This study was to investigate the effect of flavonoid treatment on in vitro development of bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos, and their pregnancy and delivery rate after embryo transfer into recipient. In experiment 1, to optimize the flavonoid concentration, parthenogenetic day 2 ($\geq$ 2-cell) embryos were cultured in 0 (control), 1, 10 and $20\;{\mu}M$ flavonoid for 6 days. In the results, in vitro development rate was the highest in $10\;{\mu}M$ flavonoid group (57.1%) among treatment groups (control, 49.5%; $1\;{\mu}M$, 54.2%; $20\;{\mu}M$, 37.5%), and numbers of total and ICM cells were significantly (p<0.05) higher in $10\;{\mu}M$ flavonoid group than other groups. We found that $10\;{\mu}M$ flavonoid treatment can significantly (p<0.05) decrease the apoptotic index and derive high expression of anti-oxidant, anti-apoptotic, cell growth and development marker genes such as Mn-SOD, Survivin, Bax inhibitor, Glut-5, In-tau, compared to control group. In experiment 2, to produce the cloned Jeju Black Cattle, beef quality index grade 1 bull somatic cells were transferred into enucleated bovine MII oocytes and reconstructed embryos were cultured in $10\;{\mu}M$ flavonoid added medium. When the in vitro produced day 7 or 8 SCNT blastocysts were transferred into a number of recipients, $10\;{\mu}M$ flavonoid treatment group presented higher pregnancy rate (10.2%, 6/59) than control group (5.9%, 2/34). Total three cloned Jeju Black calves were born. Also, two cloned calves in $10\;{\mu}M$ flavonoid group were born and both were all healthy at present, while the one cloned calf born in control group was dead one month after birth. In addition, when the result of short tandem repeat marker analysis of each cloned calf was investigated, microsatellite loci of 11 numbers matched genotype between donor cell and cloned calf tissue. These results demonstrated that the flavonoid addition in culture medium may have beneficial effects on in vitro and in vivo developmental capacity of SCNT embryos and pregnancy rate.
The objective of the present study was to evaluate the potential antidiabetic and antioxidant effect of the ethanol extract from Chrysanthemum cornarium L. var. spatiosum(CSE) against alloxan-induced oxidative stress in pancreatic ${\beta}$-cells, HIT-T15. In this study, the antidiabetic effect of CSE was examined using the 3-(4,5-dimethylthiazolyl-2)-2,5-diphenyltetrazoliu bromide(MTT) cell proliferation assay, lactate dehydrogenase(LDH) release assay, $NAD^+$/NADH ratio and insulin secretion. To further investigate whether CSE is involved in the antioxidant activity of alloxan-damaged HIT-T15 cells, its antioxidant effect against alloxan-induced oxidative stress was measured in HIT-T15 cells by determining the levels of antioxidant enzymes including superoxide dismutase(SOD), glutathione S-transferase(GST), glutathione reductase(GR) and glutathione peroxidase(GPx). The results of this analysis showed that alloxan significantly decreased cell viability, increased LDH leakage, and lowered $NAD^+$/NADH ratio and insulin secretion in HIT-T15 cells. However, CSE significantly increased the viability of alloxan-treated cells and lowered LDH leakage. The intracellular NAD+/NADH ratio and insulin secretion were also significantly increased by 1.7-fold and 1.3-fold, respectively, after treatment with 100 ${\mu}g/m{\ell}$ CSE. The HIT-T15 cells treated with alloxan showed significant decreases in the activities of antioxidant enzymes, while CSE significantly elevated the levels of antioxidant enzymes. These findings suggest that CSE could have a protective effect against cytotoxicity and dysfunction of pancreatic cells in the presence of alloxan-induced oxidative stress.
본 연구는 췌장베타세포인 HIT-T15 세포를 이용하여 매실주정추출물(PME)의 alloxan에 의한 산화스트레스로부터의 세포보호, 인슐린 분비능 및 항산화 효소 활성을 평가하였다. PME는 alloxan에 의해 유발된 산화스트레스로부터 세포를 보호하여 세포생존율을 증가시켰다. PME는 세포막 손상지표인 LDH 방출을 억제하였고 $NAD^+$/NADH ratio를 유의적으로 증가시켜 세포사멸이 억제되어짐을 확인하였다. 또한 alloxan 단독처리군에 비해 250 ${\mu}g$/ml PME 처리군에서 인슐린 분비량이 유의성 있게 증가하였다. Alloxan과 PME를 동시에 처리하여 HIT-T15세포의 항산화효소 활성을 측정했을 때 산화스트레스에 의해 감소되었던 항산화효소 활성이 PME에 의해 보호되는 효과를 확인하였다. 이상의 연구결과로부터 PME는 세포괴사 및 DNA fragmentation을 억제하고 세포내 항산화효소 활성을 증가시켜 alloxan에 의해 유발된 산화스트레스로부터 췌장베타세포를 보호하고 이에 따른 인슐린 분비능 조절 효과가 있는 것으로 생각된다.
This study was conducted to explore the effects of squid ink on growth performance, immune functions and antioxidant ability of broiler chickens during a period of six weeks. Either sex Arbor Acres broilers were equally allotted to 4 groups with 3 replicates of 20 chickens each. Broilers diets for the 4 test groups were prepared separately with starter and finisher phases. Control chickens were fed with basal diet and birds of group Exp 2, Exp 4 and Exp 6 were fed with the basal diet supplemented with 2%, 4% and 6% of squid ink, respectively. Broilers were sacrificed to investigate antioxidant parameters of sera, indices of thymus, spleen and bursa of fabricius and spleen lymphocyte proliferation, as well as growth performance on the $21^{th}$ and $42^{th}$ day. The results revealed that, i) squid ink promoted growth performance of broilers during days 22 to 42 and the whole trial period (p<0.05 or p<0.01); ii) squid ink elevated relative weight of the three immune organs during the starter phase and spleen lymphocyte proliferation throughout the experiment (p<0.05); iii) squid ink increased SOD activity and decreased MDA level in sera from broilers during the whole period (p<0.05). The above results suggest that squid ink could improve growth performance, antioxidant ability and immune functions of growing broiler chickens and be employed in the development of feed additives for animals.
Ryu, Jaihyunk;Kwon, Soon-Jae;Ahn, Joon-Woo;Jo, Yeong Deuk;Kim, Sang Hoon;Jeong, Sang Wook;Lee, Min Kyu;Kim, Jin-Baek;Kang, Si-Yong
Journal of Plant Biotechnology
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제44권2호
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pp.191-202
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2017
Chemical compounds from four different tissues of the kenaf plant (Hibiscus cannabinus), a valuable medicinal crop originating from Africa, were examined to determine its potential for use as a new drug material. Leaves, bark, flowers, and seeds were harvested to identify phytochemical compounds and measure antioxidant activities. Gas chromatography mass spectrometry analyses identified 22 different phytocompounds in hexane extracts of the different parts of the kenaf plant. The most abundant volatile compounds were E-phytol (32.4%), linolenic acid (47.3%), trisiloxane-1,1,1,5,5,5-hexamethyl-3,3-bis[(trimethylsilyl)oxy] (16.4%), and linoleic acid (46.4%) in leaves, bark, flowers, and seeds, respectively. Ultra-high performance liquid chromatography identified the major compounds in the different parts of the kenaf plant as kaemperitrin, caffeic acid, myricetin glycoside, and p-hydroxybenzoic acid in leaves, bark, flowers, and seeds, respectively. Water extracts of flowers, leaves, and seeds exhibited the greatest DPPH radical scavenging activity and SOD activity. Our analyses suggest that water is the optimal solvent, as it extracted the greatest quantity of functional compounds with the highest levels of antioxidant activity. These results provide valuable information for the development of environmentally friendly natural products for the pharmaceutical industry.
Low temperature is one of the major environmental factors that affect productivity including reduced growth and budding of vines, and changes of metabolic processes in grape (Vitis spp.). To screen the specific expression of abiotic stress-related genes against cold treatment in 'Kyoho' and 'Campbell Early' grapevines, expression of various defense-related genes was investigated by RT-PCR and real-time PCR. Among the 67 genes analyzed by RT-PCR and real-time PCR, 17 and 16 types of cDNA were up-regulated, while 5 and 6 types were down-regulated in cold-treated 'Kyoho' and 'Campbell Early' grapevines, respectively. Genes encoding carotene (Cart3564 and Cart4472), chalcone isomerase (CHI), cytochrome P450 (CYP), flavonol synthase (FLS), endo-${\beta}$-glucanase precursor (Glu), glutathione peroxidase (GPX), glutathione-S-transferase (GST), leucine-rich repeats (LRR), manganese superoxide dismutase (Mn-SOD), phenylalanine ammonia lyase (PAL), polygalacturonase-inhibiting protein (PGIP), proline rich protein 2 (PRP2), small heat shock protein (sHSP), temperature induced lipocalin (TIL), and thaumatin-like protein (TLP) were up-regulated, while those encoding CBF like transcription factor (CBF1), chitinase-like protein (CLP), cold induced protein (CIP), glycerol-3-phosphate acyltransferase (GPAT), and mitogen-activated protein kinase (MAPK) were down-regulated by low temperature treatment in both in 'Kyoho' and 'Campbell Early'.
The current investigation was carried out to find out the anticancer activity of the methanol extract from Buplerum falcatum against cancered ICR mouse and cancer cell lines such as J774A.1 and L1210 cells. Extract of Buplerum falcatum displayed the considerable augmentation(134%) of the survival of ICR mouse bearing Sarcoma 180 cancer. In addition, the cytotoxic effects of methanol extract of Buplerum falcatum against J774A.1 cells and L1210 cells were found to show $IC_{50}$ values of $57.3\;{\mu}g/ml$ and $54.6\;{\mu}g/ml$, respectively. In contrast to such cytotoxicity against cancer cells, the extract exerted only meagre toxicity against normal lymphocytes. The increased generation of $O_2^-$ and the considerably increased activities of super-oxide dismutase(SOD) and glutathione peroxidase(GPx) of both J774A.1 cells and L1210 cells in the presence of Buplerum falcatum extract implied that the observed cytotoxicities may have resulted from the detrimental effect of reactive oxygen species(ROS) evoked by Buplerum falcatum extract on the cancer cells.
Several theories emphasize that aging is closely related to oxidative stress and disease. The formation of excess ROS can lead to DNA damage and the acceleration of aging. Vigna angularis is one of the important medicinal plants in Korea. We isolated vitexin from V. angularis and elucidated the lifespan-extending effect of vitexin using the Caenorhabditis elegans model system. Vitexin showed potent lifespan extensive activity and it elevated the survival rates of nematodes against the stressful environments including heat and oxidative conditions. In addition, our results showed that vitexin was able to elevate antioxidant enzyme activities of worms and reduce intracellular ROS accumulation in a dose-dependent manner. These studies demonstrated that the increased stress tolerance of vitexin-mediated nematode could be attributed to increased expressions of stress resistance proteins such as superoxide dismutase (SOD-3) and heat shock protein (HSP-16.2). In this work, we also studied whether vitexin-mediated longevity activity was associated with aging-related factors such as progeny, food intake, growth and movement. The data revealed that these factors were not affected by vitexin treatment except movement. Vitexin treatment improved the body movement of aged nematode, suggesting vitexin affects healthspan as well as lifespan of nematode. These results suggest that vitexin might be a probable candidate which could extend the human lifespan.
Kim, Myoung-Ok;Lee, Eun-Ju;Kim, Sung-Hyun;Park, Jun-Hong;Kyoungin-Cho;Jung, Boo-Kyung;Kim, Hee-Chul;Sol ha Hwang;Kim, Sun-Jung
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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pp.45-45
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2003
Human papillomavirus type 16(HPV16) has been known to the major factor for the development of uterine cervical carcinomas. We have extended these studies to investigate the in vivo activities of HPV-16 E6/E7 when expressed in squamous epithelia of transgenic mice. Grossly, hK14HPV16E6/E7 transgenic mice had multiple phenotypes, including wrinkled skin that was apparent prior to the appearance of hair on neonates, thickened ears, and loss of hair in adults. In the transgenic mice, the wrinkled skin phenotype on the body and legs died at the age of 3∼4 weeks. Histological analysis of demonstrated that E6/E7 causes epidermal hyperplasia in multiple transgenic lineages with high penetrance. This epithelial hyperplasia was characterized by an expansion of the proliferating compartment and an expansion of the keratinocyte and was associated with hyperkeratosis. These transgenic mice expressed E6/E7 transgene mainly in skin, heart, pancreas and kidney. Hyperplasia was found at the skin. The enzyme activities of GR, GPx and CuZnSOD were measured from the transgene cause keratinocyte at the skin. The specific enzyme activities were significantly higher in transgenic mice skin compared to the normal mice skin. Thus these transgenic mice may be useful for the develpment of antioxidant enzymes or other therapies for HPV-associated hyperkeratosis.
To elucidate the effect of soy isoflavone supplementation on bone mineral density and antioxidant enzyme activity in 60 postmenopausal women residing in Iksan area were recruited. There were 31 participants in the treatment group and 29 in the control group. The treatment group consumed isoflavone extract capsules daily (which contained 90 mg of soy isoflavones) for 12 weeks. The study compared before and after isoflavone intake in the following areas. Physical examination, diet survey, bone mineral density (BMD) and antioxidant enzyme activity (superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), catalase (CAT) and total antioxidant capacity (TA)). The average age of the treatment group was 64.6 years and that of the control group was 66.5 years. There were no significant differences between the two groups in terms of height, weight and body mass index. Both groups maintained a regular diet pattern in terms of their average daily nutrient intake. There were no significant differences between the treatment group (23.3 mg) and the control group (24.0 mg) in terms of daily isoflavone intake based on diet. Isoflavone supplementation of 12 weeks did not resulted in any significant changes in BMD or parameters of antioxidant enzyme activity, implying the necessity of more intensive intervention for a substantial change. In conclusion, this study revealed that antioxidant enzyme activity holds a significant relationship with the bone mineral density in postmenopausal women and further systematic research on dose and period of isoflavone supplementation is needed to clearify the positive effect of isoflavone on BMD and/or blood antioxidant capacity in postmenopausal women.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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