow weight gain compared with single administration in dams. Also, such mixture induced low neonatal body weights in next generation. The dams treated with BPA and BBP showed significant organ weight changes in liver, spleen exposed during lactational periods. But the dams exposed during lactational periods showed significant organ weight changes not only in liver, spleen but also in kidney, uterus and ovary. The F1 female rats exposed during lactation periods showed significant organ weight changes in liver, spleen, ovary. The F1 male rats showed significant organ weight changes in liver, kidney, epididymis, vesicular glands, prostate. However no clear synergistic effects of BPA and BBP could be found. Estrogen receptor ${\alpha}$ expression by BPA and BBP in the uterus(dam, F1 female) and testis(F1 male) were studied. There was no significant different $ER{\alpha}$ expression pattern between control and treated groups. But $ER{\alpha}$ expression were increased in F1 male testis and female uterus. F1 male showed distinct $ER{\alpha}$ expression, especially in the group of lactational combined exposure. Synergistic $ER{\alpha}$ expression was found by combined treatment of BPA and BBP.
This study was performed to evaluate developmental and estrogenic activity of bisphenol A (BPA) and butyl benzyl phthalate (BBP) to the second generation of Sprague-Dawley rats ingested during gestational or lactational periods. Rats were given BPA 20$\mu\textrm{g}$/kg BBP 100mg/kg of pregnancy or lactation periods. Maternal body weight and neonatal body weight were recorded. The rats were sacrificed on day 21 after birth. Reproductive organs of dam and neonate were utilized for receptor binding assay. The plasma concentrations of BPA and MBep, one of the major metabolites of BBP were analyzed with HPLC. The co-administration of BPA and BBP induced slow weight gain compared with single administration in dams. Also, such mixture induced low neonatal body weights in next generation. The dams treated with BPA and BBP during lactational periods showed significant organ weight changes in liver and spleen. The dams exposed during lactational periods showed significant organ weight changes not only in liver and spleen but also in kidney, uterus and ovary. The F1 female rats exposed during lactation periods showed significant organ weight changes in liver, spleen, ovary. The F1 male rats showed significant organ weight changes in liver, kidney, epididymis, vesicular glands, prostate. However, no clear synergistic effects of BPA and BBP were noted. There was no significantly different ER$\alpha$ expression pattern between control and treated groups. However, ER$\alpha$ expression were increased in F1 male testis and female uterus. PI male showed distinct ER$\alpha$ expression, especially in the group of lactational combined exposure. Synergistic ER$\alpha$ expression was found by combined treatment of BPA and BBP. We could not find any evidences of synergistic effects on BPA and/or BBP combined administration on dams and their fetuses, except in ER$\alpha$ expression of F1 male.
The blood-epididymis barrier (BEB) forms a unique microenvironment that is crucial for the maturation, protection, transport, and storage of spermatozoa in the epididymis. To characterize the function of tight junctions (TJs), which are constitutive components of the BEB, we determined the expression and localization of TJ proteins such as zonula occludens (ZO)-1, 2, and 3, occludin, and claudin3 (Cldn3) during postnatal development in the goat epididymis. To assess the expression patterns of TJ proteins in immature (3 months of age) and mature (14 months of age) goat epididymides, two different experimental methods were used including immunofluorescence labeling and western blotting. We show that, ZO-1, 2, and 3, and occludin, were strictly expressed and localized to the TJs of the goat epididymis, whereas Cldn3 was present in basolateral membranes as well as TJs. All TJ proteins examined were more highly expressed in the immature epididymis compared to levels in mature tissue. In conclusion, our study indicates that at least five TJ proteins, namely ZO-1, ZO-2, ZO-3, occludin, and Cldn3, are present in TJs, and the expression strength and pattern of TJ proteins tend to be age dependent in the goat epididymis. Together, these data suggest that the distinct expression patterns of TJ proteins are essential for regulating components of the luminal contents in the epididymal epithelium and for forming adequate luminal conditions that are necessary for the maturation, protection, transport, and storage of spermatozoa in the goat epididymis.
The term 'heat shock protein (Hsps)' was derived from the fact that these proteins were initially discovered to be induced by hyperthermic conditions. In response to a range of stressful stimuli, including hyperthermia, immobilization, UV radiation, amino acid analogues, arsenite, various chemicals, and drugs the mammalian brain demonstrates a rapid and intense induction of the heat shock protein. Moreover, Hsps were expressed on the various pathological conditions including trauma, focal or global ischemia, hypoxia, infarction, infections, starvation, and anoxia. Especially, Hsp25 has a protective activity, facilitated by the ability of the protein to decrease the intracellular levels of reactive oxygen species (ROS) as well as its chaperone activity, which favors the degradation of oxidized proteins. Recently, it has clearly demonstrated that Hsp25 is constitutively expressed in the adult mouse cerebellum by parasagittal bands of purkinje cells in three distinct regions, the central zone (lobule VI-VII) and nodular zone (lobule IX-X), and paraflocculus. The Mongolian gerbil has been introduced into stroke study model because of its unique brain vasculature. There are no significant connections between the basilarvertebral system and the carotid system. This anatomy feature renders the mongolian gerbil susceptible to forebrain ischemia-induced seizure. The present study is designed to examine the pattern of Hsp25 expression in the cerebellum of this animal in comparison with that in mouse.
Kim, Ho-Bang;Oh, Chang-Jae;Park, Yung-Chul;Lee, Yi;Choe, Sung-Hwa;An, Chung-Sun;Choi, Sang-Bong
BMB Reports
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제44권10호
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pp.680-685
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2011
The AT-hook motif is a small DNA-binding protein motif that has been found in the high mobility group of non-histone chromosomal proteins. The Arabidopsis genome contains 29 genes encoding the AT-hook motif DNA-binding protein (AHL). Recent studies of Arabidopsis genes (AtAHLs) have revealed that they might play diverse functional roles during plant growth and development. In this report, we mined 20 AHL genes (OsAHLs) from the rice genome database using AtAHL genes as queries and characterized their molecular features. A phylogenetic tree revealed that OsAHL proteins can be classified into 2 evolutionary clades. Tissue expression pattern analysis revealed that all of the OsAHL genes might be functionally expressed genes with 3 distinct expression patterns. Nuclear localization analysis using transgenic Arabidopsis showed that several OsAHL proteins are exclusively localized in the nucleus, indicating that they may act as architectural transcription factors to regulate expression of their target genes during plant growth and development.
Im, Ji Woo;Lee, Chae Young;Kim, Dong-Hwan;Bae, Hae-Rahn
한국발생생물학회지:발생과생식
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제24권3호
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pp.177-185
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2020
Although many aquaporin (AQP) transcripts have been demonstrated to express in the female reproductive tract, the defined localizations and functions of AQP subtype proteins remain unclear. In this study, we investigated the expression of AQP1, AQP3, AQP5, AQP6, and AQP9 proteins in female reproductive tract of mouse and characterized their precise localizations at the cellular and subcellular levels. Immunofluorescence analyses for AQP1, AQP3, AQP6, and AQP9 showed that these proteins were abundantly expressed in female reproductive tract and that intense immunoreactivities were observed in mucosa epithelial cells with a subtype-specific pattern. The most abundant aquaporin in both vagina and uterine cervix was AQP3. Each of AQP1, AQP3, AQP6, and AQP9 exhibited its distinct distribution in stratified squamous or columnar epithelial cells. AQP9 expression was predominant in oviduct and ovary. AQP1, AQP3, AQP6, and AQP9 proteins were mostly seen in apical membrane of ciliated epithelial cells of the oviduct as well as in both granulosa and theca cells of ovarian follicles. Most of AQP subtypes were also expressed in surface epithelial cells and glandular cells of endometrium in the uterus, but their expression levels were relatively lower than those observed in the vagina, uterine cervix, oviduct and ovary. This is the first study to investigate the expression and localization of 5 AQP subtype proteins simultaneously in female reproductive tract of mouse. Our results suggest that AQP subtypes work together to transport water and glycerol efficiently across the mucosa epithelia for lubrication, proliferation, energy metabolism and pH regulation in female reproductive tract.
B 세포가 다양화되어 가는 기작을 규명한다는 것은 면역 반응의 조절이 생체 내에서 어떻게 이루어지고 있는 가를 이해하는데 가장 기본이 되는 것이다. 본 연구는 기 확립한 in situ hybridization 기법을 이용하여 항체의 항원 결합 부위 유전자가 B 세포의 발달 과정 중 어떻게 조절이 되고 있으며 이것은 B 세포의 다양화라는 측면과 어떻게 연관이 되어 있는 지를 분석하였다. Gestation 시기가 16일, 18일, 19일, 20일 되었을 때간에 있는 B 세포는 $V_H7183$와 $V_HQ52$두개의 $V_H$ 유전자군을 가장 많이 이용하고 있었으며 이러한 경향은 gestation 기간 전체를 통하여 변화 없이 일정하게 나타났다. 간에 있는 fetal B 세포를 differentiation 단계별로 구분하기 위하여 표면 항체를 갖고 있는 집단과, 갖고 있지 않은 두 집단으로 나눈 후 각 집단이 발현하는 $V_H$ 유전자를 분석하였을 때 뚜렷한 차이를 나타냄이 없이 양쪽 집단 모두 fetus의 특징적 $V_H$ 이용양식을 보여주었다. 또 다른 조혈 기능 임파 기관인 fetal spleen에 있는 B 세포 또한 fetal liver의 B 세포와 동일한 양상의 $V_H$ 유전자 이용 양식을 보여 주어 각 임파 기관별 B 세포의 다양성 차이를 발견 할 수 없었다. 이와 같이 adult의 B 세포에 대비하여 독특한 $V_H$ 유전자 이용 양상을 보이는 fetal B 세포의 전구 세포를 4주 이상 미리 형성시킨 adult 골수 세포와 직접 접촉시키면서 발달, 성숙시킨 후 다시 나타난 B 세포를 분석하여도 여전히 fetal B 세포로서의 $V_H$ 유전자 이용 양상을 보이는 것은 fetal B세포의 전구 세포가 갖고 있는 유전적 잠재력에 의한 것이지 환경이나 B 세포의 differentiation 단계 또는 B 세포가 머무르고 있는 특수 임파 장기의 생리적 환경 등에 좌우되는 것이 아니라는 것이 확인되었다.
생물의 종 구분에 이용하는 지표 중 체색은 특징이 뚜렷한 형태 지표로서, 어류의 종 동정에 유용한 형태형질이다. 개볼락은 한국 중부와 남부, 일본 홋카이도 남쪽 등지에 분포하는 상업적으로 중요한 어종으로, 피부에 반점의 유무 및 마킹이 있는 위치에 따라 4개의 아종으로 구분하는 복잡한 체색 특성을 갖는다. 그러나 개볼락의 다양한 체색 패턴과 관련된 유전자 탐색 및 유전자 변이 발굴 등 체색 형성에 관여하는 유전자 규명에 관한 연구는 없다. 이에 따라 본 연구에서는 개볼락의 체색 패턴 관련 유전자 발굴 및 유전자 발현 특성을 규명하기 위한 기초 연구로 체색 타입별 피부 전사체를 프로파일링하였다. 개볼락을 Wild type (반점과 marking 없음)과 Color type (반점과 마킹 모두 있음)으로 구분하였고, 피부 전사체를 RNA-seq 방법을 이용하여 분석하였다. 개볼락 피부 전사체의 발현량을 비교하여 체색 타입별 차등발현유전자 164개를 확보하였다. 이들 차등발현유전자의 기능을 Gene ontology(GO) 분석으로 확인한 결과, 2개는 molecular function, 46개는 biological process, 6개는 cellular component 기능그룹에 속하였다. 차등발현유전자 중 CTL (Galactose-specific lectin nattectin), CUL1 (Cullin-1), CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase), NMRK2 (Nicotinamide riboside kinase 2), ALOXE3 (Hydroperoxide isomerase ALOXE3), SLC4A7 (Sodium bicarbonate cotransporter 3) 등은 특정 체색 타입 특이적인 발현양상을 나타냈다. 이번 연구는 개볼락의 체색 패턴 형성에 관여하는 전사체를 탐색한 첫 번째 연구로, 체색 형성 관련 기능유전자 발굴을 위한 후보유전자로 개볼락의 체색 타입별 차등발현유전자를 확보한 것에 의의가 있다. 향후에는 이들 후보유전자의 발현양상 및 기능을 분석하여 개볼락의 복잡한 체색 패턴과 관련된 기능유전자의 특성을 밝히고자 한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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