본 연구를 통하여 피부 미용 소재로 알려져 있는 콜라겐 펩타이드를 섭취한 후 혈중에 나타나는 소화분해산물 중 콜라겐 특유의 아미노산인 hydroxyproline과 이것의 dipeptide 형태인 Pro-Hyp이 피부에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 피부 미용 소재를 경구 섭취하는 사람의 피부는 광노화 및 자연노화가 어느 정도 진행된 상태이므로, 이와 유사한 조건을 조성하기 위해 경구 투여를 시작하기 전에 hairless mouse에 7주간 주 3회 UV를 조사하여 주름을 선유발시켰다. 군 분리를 시킨 후 7주간 경구로 실험물질을 주 5회 반복 투여하면서, 주 3회 UV 조사를 병행하였으며, 시험 기간 중 임상증상, 체중변화를 관찰하였고, 3회 (0,4. 7주차) 피부주형을 채취하여 영상 분석을 실시하였으며, 2회 (0,7 주차)의 피부탄력측정 및 1회(7주차)의 TEWL측정을 병행하였다. 실험종료 후 피부조직의 병리조직학적 검사(H&E, Masson-Trichrome stain) 및 피부두께 측정을 실시하였다. 실험기간 중 이상 임상증상을 보이거나 사망한 개체는 없었으며, 체중에 대한 통계적으로 유의한 변화는 관찰할 수 없었다. 피부 육안관찰 시 NC군에 비해 UC군의 피부 주름 증가가 뚜렷하였으며, 시험군들은 UC군에 비해 주름 증가가 적었다. 경구 투여 0, 4, 7주차에 제작된 replica의 주름 지표를 통계 처리한 결과, UV/H군과 UV/P군은 DC군에 비해 감소경향은 보였으나 유의적인 차이는 없었다. 탄력측정검사 결과 UV를 쬐지 않은 NC군은 UC군에 비해 UA/UF, Ur/Ue, Ur/Uf 지표에서 유의적인 증가를 보였다. UV/H군과 UV/P군은 모두 0, 7주차 모두 유의적인 차이를 보이지 않았다. 피부 보습력 측정 결과 NC군 및 모든 실험군에서 UC군에 비해 유의적인 TEWL 감소를 관찰할 수 있었다. 피부 두께의 경우 NC군, UV/H군, UV/P군은 UC군에 비해 피부 두께가 유의적으로 감소하였다. 진피층에서의 교원질 확인을 위해 실시한 Masson-Trichrome stain의 경우 UC군에서는 상부 진피층에서의 염색상 소실이 관찰되었으나, 모든 실험군에서 진피층 손상이 거의 관찰되지 않아 실험물질에 의한 회복을 확인 할 수 있었다. 이상의 실험 결과 hydroxyproline, Pro-Hyp의 경구반복투여시 자외선에 의해 광노화가 유발된 피부에 보습 효과, 피부 두께 감소 효과, 진피층 손상 회복 효과를 유의적으로 확인할 수 있었으며, 단, 피부 주름 개선 정도는 통계적 유의성은 없이 경향성만을 확인할 수 있었다. Hydroxyproline과 이를 함유하는 dipeptide 형태의 Pro-Hyp를 경구 투여한 시험으로부터 확인한 피부 보습 및 진피층 회복 효과는 이 물질들이 유래된 콜라겐을 도포 또는 섭취했을 때 피부에 나타날 수 있는 작용들과 상통하며, 단독 미용 소재로도 활용될 수 있는 가능성을 보여주었다. 본 연구에서는 콜라겐 펩타이드를 섭취 시 체내에 흡수되어 혈액을 통해 각 조직에 운반되는 분해 산물이 피부에 미치는 영향을 동물 시험을 통해 살펴보았는데, 향후 연구에서는 관절, 혈관과 같은 다른 생체 조직들에 미치는 영향에 대해서도 검증해 볼 필요가 있다.
다랑어로부터 추출한 histidine 함유 저분자 peptide의 항산화능을 평가한 결과, histidine, 1-methylhistidine, carnosine과 anserine을 포함한 histidine 관련 화합물과 다랑어에서 추출한 histidine 함유 저분자 peptide는 DPPH 라디칼 소거능력을 지녔고, 농도가 증가함에 따라 효과 또한 증가하였다. 다랑어 추출물은 2차 이온교환 처리물이 carnosine과 anserine의 dipeptide와 유사한 결과를 나타냈으며, 가열처리와 한외여과를 병행한 경우와 이온교환과 한외여과 처리를 한 동결물의 경우 ascorbic acid와 유사한 라디칼 소거능을 나타냈다. Histidine 함유 dipeptide 중에서 anserine이 가장 높은 환원력을 나타내었으며, carnosine은 두 번째로 강한 환원력을 나타내었다. Dipeptide와 비교하여 황다랑어, 눈다랑어 추출물이 높은 환원력을 나타내었으며, 농도가 증가할수록 환원력이 증가하였다. 다랑어 추출물 원육에서의 SOD 유사활성은 약했으나, 가열처리와 한외여과를 병행하였을 때, 황다랑어 눈다랑어 추출물이 농도별로 4.0-19.4%, 5.7-20.6%로 나타났으며, 이온교환과 한외여과를 병행하였을 때, 8.3-27.9%, 5.4-25.0%, 2차 이온교환 처리를 하였을 때, 8.2-29.5%, 8.6-32.1%로 활성이 증가하였다. Linoleic acid를 기질로 하여 저장기간에 따른 자동산화의 중간생성물인 과산화물의 변화를 측정한 결과 CM-cellulose의 처리 동결건조물은 ascorbic와 유사하게 지질산화능이 높은 것으로 나타났다. 인체 내의 pH 변화를 고려하여 pH 1.2, pH 3.0, pH 4.2로 조절하여 아질산염의 소거능을 살펴보았을 때, 황다랑어 추출물의 경우 25.14%, 15.09%, 13.71%, 눈다랑어 추출물은 27.44%, 18,28%, 18.09%로 pH 1.2, pH 3.0에서 carnosine과 anserine보다 낮지만 pH 4.2에서 histidine 보다 높은 소거능을 보였다.
돼지의 폐(lung)로 부터 histidylleucine dipeptide를 가수분해 시키는 효소를 추출 정제 하였으며, 정제된 효소의 비활성도는 $1.6{\mu}moles$/min/mg protein(약 50배 정제)이었다. 이 새로운 dipeptidase의 분자량은 sucrose density gradient 원심침강법에 의하여 측정한 결과 약 80,000 daltons이었으며 효소의 기질 물질로서 요구되는 조건은 방향족 잔기를 갖는 dipeptide를 필요로 하나 histidylleucine을 기질로 사용하였을 경우 $K_m$ 값은 $2{\times}10^{-4}M$이었다. 본문에서는 이효소의 일반적 특성과 그 밖의 생리학적 및 생화학적 기능에 관하여 검토하였다.
This study investigated the effects of proline-serine (PS) and valine-serine (VS) dipeptides on melanogenesis in Mel-Ab cells. Proline-serine and VS significantly inhibited melanin synthesis in a concentration-dependent manner, though neither dipeptide directly inhibited tyrosinase activity in a cell-free system. Both PS and VS down-regulated the expression of microphthalmia-associated transcription factor (MITF) and tyrosinase. In a follow-up study also described here, the effects of these dipeptides on melanogenesis-related signal transduction were quantified. Specifically, PS and VS induced ERK phosphorylation, though they had no effect on phosphorylation of the cAMP response element binding protein (CREB). These data suggest that PS and VS inhibit melanogenesis through ERK phosphorylation and subsequent down-regulation of MITF and tyrosinase. Properties of these dipeptides are compatible with application as skin-whitening agents.
We examined the immunological properties of the recombinant hepatitis B surface antigen (r-HBsAg) which was expressed in mammalian cell (C127). The cross-immunity of r-HBsAg and plasma-derived hepatitis B surface antigen (p-HBsAg) were tested using Western blotting and ELISA with guinea pig polyclonal antibody and naturally infected human-derived antibody and the both antigens show the same results in their response pattern and intensity, which indicate they have a good cross-immunity. from the measurement of $ED_{50}$ after formalin- or heat-inactivation, both r-HBsAg and p-HBsAg and p-HBsAg showed $ED_{50}$ of 0.2-0.3 in formalin-inactivaton, while r-HBsAg was 0.05-0.09 and p-HBsAg was 0.03-0.07 in heat-inactivation, which means heat-inactivation method is 3-4 times superior in immunogenicity. In the immunopersistency test performed in guinea pig for the period of 3 months with two different adjuvants, antibody titer was 34.2 with muramyl dipeptide adjuvant, which was 1.8 times greater than the antibody titer of 18.9 with $AIPO_{4}$ adjuvant. the mutagenicity of r-HBsAg has the same cross-immunity with p-HBsAg, and heat-inactivation method and muramyl dipeptide adjuvant allow development of r-HBsAg vaccine with excellent immunogenicity.
Few $\alpha$-Hydroxy-$\beta$-amino acids were synthesized via various nucleophilic addition of the epoxide and followed by stereoselective nucleophilic substitution reaction and eliminative cleavage of the acetal selectively in diacetal compound. One of the synthesized $\alpha$-Hydroxy-$\beta$-amino acid reacted with L-leucine methylester to give corresponding dipeptide in good yields.
1-Aminoalkylphosphonic acid인 DL-1-aminoethylphosphonic acid(1-AEP)와 DL-1-aminopropylphosphonic acid(1-APP)를 아미노산인 glycine, DL-alanine, DL-phenylalanine과 염기성 수용액 상에서 반응시켜 아직까지 발표되지 않은 다음의 dipeptide 들을 합성하였다. N-Phthalylglycyl-1-AEP, N-phthalyl-dl-alanyl-1-AEP, N-phthalyl-dl-phenylalanyl-1-AEP, N-phthalylglycyl-1-APP, N-tosylglycyl-1-App 및 N-tosyl-dl-alanyl-1-AEP 위의 화합물들은 모두 흰색의 고체로 얻어졌으며 ninhydrine test, IR spectra, 전위차적정, 원소분석에 의해 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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