Ha, Byeongsuk;Lee, Sieun;Kim, Sinil;Kim, Minseek;Moon, Yoon Jung;Song, Yelin;Ro, Hyeon-Su
Mycobiology
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v.45
no.4
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pp.379-384
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2017
In mating of Lentinula edodes, dikaryotic strains generated from certain monokaryotic strains such as the B2 used in this study tend to show better quality of fruiting bodies regardless of the mated monokaryotic strains. Unlike B2, dikaryotic strains generated from B16 generally show low yields, with deformed or underdeveloped fruiting bodies. This indicates that the two nuclei in the cytoplasm do not contribute equally to the physiology of dikaryotic L. edodes, suggesting an expression bias in the allelic genes of the two nuclei. To understand the role of each nucleus in dikaryotic strains, we investigated single nucleotide polymorphisms (SNPs) in laccase genes of monokaryotic strains to reveal nuclear origin of the expressed mRNAs in dikaryotic strain. We performed reverse transcription PCR (RT-PCR) analysis using total RNAs extracted from dikaryotic strains (A5B2, A18B2, and A2B16) as well as from compatible monokaryotic strains (A5, A18, and B2 for A5B2 and A18B2; A2 and B16 for A2B16). RT-PCR results revealed that Lcc1, Lcc2, Lcc4, Lcc7, and Lcc10 were the mainly expressed laccase genes in the L. edodes genome. To determine the nuclear origin of these laccase genes, the genomic DNA sequences in monokaryotic strains were analyzed, thereby revealing five SNPs in Lcc4 and two in Lcc7. Subsequent sequence analysis of laccase mRNAs expressed in dikaryotic strains revealed that these were almost exclusively expressed from B2-originated nuclei in A5B2 and A18B2 whereas B16 nucleus did not contribute to laccase expression in A2B16 strain. This suggests that B2 nucleus dominates the expression of allelic genes, thereby governing the physiology of dikaryons.
In the mating of filamentous basidiomycetes, dikaryotic mycelia are generated through the reciprocal movement of nuclei to a monokaryotic cytoplasm where a nucleus of compatible mating type resides, resulting in the establishment of two different dikaryotic strains having the same nuclei but different mitochondria. To better understand the role of mitochondria in mushrooms, we created four sets of dikaryotic strains of Lentinula edodes, including B2×E13 (B2 side) and B2×E13 (E13 side), B5×E13 (B5 side) and B5×E13 (E13 side), E8×H3 (E8 side) and E8×H3 (H3 side), and K3×H3 (K3 side) and K3×H3 (H3 side). The karyotypes and mitochondrial types of the dikaryotic strains were successfully identified by the A mating type markers and the mitochondrial variable length tandem repeat markers, respectively. Comparative analyses of the dikaryotic strains on the mycelial growth, substrate browning, fruiting characteristics, and mitochondrial gene expression revealed that certain mitochondria are more effective in the mycelial growth and the production of fruiting body, possibly through the activated energy metabolism. Our findings indicate that mitochondria affect the physiology of dikaryotic strains having the same nuclear information and therefore a selection strategy aimed at mitochondrial function is needed in the development of new mushroom strain.
Kim, Da-Woon;Nam, Junhyeok;Nguyen, Ha Thi Kim;Lee, Jiwon;Choi, Yongjun;Choi, Jaehyuk
Mycobiology
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v.49
no.1
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pp.86-88
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2021
The monokaryotic strain, Schizophyllum commune strain IUM1114-SS01, was generated from a basidiospore of dikaryotic parental strain IUM1114. It even showed the decolorizing activities for several textile dyes much better than its parental strain. Based on the results of a single-molecule real-time sequencing technology, we present the draft genome of S. commune IUM1114-SS01, comprising 41.1 Mb with GC contents of the genome were 57.44%. Among 13,380 protein-coding genes, 534 genes are carbon hydrate-active enzyme coding genes.
Kim, Young-Ho;Kong, Won-Sik;Kim, Kyung-Soo;You, Chang-Hyun;Kim, Han-Kyoung;Sung, Jae-Mo;Ryu, Young-Jin;Kim, Kwang-Ho
The Korean Journal of Mycology
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v.26
no.2
s.85
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pp.187-193
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1998
The effects of medium, incubation temperature, incubation period, pH of medium and $CO_2$ ondition during mycelial growth were investigated to study the factors associated with the formation of oidia in Flammulina velutipes. Oidia formation was increased when mycelial growth was poor, while oidia formation was inhibited in optimum condition of mycelial growth. Mating type of oidia was investigated to examine the effect of oidia formation on dikaryotic strain. Di-mon matings between oidia strains and original dikaryotic strain were carried out. Monokaryotic strains derived from oidia showed only one genotype. Seventy percent among Dimon mating strains showed slow mycelial growth and low yield of fruit-body, but others showed similar or high mycelial growth and yields in comparision with original dikaryon strain. One strain from di-mon mating demonstrated some differences in isozyme band pattern.
Winter mushroom, Flammulina velutipes, needs low temperature during its cultivation. To save on farm costs, especially during summer, a strain adaptable to a higher or elevated-temperature must be developed. At the start of breeding program, parental strains which could endure high temperature were obtained. Seuenty four dikaryotic strains were collected and divided into four groups according to the nature of temperature. They also had different fruiting temperature. Finally we selected three brown strains ASI 4048, 4057 and 4072, and collected their spores. These selected strains can germinate even at a high temperature of $32^{\circ}C$, which were dramatically higher than the other strains. Based on these results, the new white strain adapted to mid-temperature by backcross mating was developed. Molecular markers were applied to select white fruitbody producing strains without cultivation. They showed a specific band which co-segregated with brown fruitbody forming strains in $BC_1F_1$ progenies. Selected white strains were tested under several elevated temperature conditions.
Kim, Beom-Gi;Joh, Jung-Ho;Yoo, Young-Bok;Magae, Yumi
Mycobiology
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v.31
no.1
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pp.42-45
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2003
For transformation of Pleurotus ostreatus, two novel vectors, pPhKM1 and pPhKM2, were constructed, using the regulatory sequences of the P. sajor-caju $\beta$-tubulin gene(TUB1) and the ble gene encoding phleomycin binding protein. pPhKM1 contains ble fused to the TUB1 promoter and the Schizophyllum commune GPD terminator. pPhKM2 contains ble fused to the promoter and terminator regions of P. sajor-caju TUB1. To confirm phleomycin-resistance activity, each vector was cotrans-formed with pTRura3-2 into the P. ostreatus homokaryotic $ura^-$ strain. The transforming DNA was stably integrated into the genomic DNA. Subsequently, phleomycin resistance was conferred on wild-type dikaryotic P. ostreatus by transformation with pPhKM1 or pPhKM2. This transformation system generated stable phleomycin-resistant transformants.
Ha, Tai-Moon;Ju, Young-Cheol;Jeon, Dae-Hoon;Choi, Jong-In;Lee, Tae-Soo
Journal of Mushroom
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v.9
no.1
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pp.22-26
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2011
We bred a new strain of Pleurotus eryngii. It's name is 'Gongi No.3' and it was bred by mating monokaryotic strain isolated from E08-5D2 and dikaryotic strain GMPE25016 from 2006 to 2010 in Mushroom Research Station, Gyonggi province A.R.E.S. The characteristics of a new strain 'Gongi No.3' is as follows ; The optimum temperature for mycelium growth was from 26 to 29 degrees celsius on PDA medium and those for the premodium formation and the growth of fruit body were from 14 to 18 degrees celsius. The period of spawn running was around 30days at 22 degrees celsius and the period taken from scratching old spawn to make premodium were 8 days. The color degree of cap surface was measured by color difference meter and that of a new strain 'Gongi No.3' was 54.4 by L-value. it was seem to be dark, compared with 'Keunneutari No.2'. The hardness of fruit body of a new strain was higher than 'Keunneutari No.2'. The yield was about 180g per bottle(1100cc). it was 10g more than 'Keunneutari No.2'.
Esterase isozyme band patterns were compared between the wild strain and commercial strain of Flammulina velutipes. Monospores were isolated from wild strain. ASI4019 and their mating types were determined. We investigated the relationship between pigmentation on the plate and fruitbody color to understand genetic relationship among F. velutipes strains. Dikaryotic strains mated between nonpigmenting strains produced white fruitbodies. However dikaryon obtained from mating between nonpigmenting monokaryon and brown pigmenting monokaryon produced brown fruitbody as the dikaryon obtained from mating of brown pigmenting monokaryons. The white fruitbody from wild strain was distinguished from that of commercial strain. When the nonpigmenting wild monokaryon was mated with commercial monokaryon, pale brown mushroom was produced. The BC1F1 was obtained by mating the above mentioned $F_1$ with commercial monokaryon. Fruitbody color of BC1F1 shared two types; one strain with all pale brown fruitbodies, and the other strain with separated eight pale brown and two mixed type involving pale brown and white fruitbodies.
To breed new superior strains, collected strains were characterized and then several white strains were selected as parents. Monokaryons from the parents were isolated and studied. All tested white strains showed same mating genotype. Growth rate of monokaryons were lower than collected dikaryons. New dikaryotic strains were derived from inbreeding method, which means mating between monokaryotic isolates from different white strains having same mating genotype. Some of them showed higher yields of fruitbody than their parents. Specially Fv 4-1 strain showed the best productivity. Furthermore some mating combination showed cytoplasmic effect, when they mated reciprocally.
Kwon, Hyuk Woo;Choi, Min Ah;Kim, Dae Wook;Oh, Youn-Lee;Hyun, Min Woo;Kong, Won-Sik;Kim, Seong Hwan
Mycobiology
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v.44
no.4
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pp.314-318
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2016
Breeding the button mushroom requires genetic information about its strains. This study was undertaken to genetically characterize four domestically bred button mushroom strains (Saea, Saejung, Saedo, Saeyeon cultivars) and to assess the possibility of using the intergenic spacer 1 (IGS1) region of rDNA as a genetically variable region in the genetic characterization. For the experiment, 34 strains of Agaricus bisporus, two strains of A. bitorquis, and one strain of A. silvaticus, from 17 countries were used. Nucleotide sequence analysis of IGS1 rDNA in these 37 Agaricus strains confirmed that genetic variations exist, not only among the four domestic strains, but also between the four domestic strains and foreign strains. Crossing two different haploid strains of A. bisporus seems to generate genetic variation in the IGS1 region in their off-spring haploid strains. Phylogenetic analysis based on the IGS1 sequence revealed all A. bisporus strains could be differentiated from A. silvaticus and A. bitorquis strains. Five genetic groups were resolved among A. bisporus strains. Saejung and Saeyeon cultivars formed a separate genetic group. Our results suggest that IGS1 could be complementarily applied in the polymorphism analysis of button mushroom.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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