During the screening of inhibitors of melanin biosynthesis from microbial secondary metabolites, a fungal strain MR-93 which was capable of producing high level of an inhibitor was selected from plant leaf. Based on taxonomic studies, the fungus could be classified as a strain of Trichoderma sp.. The active compound (MR-93D) was purified from the culture broth by Diaion HP-20 column chromatography, ethylacetate extraction, Sephadex LH-20 column chromatography and HPLC. The inhibitor was identified as 4-hydroxy-8-isocyano-l-oxaspiro[4-4]cyclonon-8-en-2- one by spectroscopic methods of UV, $^{1}$H-NMR, ESIMS and IR. MR-93D showed a strong tyrosinase inhibitory activity with 0.03 $\mu$g/m of IC$_{50}$ value. It also inhibited melanin biosynthesis with 35 mm inhibition zone at 30 $\mu$g/paper disc in Streptomyces bikiniensis, a bacterium used as an indicator organism in this work.
함초를 기능성 식품소재로서 이용하기 위하여 함초 80% 에탄올 추출물로부터 Diaion HP-20 chromatography를 이용하여 조다당체 및 조사포닌을 분리 한 후 이들에 대한 항산화 효과, 암세포 성장억제효과, 비장세포 증식능 및 대식세포의 면역활성과 같은 생리활성을 조사하였다. 함초 조다당체 및 조사포닌 첨가군은 $500{\mu}g/mL$ 농도 이상에서 20% 이상의 수소공여능을 나타내었으며, 환원력도 농도 의존적으로 증가하였다. 조다당체 및 조사포닌은 $500{\mu}g/mL$ 농도에서 전립선암세포(PC-3) 및 대장암세포(HT-29)에 대하여 각각 20%, 50% 이상의 성장 억제율를 보였는데, 함초 조다당체 보다 조사포닌에서 더 높은 항산화 및 암세포 증식억제 효과를 나타내었다. 한편 함초 조다당체 첨가군은 비장세포 증식 및 대식세포주 NO 생산을 농도 의존적으로 유도하였으나, 조사포닌 첨가군은 오히려 농도 $50{\mu}g/mL$ 이상에서 이들 면역 활성을 억제하였다. 즉 면역 활성에서는 함초 사포닌 보다 조다당체에서 더 높은 면역 증강 효과를 보였다. 따라서 함초는 기능성 식품소재로 활용 할 수 있을 것으로 기대된다.
항진균성 항생물질에 의한 고추역병의 생물방제에 관한 연구를 위하여 지역 경작지에서 고추역병균 P. capsici 생육을 저해는 다기능의 강력한 길항세균을 선발하였다 선발된 균주는 배양학적, 생리학적, 생화학적 실험과 AEI(CHB50) 및 Biolog(Microlog 4.01C) 시스템을 이용하여 동정한 결과 B. megaterium와 97%이상 일치하여 최종적으로 선발된 길항세균을 B. megaterium KL 39로 명명하였다. B.megaterium KL 39의 P. capsic에 대한 길항은 열에 안정하고 n-BuOH에 추출이 되는 저분자성 항생물질과 용매에 추출되지 않은 열에 약한 고분자성의 식물병원균 세포벽 가수분해효소인 cellulase에 의한 것으로 확인되었다. 길항균주 B.megaterium KL 39가 생산하는 항진균성 항생물질은 P.capsici의 포자발아와 균사성장에 큰 영향을 미쳤으며 0.4% fructose, 0.3% yeast extract, 5 mM KCI (pH 8.0)을 포함한 배지에서 3$0^{\circ}C$, 40시간 배양하였을 때 그 생산성이 최대치를 나타내었다. Diaion HP-20 column, silica gel column, Sephadex LH-20 column과 HPLC에 의해 항생물질을 정제하였으며 정제된 항생물질은 TLC plate상에서 Ethanol:Ammonia:Wate.(8:1:1)로 전개한 결과 RF value가 0.32를 나타내었으며, 단일물질로 정제된 항생물질을 KL39로 명명하였다. 선발된 길항미생물 E. megaterium KL 39와 정제된 항생물질 KL39를 가지고 고추를 기주식물로 하여 in vivo pot시험 결과 고추역병균 P.capsic게 의해 유발되는 고추역병에 대한 길항력으로 두 가지 모두 고추역병 방제력이 있음을 식물실험에서 확인할 수 있었다.
본 연구는 잠상산물로부터 고부가가치 항당뇨 기능성 소재를 개발하기 위한 연구의 일환으로, 먼저 뽕나무 부위별 4가지(오디, 뽕잎, 상지, 상백피) 에탄올 추출물의 ${\alpha}$-glucosidase 저해활성을 측정한 결과 상백피가 가장 높은 저해활성을 나타내었으며, 그로부터 여러 column chromatography 및 NMR 기기분석을 통해 4가지 ${\alpha}$-glucosidase 저해제를 분리, 정제 및 동정한 결과는 다음과 같다. 상백피 에탄올 추출물을 Diaion HP-20, silica gel, ODS-A 및 Sephadex LH-20 column chromatography를 실시하여 4가지 화합물[Comp. 1(10 mg), Comp. 2(9.6 mg), Comp. 3(9.3 mg), 및 Comp. 4(6.5 mg)]을 분리 및 정제하였으며, 그들의 효소 저해활성을 측정한 결과 Comp. 1($IC_{50}=5.22{\mu}g/mL$), Comp. 2($IC_{50}=1.78{\mu}g/mL$), Comp. 3($IC_{50}=2.94{\mu}g/mL$) 및 Comp. 4($IC_{50}=1.54{\mu}g/mL$)로 나타났다. 그리고 그들 화합물의 동정을 위해 UV 및 NMR spectroscopy를 이용하여 구조를 분석한 결과 Comp. 1(morusin), Comp. 2(kuwanon H), Comp. 3(chalcomoracin A), Comp. 4(chalcomoracin B)로 각각 동정하였다. 이상의 연구 결과로 미루어 보아 상백피로부터 분리된 ${\alpha}$-glucosidase 저해제는 향후 당뇨 치료용 기능성 소재로 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제16권2호
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pp.57-59
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2008
While searching for pancreatic lipase inhibitors, the active compound was found in a methanol extract of Apis mellifera venome. The active compound was isolated by Diaion HP-20 column chromatography, thin layer chromatography and HPLC. The active compound is stable to the extreme pH and heat. There is no loss of activity both in acidic and alkaline solution in the pH range of 2 to 11 by heating for 15 minutes at $90^{\circ}C$. The rf value of the compound was 0.51 at TLC with butanol : methanol: water (4:1:2) solvent system. The molecular weight of the compound was determined to be 293 by EI-MS.
During the screening of antifungal antibiotics from microbial metabolites, we selected Pseudomonas aeruginosa KGM-100 showing powerful antagonistic activity against various phytopathogenic fungi. Antibiotics KGM-100A and KGM-100B were purified from the culture broth of Pseudomonas aeruginosa KGM-100 by diaion HP-20 column chromatography, ethyl acetate extraction, silica gel column chromatography, preparative TLC and recrystallization. KGM-100A which was recrystallized in MeOH showed antimicrobial activities against a broad spectrum of fungi and bacteria. Physico-chemical properties of KGM-100A were determined and identified to be phenazine-l-carboxylic acid by UV, IR, $^{1}$H-NMR, $^{13}$C-NMR, mass spectrum, and elemental analyses.
The antimicrobial properties of extracts of Prunus mume were tested on Salmonella paratyphimurium and S. typhimurium. First, the Prumus mume was extracted with methanol at several temperatures, and then fractionation of the methanol extracts from Prunus mume was carried out by using petroleum ether, chloroform, ethyl acetate or butanol. Secondly, absorption column chromatoraphy (using a Diaion HP 20) was conducted to eliminate some water soluble materials that might inhibit the antimicrobial activity of some extracts. The antimicrobial activitry of each of the Prunus mume extracts was determined using a paper disc method against several food-borne pathogens, The growth inhibition curve was determine using butanol extracts of Prunus mume against Salmonella typhimurium. The extraction temperature did not have any significant effect on the yield of the extract or on the level of antimicrobial activity. The butanol extract of Prunus mume showed strong antimicrobial activity against Salmonella paratyphimurium and S. typhimurium; a 1,000 ppm of butanol extract of Prunus mume retared the growth of S. typhimurium up to 36 hours. (Korean J Nutrition 35(9) : 926~931, 2002)
AF-011A is a novel lipopeptide with potent antifungal activity isolated from Pseudomonas cepacia AF6008 deposited as KFCC 10759. The compound was isolated from the fermentation broth by extraction with 50% isopropyl alcohol. Purification was effected by chromatography on Diaion HP-20, Alumina and C18 followed by HPTLC on silica gel. These techniques affored two closelt related compounds. AF-011A1 ans AF-011A2. The molecular weights of AF-011A1/A2 were determined by fast atom bombardment mass spectrometry(A1 m/z 1,215 : A2 m/z 1,199).
The leaves of Acanthopanax sessiliflorus Seem. (Araliaceae), which is native plant to Korea, have not been studied yet on triterpene constituents. Three 3,4-seco-lupane triterpenoids (Compound I-III) were isolated from the MeOH extract of this plant using Diaion HP-20P, silica gel and ODS column chromatographes. Based on physicochemical and spectroscopic data, the chemical structures of these compounds were identified as follows ; chiisanogenin (Compound I), chiisanoside (Compound II), $22{\alpha}-hydroxychiisanoside$ (Compound III).
Cyclodextrin glucanotransferase from Bacillus stearothemophilus and Bacillus macerans synthesized maltol and ethyl maltol monoglucoside, with a series of its maltooligo-glucosides by transglycosylation with dextrin as a donor, and maltol or ethyl maltol as an acceptor. The monoglucoside formed from reaction mixture of maltol or ethyl maltol by the successive actions of Bacillus stearothemophilus cyclodextrin glucanotransferase and Rhizopus glucoamylase was isolated by Diaion HP-20 column and silica gel column chromatography. The structure of the isolated monoglucoside was identified as maltol-$\alpha$-D-glucoside and ethyl maltol-$\alpha$-D-glucoside, respectively, by FAB-MS, UV, $^1$H-NMR, $^{13}$ C-NMR spectra and products by hydrolysis with acid, $\alpha$ - and $\beta$ -glucosidases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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