Deoxynivalenol producing isolates of Fusarium Graminearum R 6576 was grown on rice for 25 days at 19,25 and $28^{\circ}C$. Maximum production of deoxynivalenol(DON) by Fusarium graminearum R 6575 occurred at $28^{\circ}C$ and 20 days. Maximum concentration of 940 ppm DON were obtained after 20 days at an initial moisture content of 40%. A DON derivative, 15-acetyl-DON (15-ADON), was also found at concentrations of 150~300ppm after 5~10 days. Crude culture extracts were purified by water-saturated silica gel column chromatography which selectivity extracted DON when methylene chloride was as the mobile phase. Purity of crystallized DON was verified by thin layer and high performance liquid chromatography. Also this method was advantage method or production of DON and require little organic sorbent than the other methods.
Mice were fed semi-purified diets containing 0, 2, 10 and 25 ppm(mg/kg) deoxynivalenol over 8 weeks and were assessed for effects on bodyweight gain, serum immunolglobulin levels and surface immunoglobulin bearing lymphocyte ratio. 1. The rate of body-weight gain was significantly reduced (p<0.05) at the 10 and 25 ppm of DON, whereas the mice ingesting the diet containing 2 ppm DON was not. 2. IgA in serum immunolglobulin was significantly increased (P<0.05) at the 10 and 25 ppm of DON, but IgG, IgM were decreased, whereas exposure to 2 ppm DON was not change. 3. Concentration of IgA from Peyer's patch of mice fed DON exhibited increased at 10, 25 ppm. 4. Lymphocytes surface marker studies revealed that IgA, IgG and IgM were 2.2%, 0.4% and 1.5% respectively. These results suggest that dietary exposure to DON alters regulation of IgA production
In order to evaluate the safety of agricultural products in Korea, we carried out work by screening of Fusarium species. which can produce deoxinivalenol(DON) from agricultural products in Western Gyeongnam, Korea. From 215 samples of soil agricultural products, 129 strains of Fusarium species were obtained. The production of DON was verified by thin layer chromatography(TLC) As the results of TLC, 25 strains were identified as DON producing strain. But only 10 strains were identified as DON producing strains by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The maximum DON producing strain No.41 was isolated from corn. In conclusion. the above results indicate that DON producing fungi contaminated agricultural products in Korea. Therefore further studies are required to accumulate more detailed data about the contamination of DON in various agricultural products.
Fusarium mycotoxin deoxynivalenol (DON) contents and its critical quality parameters were analyzed using two-rowed, six-rowed, and hulless barleys. DON content in the two-rowed Korean barleys was lower than that in the six-rowed barleys. The average DON contents of six-rowed, two-rowed, and hulless barleys were 1.35 ppm, 0.36 ppm, and 0.49 ppm, respectively. The DON content was reduced by 6.2% by sieving, by 6.0% by washing with water and by 18.1-69.8% by treatment with aqueous chemical solutions. Of the reagents investigated, aqueous sodium bicarbonate gave the greatest reduction in the barley DON level. The DON content was reduced to 62.5% of initial level after 3 days of steeping and to 23.1% after 3 days of germination. DON was not detected after steeping barley for 24 hr in 0.1M $Na_2CO_3$ solution with 0.1 % activated carbon.
This study examined the effects of pearling, simple heating, baking and extrusion in processing of barley contaminated with deoxynivalenol (DON) on the reduction or destruction of DON. The DON contamination level of barley used in the experiment was 2.08 ppm. The DON-forming strain isolated from the barley was Fusarium graminearum, and the DON formation potential of which was 6.3 ppm on the average in Czapek-Dox broth medium. The DON removal efficiency of pearling was 56.5%, simple heating 3.8-32.7%, extrusion 53-59%, and baking 10.4%. As a large quantity of DON still remains after processing, it tis necessary to develop a new method of removing DON comletely.
Deoxynivalenol (DON)-contaminated barley was treated with 0.1 M $Na_2CO_3$ solution to reduce DON content. DON content of barley was reduced from 2.08 to 0.67 ppm. Bread was made with 10, 20, and 30% DON-reduced barley flour added to white wheat flour. Farinogram showed water absorption and arrival time increased, while stability and mechanical tolerance index decreased when DON-reduced barley flour was added to white wheat flour. Gelatinization temperature, temperature at maximum viscosity, and maximum viscosity increased in amylogram with increasing addition of DON-reduced barley flour. Loaf volume of bread decreased with increasing amount of DON-reduced barley flour, while loaf weight increased. Barley flour pH increased by treatment with$Na_2CO_3$, and pH reduction decreased fermentation rate of yeast. Volume and size of gluten matrix decreased and crumb hardened in bread made with DON-reduced barley flour. Acceptabilities for color and texture were low in bread made with DON-reduced barley flour. Addition of DON-reduced barley flour at 30% reduced overall acceptability, whereas no significant difference in overall acceptability was observed when DON-reduced barley flour was added at 10 and 20%.
In order to evaluate the safety of greenhouse horticulture products in Korea, we carried out this work by screening of Fusarium species, which produce deoxynivalenol (DON) from greenhouse horticulture in Western Gyeongnam and Northern Gyeongbuk, Korea. For this study, high sensitive enzyme-linked immunosorbent assay, ALP/NADP method, was applied to detection of DON by enzyme amplification system. From 192 samples of greenhouse horticulture soil and its products, 103 isolates of Fusarium species were obtained. The isolates were cultured at 28C for 15 days and the cultured mediums were extracted by ethyl acetate. The production of DON was verified by thin layer chromatography (TLC). As the results of TLC, 8 strains were identified as DON producing strain. We screened potential producers of DON by ALP/NADP. The levels of DON production were shown from 0.007 to 1.21 g/ml of YES medium. The maximum DON producing strain No. 32-D-3 was isolated from soil in Namhae, Korea. In conclusion, the above results indicate that DON producing fungi contaminated greenhouse horticulture products in Korea. Therefore, further studies are required to accumulate more detailed data about the contamination of DON in various cereals.
In order to develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for deoxynivalenol (DON) in com, we produced a specific monocl- onal antibody and established ELISA conditions. After the spleen cells from mice immunized with DON-bovine serum albumin conjugate were fused with S$_{p}$2/0 myeloma cells, a hybridoma cell 3G7 producing anti-DON antibody was screened by ELISA. From the standard curve of competitive direct ELISA (cdELISA) using 3G7 monoclonal antibody and DON-HRP conjugate, the detection range of DON showed 3-3,000 ng/ml (ppb). The monoclonal antibody showed some cross-reactivities against DON analogues such as 15 acetyl-DON (110%), nivalenol (5.0%), 3 acetyl-DON (1.7%), fusarenon-x (0.72%), and T-2 (0.59%). When the cdELISA was applied to the spiked coms after extracting with 60% methanol and diluting 5- fold with washing buffer, the assay recoveries of DON were 313, 163, 106, and 88.9% (av., 168%) in the levels of 200, 600, 2,000, and 6,000ng/g, respectively. For the quantitation of DON in coms, 30 samples kept under two different storage conditions of cold and room temperature were assayed by cdELISA. The mean detection concentrations were 595 (detection range, 0-2,750) and 2,448 (detection range, 0-4,500) ppb, respectively.
Deoxynivalenol (DON) is the most common mycotoxin contaminant of cereal-based food and animal feed. The toxicity of DON is very low compared to that of other toxins; however, the most prominent signs of DON exposure include inappetence and body weight loss, which causes considerable economic losses in the livestock industry. This review summarizes critical studies on biological DON mycotoxin mitigation strategies and the respective in vitro and in vivo intestinal effects. Focus areas include growth performance, gut health in terms of intestinal histomorphology, epithelial barrier functions, the intestinal immune system and microflora, and short-chain fatty acid production in the intestines. In addition, DON detoxification and modulation of these parameters, through biological supplements, are discussed. Biological detoxification of DON using microorganisms can attenuate DON toxicity by modulating gut microbiota and improving gut health with or without influencing the growth performance of pigs. However, the use of microorganisms as feed additives to livestock for mycotoxins detoxification needs more research before commercial use.
Deoxynivalenol (DON) is the most common mycotoxin contaminant of food or feed worldwide and causes disease in animals. Lauric acid (LA) is a medium-chain fatty acid useful for barrier functions such as antimicrobial activity in the intestine of monogastric animals. However, the molecular mechanisms by which lauric acid exerts its effects on the deoxynivalenol-exposed small intestine have not been studied. We used an intestinal porcine epithelial cell line (IPEC-J2) as an in vitro model to explore the molecular mechanism of lauric acid in alleviating deoxynivalenol-induced damage. We found that lauric acid reversed deoxynivalenol-induced reduction in cell viability. Our quantitative real-time polymerase chain reaction results indicated that lauric acid alleviated deoxynivalenol-induced apoptosis through Annexin-V. Additionally, immunofluorescence and Western blotting showed that lauric acid attenuated deoxynivalenol-induced forkhead box O3 (FOXO3a) translocation into the nucleus. These results suggest that lauric acid attenuates forkhead box O3 translocation in the small intestine damaged by deoxynivalenol, thereby reducing apoptosis. In conclusion, this study found that lauric acid alleviates deoxynivalenol-induced damage in intestinal porcine epithelial cell line through various molecular mechanisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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