Mechanical stimulation is known to activate several cellular signal transduction pathways, leading to the induction of signaling molecules and extracellular matrix (ECM) proteins, thereby modulating cellular activities, such as proliferation and survival. In this study, primary human dermal fibroblasts (HDFs) were seeded onto chitosan-based scaffolds, and then cultured for 3 weeks in a bioreactor under a cyclic strain of 1 Hz frequency. Compared to control samples cultured under static conditions, the application of a cyclic strain stimulated the proliferation of HDFs in I week, and by week 3 the thickness of the cell/scaffold composites increased 1.56 fold. Moreover, immunohistochemical staining of the culture media obtained from the cell/scaffold samples subjected to the cyclic strain, revealed increases in the expression and secretion of ECM proteins, such as fibronectin and collagen. These results suggest that the preconditioning of cell/scaffold composites with a cyclic strain may enhance the proliferation of HDFs, and even facilitate integration of the engineered artificial dermal tissue into the host graft site.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.33
no.3
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pp.211-220
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2007
Objective: In organotypic culture of immortalized human oral keratinocytes (IHOK), the change of the growth and differentiation was investigated according to the fibroblast type and the involvement of mitogen-activated protein (MAP) kinase. Materials & Methods: IHOK was cultured three dimensionally with gingival fibroblast (GF), dermal fibroblast (DF) and immortalized gingival fibroblast (IGF). We characterized biologic properties of three dimensionally reconstructed IHOK by histological, immunohistochemical, and Western blot analysis. We also investigated whether MAP kinase pathway was involved in epithelial-mesenchymal interaction by Western blot analysis. Results: The best condition of three dimensionally cultured IHOK was the dermal equivalent consisting of type I collagen and IGF. IGF increased the expression of more proliferating cell nuclear antigen (PCNA), involucrin than GF and DF in response to co-culture with IHOK. Extracellularly regulated kinase (ERK) pathway was activated in organotypic co-culture with IGF. Conclusion: The organotypic co-culture of IHOK with dermal equivalent consisting of type I collagen and IGF resulted in excellent morphologic and immunohistochemical characteristics and involved ERK pathway. The epithelial-mesenchymal interaction was activated according to the fibroblast type.
Lee, Jae Yun;Park, Seo A;Woo, Won Hong;Mun, Yeun Ja
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.33
no.1
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pp.63-67
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2019
Interaction between epidermis and dermis plays an important role in wound healing and hair follicle formation. This study focused on investigating the potency of ethanol extract of Puerariae Radix (EPR) as cosmetic ingredient using human dermal fibroblasts (hDFn). Our results revealed that EPR suppressed collagenase activity dose-dependently. EPR inhibited activity of $5{\alpha}$-reductase I and II at the final concentration of $25{\mu}g/ml$ in hDFn cells. Also, EPR promoted the proliferation and the ERK activation of cells. ERK phosphorylation by EPR was blocked by specific inhibitor of ERK, PD98059. EPR-induced cell proliferation was blocked by PD98059. This means that EPR could promote the proliferation of hDFn cells via the activation ERK. Collectively, these results suggest that EPR may be used as a new cosmetic ingredient.
Abraao Moratelli Prado;Cimara Fortes Ferreira;Luismar Marques Porto;Elena Riet Correa Rivero;Ricardo de Souza Magini;Cesar Augusto Magalhaes Benfatti;Jair Rodriguez-Ivich
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.54
no.1
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pp.25-36
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2024
Purpose: Mucogingival defects (MGDs), such as dental root recessions, decreased vestibular depth, and absence of keratinized tissues, are commonly seen in dental clinics. MGDs may result in functional, aesthetic, and hygienic concerns. In these situations, autogenous soft tissue grafts are considered the gold-standard treatment. This study compares the healing process of free gingival grafts (FGGs) to bacterial cellulose matrix (BCM) and human acellular dermal matrix (ADM) seeded with fibroblasts from culture supplemented with platelet-rich plasma in a rat model. Methods: Surgical defects were made in rats, which received the following treatments in a randomized manner: group I, negative control (defect creation only); group II, positive control (FGG); group III, BCM; group IV, BCM + fibroblasts; group V, ADM; and group VI, ADM + fibroblasts. Clinical, histological, and immunological analyses were performed 15 days after grafting. Clinical examinations recorded epithelium regularity and the presence of ulcers, erythema, and/or edema. Results: The histological analysis revealed the degree of reepithelization, width, regularity, and presence of keratin. The Fisher exact statistical test was applied to the results (P<0.05). No groups showed ulcers except for group I. All groups had regular epithelium without erythema and without edema. Histologically, all groups exhibited regular epithelium with keratinization, and myofibroblasts were present in the connective tissue. The groups that received engineered grafts showed similar clinical and histological results to the FGG group. Conclusions: Within the limitations of this study, it was concluded that BCM and ADM can be used as cell scaffolds, with ADM yielding the best results. This study supports the use of this technical protocol in humans.
Human skin is continuously exposed to ultraviolet (UV)-induced photoaging. UVA increases the activity of MMP-1 in dermal fibroblasts through mitogen-activated protein kinase (MAPK), p38, signaling. The irradiation of keratinocytes by UVA results in the secretion of the inflammatory cytokine, tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), and the stimulation of MMP-1 in normal human dermal fibroblasts (NHDFs). Lipoteichoic acid (LTA) is a component of the cell wall of gram-positive Lactobacillus spp. of bacteria. LTA is well known as an anti-inflammation molecule. LTA of the bacterium Lactobacillus plantarum has an anti-photoaging effect, but the potential anti-photoaging effect of the other bacteria has not been examined to date. The current study showed that L. sakei LTA (sLTA) has an immune modulating effect in human monocyte cells. Our object was whether inhibitory effects of sLTA on MMP-1 are caused from reducing the MAPK signal in NHDFs. It inhibits MMP-1 and MAPK signaling induced by UVA in NHDFs. We also confirmed effects of sLTA suppressing TNF-${\alpha}$ inducing MMP-1 in NHDFs.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.39
no.1
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pp.9-17
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2013
We studied the anti-oxidant and anti-aging activities of Sericinjam Gland Hydrolysate (SJGH) in the human dermal fibroblasts. SJGH effectively defended cell death and ROS generation under high H2O2 in human dermal fibroblasts. Moreover SJGH reduced the expression of SA-${\beta}$-Gal and MMP-1 under low concentration of $H_2O_2$ whereas biosynthesis of procollagen-I was increased. This results demonstrate the anti-oxidant and anti-aging activities of SJGH. SJGH could be a good candidate for anti-aging cosmetics ingredient.
Saponin is a main component of ginseng widely known as an oriental traditional medicinal ingredient. A variety of biological effects of saponin has been reported, but its action related to skin regeneration has remained unclear so far. In this study, the effect of saponin on matrix metalloproteinase as well as its antioxidant effect in cell free system was examined in human dermal fibroblasts. First of all, as a result of investigating the effect of saponin on cell viability using MTT assay, it was shown to increase cell viability below 10 ${\mu}g$/ml, but it also showed cytotoxicity above 25 ${\mu}g$/ml. The antioxidant effect of saponin was exerted by inhibition of $H_2O_2$ in addition to reducing power above 1 ${\mu}g$/ml. In particular, saponin showed a protective effect on DNA oxidation. Furthermore, it was observed that saponin activates MMP-2 and increases MMP-1 activity in gelatin and casein zymography analyses, respectively, indicating that saponin could have potential a therapeutic agent for anti-aging and skin regeneration.
Phlorotannins which is oligomeric polyphenol of phloroglucinol unit were isolated from solvent fractions of methanolic extract of the brown alga, Ecklonia cava (EC). The inhibitory effects of phlorotannins from EC solvent fractions on oxidative stress were examined in human dermal fibroblasts (HDFs) related to wrinkle formation. Among the solvent fractions, phlorotannins from ethyl acetate fraction exerted the highest scavenging effect on DPPH radical, hydroxyl radical and alkyl radical analyzed by electron spin resonance (ESR) spectroscopy. The levels of intracellular reactive oxygen species (ROS) and lipid peroxidation were measured using 2',7'-dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA) and diphenyl-1-pyrenylphosphine (DPPP), respectively. Their levels were significantly decreased in the presence of phlorotannins from ethyl acetate fraction, compared with other fractions obtained from EC extract (P < 0.01). Furthermore, intracellular glutathione (GSH) level was significantly increased in a time dependent manner by the phlorotannins. Therefore, these results suggest that phlorotannins from EC extract could have a therapeutic potential for prevention and treatment of several diseases such as wrinkle formation related to oxidative stress.
Besides using for hair removal, depilatory agents have been considered to be used as a penetration enhancer for transepidermal drug delivery. To examine the effect in hair follicles (HFs), two commercially available depilatory creams were tested on the dorsal skin of mice to monitor the effect deep into the skin structure. Fifteen male BALB/c mice were used in this study. Depilatory creams were applied to the dorsal skin of the same animal using shaved and untouched treatments as controls to minimize individual differences. Skin samples were collected at three days, one week and two weeks (n = 5 for each) after the treatment, and subjected for hematoxylin-eosin staining, and immunohistochemical analysis for proinflammatory cytokines. The morphological examination showed an increase in the thickness of epidermal layer of the depilatory cream-treated skin at early time points and in the subcutis at two weeks. Depilatory cream promoted entry of anagen phase and increased the number of hair follicles in the subcutis at one and two weeks. Immunohistochemistry showed elevated percentages of dermal fibroblasts expressing interleukin-6, tumor necrosis factor-α, and tumor necrosis factor-β. Shaving process increased the thickness of epidermis and dermis as depilatory creams did, but did neither induce the expression of proinflammatory cytokines in the dermal fibroblasts nor the number of HFs. The results suggested that the commercially available depilatory creams caused a transient minor inflammatory response of the skin and increased the levels of cytokines that might subsequently affect hair growth.
We investigated the protective effects of antioxidant fractions from a 70% ethanolic extract of Hizikia fusiformis in human dermal fibroblasts (HDFs). Powdered H. fusiformis was extracted with 70% ethanol and then partitioned into three fractions according to polarity using n-hexane (HFH), chloroform (HFC), and ethyl acetate (HFEA). Antioxidant activity was observed in HFEA at 0.66 mg/mL based on the half maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), and at 0.24 mg/mL based on alkyl radical scavenging. The protective effects of the HFEA antioxidant fraction against 2,2-azobis-(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-damaged HDFs and the expression of Type I procollagen in HDFs were examined. HFEA caused the proliferation of HDFs with and without AAPH treatment and protected against AAPH damage to HDFs in a dose-dependent manner ($50-200{\mu}g/mL$). This implies that the antioxidant properties of the fractions depended on their proliferative and protective effects. The HFEA antioxidant fraction had significant effects and caused the dose-dependent expression of Type I procollagen, an important anti-wrinkle protein, in HDFs. In conclusion, antioxidant substances in H. fusiformis were found in the ethyl acetate fraction, and the resulting HFEA may have cosmetic applications.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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