본 연구는 배양 NIH3T3 섬유모세포를 재료로 독성물질인 염화카드뮴($CdCl_2$)의 세포독성과 이에 대한 애기똥풀(Chelidonium majus, CM) 추출물의 방어효과를 조사하기 위하여 세포생존율(cell viability)을 비롯한 $CdCl_2$에 대한 BHT의 영향 및 DPPH-자유라디칼 소거능, superoxide anion-radical scavenging activity (SSA), lactate dehydrogenase (LDH) 활성과 같은 항산화 효과를 분석하였다. 그 결과 $CdCl_2$는 농도 의존적으로 배양 NIH3T3 섬유모세포의 생존율을 유의하게 감소하였으며, $XTT_{50}$값이 38.7uM로 나타나 Borenfreund와 Puerner의 독성판정기준에 따라 고독성(highly-toxic)인 것으로 나타났다. 또한, 항산화제인 BHT는 $CdCl_2$의 독성으로 인하여 심하게 손상된 세포생존율을 유의하게 증가시켰다. 한편, $CdCl_2$의 세포독성에 대한 CM 추출물의 방어효과에서, CM 추출물은 $CdCl_2$에 의하여 감소된 세포생존율을 유의하게 증가시켰으며, 또한 DPPH-자유라디칼 소거능을 비롯한 SSA 및 LDH 활성 억제와 같은 항산화능을 나타냈다. 이상의 결과에서 $CdCl_2$의 독성에 산화적 손상이 관여하고 있으며, CM 추출물은 항산화 효과에 의하여 $CdCl_2$의 세포독성에 대한 방어효과를 나타냈다. 결론적으로, CM 추출물과 같은 천연소재는 산화적 손상과 관련된 독성의 제독 내지는 저감을 위한 항산화물질로서의 개발적 가치가 있다고 사료된다.
Anti-inflammatory and anti-oxidant effect of Spirodela polyrrhiza (Lemnaceae), a widely used traditional medicinal plant were investigated. In macrophages nitric oxide (NO) is released as an inflammatory mediator and has been proposed to be an important modulator of many pathophysiological conditions including inflammation. 85% MeOH extracts of S. polyrrhiza (0.01, 0.1, 1 mg/mL) suppressed nitric oxide production in interferone-$\gamma$ (IFN-$\gamma$) and lipopoloysaccharide(LPS)-stimulated macrophages. It also attenuated the expression of inflammatory enzymes like inducible NOS (iNOS) and cyclooxygenase-2(COX-2) as assessed by immunoblotting with specific antibodies. Moreover, the values obtained with DPPH radical, superoxide anion and NO radical scavenging assay showed that S. polyrrhiza has potent antioxidant properties as a natural ROS scavenger. The results of the present study suggest the potential use of S. polyrrhiza in the treatment of ROS-mediated chronic inflammatory diseases such as atherosclerosis and rheumatoid arthritis.
본 연구에서는 익모초 추출물의 항산화 효과 및 자외선으로 유도된 각질형성세포 손상에 대한 보호효과를 확인하고자 익모초 열수 추출물의 생체 내 산화적 스트레스와 관련되어 있는 DPPH radical, hydroxyl radical, hydrogen peroxide, superoxide radical, lipid peroxidation에 대한 익모초 열수추출물의 소거효과 및 환원력 평가 시험을 진행하였으며, 사람 각질형성세포주인 HaCaT 세포주에서 UVB로 유도된 apoptosis에 대한 익모초의 억제 정도를 확인하였다. 그결과, 익모초 열수추출물에서 농도 의존적으로 항산화 효과가 증가함을 확인할 수 있었으며, UVB로 유도된 apoptosis에 발현 또한 억제됨을 확인할 수 있었다. 현재 국내외적으로 천연물에 대한 항산화 활성에 대한 연구가 활발히 진행되고 있는데, 이를 바탕으로 하는 피부 보호 효과에 대한 연구는 항노화 측면에서 그 효용가치가 높다고 여겨진다. 따라서 본 실험 연구의 결과를 토대로 항산화 효과가 우수한 식물종에 대해 단일 물질에 대한 분리 작업과 함께 항노화 실험 뿐만 아니라 항염증이나 항암 등의 실험이 더깊이 있게 진행된다면 새로운 천연물 유래 생리 활성 물질로서 효과적이면서도 안전한 화장품 소재로의 활용 또한 가능할 것으로 기대된다.
Bupleury radix has been used for the treatment of fever, liver disease, inflammation in traditional medicine. The present study was carried out to evaluate the antioxidant effects of Bupleury radix aqua-acupuncture solution (BRAS) in vitro. Oxygen derived free radicals produced in the course of normal aerobic life, such as superoxide anion radical($O_2^-$ ), hydroxyl radicaI( OH), hydrogen peroxide($H_2O_2$) and singlet oxygen($^1O_2$) can attack polyunsaturated fatty acid in cell membranes, enzymes, other cell compounds, and give rise to lipid peroxidation, DNA damage, lipofuscin accumulation, structure alteration of cell membrane and cell death. In this study, antioxidant effects of BRAS on lipid peroxidation were determined according to the method of TBA. BRAS inhibited markedly peroxidation of linoleic acid during the autoxidation, and also inhibited lipid peroxidation induced by hydroxyl radical derived from $H_2O_2-Fe^{2+}$ in rat liver homogenate. And BRAS showed 30% scavenging effect on DPPH radical, also exhibited a 30% inhibitory effect on superoxide generation from xanthine-xanthine oxidase system. In addition, BRAS protected the cell death induced by tert-butyl hydroperoxide(t-BHP) and significantly increased cell viability in the normal rat liver cell(Ac2F).
피부병 치료에 사용되던 꿩의비름 추출물을 항산화 및 항염 효능을 지니는 천연물 소재로 활용하기 위해 꿩의비름의 뿌리(HER), 잎(HEL), 줄기(HEB), 지상부(HEAG) 추출물에 대해 항산화 활성을 측정한 결과 지상부 추출물인 HEAG에서 DPPH, ABTS, superoxide anion radical 소거 활성이 가장 우수하였으며, FRAP 활성 역시 HEAG에서 가장 우수하였다. 항산화 활성이 가장 우수한 HEAG의 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과 $235.5{\pm}18.96mg/g$ gallic acid equivalent로 항산화 및 항염 활성을 갖는 것으로 알려진 페놀성 화합물을 다량 함유하고 있는 것을 확인할 수 있었다. 또한 마우스 대식세포인 RAW264.7 세포를 이용하여 항염 활성에서는 NO의 생성을 억제하였으며 염증성 사이토카인인 $IL-1{\beta}$의 생성 억제 화성이 가장 높았다. 꿩의비름 추출물은 항산화 및 항염 활성의 천연물 소재로 활용이 가능할 것으로 여겨진다.
프로폴리스에서 분리한 MDQ 및 quercetin의 작용기에 따른 항산화 효과를 비교 분석하고 방사선 조사에 의한 DNA의 산화적 손상에 있어서 두 화합물이 어느 정도의 방어효과가 있는지를 측정 하고자 하였다. 두 화합물의 항산화 활성 시험(DPPH 라디칼 소거활성, 지질과산화 억제활성, superoxide anion 라디칼 소거활성)에서 quercetin이 MDQ보다 훨씬 강한 항산화 활성을 보였으며, 특히 superoxide anion라디칼 소거활성 시험에서 MBQ는 거의 활성을 보이지 않았지만 quercetin은 농도 의존적인 강한 소거활성을 보였다. 또한, mouse 림프구에서 방사선 조사에 의한DNA의 산화적 손상에 대한 두 화합물의 방어효과 시험에서 MDQ와 Quercetin은 동일 농도에서 거의 유사한 방사선 방어효과가 관찰되었다. 상기의 결과로부터 두 화합물의 작용기를 고려해 볼 때 B ring에 있는 catechol작용기의 존재 유무에 따라서 항산화 활성의 차이가 있으며 또한 MDQ화합물의 C ring에 존재하는 methoxy group은 quercetin에 존재하는 hydroxy group과 비교해 볼 때 항산화를 비활성화시키는 작용기의 하나로서 판단되어진다. 따라서 본 실험의 결과로 미루어 볼 때 방사선 방어 효과는 항산화 활성에 미치는 메카니즘과 유사하게 작용하는 것으로 판단되어지며 아울러 일차적으로 항산화 활성 물질을 검색함으로써 산화적 스트레스에 의한 DNA에 대한 방어물질 검색 수단으로서 유용할 것으로 사료된다. 이상의 결과로부터 프로폴리스는 산화적 스트레스에 대한 경감제로서 그 가능성이 시사되었다.
Antioxidative activities of Chlorophyta and Phaeophyta in Jeju Island were measured by superoxide anion ($O_2^{{\cdot}-}$), hydroxyl radical ($HO^{\cdot}$), hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and DPPH free radical scavenging assays. Methanolic and aqueous extracts of the seaweeds were prepared at both temperatures, higher (70$^{\circ}C$) and room temperature (20$^{\circ}C$), and screened for the construction of an extract bank from seaweeds in Jeju Island. A variety of extracts showed positive effect against reactive oxygen species (ROS). Especially, Sargassum thunbergii methanolic extract at 70$^{\circ}C$ (70ME, 97.41%), S. fulvellum methanolic extract at 20$^{\circ}C$ (20ME, 84.66%), Codium fragile aqueous extract at 70$^{\circ}C$ (70AE, 96.61%) and S. thunbergii 20ME (97.44%) exhibited the highest scavenging activities against $O_2^{{\cdot}-}$, $HO^{\cdot}$, $H_2O_2$ and DPPH free radicals, respectively. Total phenolic contents also examined but did not show a positive correlation with ROS scavenging abilities (except for a few extracts). These results indicate that further investigation is needed to identify and purify the responsible antioxidative components.
다양한 약용식물의 피부노화에 미치는 영향을 평가하였으며, 이 중 권백(Selaginella tamariscina)은 동양에서 암환자 치료를 위한 전통약용식물로 알려져 있다. 우리는 피부노화에 대한 화장품 소재로 권백에 대한 다양한 생물학적 평가를 하였다. 권백의 항산화 효과를 알아보기 위해 DPPH radical과 superoxide anion radical 소거효과를 측정하였다. 그 결과 DPPH radical의 $IC_{50}$ 값은 $65.1{\mu}g/mL$이고, xanthine/xanthine oxidase에 의한 superoxide anion radical의 $IC_{50}$ 값은 $40.9 {\mu}g/mL$이었다. 세포내 활성산소 소거평가를 위해 사람 진피 섬유아세포(human dermal fibroblast)를 배양하여 UVB $20 mJ/cm^2$에 의해 증가된 세포내 활성산소(ROS)가 권백을 처리함으로써 활성산소 소거효과가 증가하였다. 사람 진피 섬유아세포에서 UVA에 의해 발현된 MMP-1 단백질과 mRNA가 권백에 의해 농도 의존적으로 감소하였다. 뿐만 아니라, 권백은 zymography와 semi-quantitative RT-PCR을 이용하여 UVA 조사된 사람 진피 섬유아세포에 MMP-2 (gelatinase)의 활성 감소를 확인하였다. 결론적으로 권백은 자외선에 의한 세포손상을 보호하여 항노화 화장품의 새로운 소재로 이용될 것으로 사료된다.
This investigation was performed to study the antioxidant activities and the antimicrobial effect of plum (Santarosa, Oishiwase) extracts. Plums were extracted by ultrasound-assisted method and boiling method. All extracts of plums showed concentration-dependent inhibitory effects on the DPPH free radical scavenging activity. In the superoxide anion radical scavenging method, all the plum extracts showed lower activity than BHT. But in case of sonicate extract of Oishwase exhibited the highest activity in plum extracts. The antimicrobial effect of plums used for human skin- or oral cavity-presented strains; Bacillus cereus (KCTC 1012) and Staphylococcus aureus (KCTC 1927). Addition of plum extracts was used by autoclaved and filtrated. Each extract solution was added into culture media with several concentration and then the bacteria cell growth was investigated for 72 hours. The effect of antimicrobial activities showed in a higher Staphylococcus aureus than Bacillus cereus. Results indicate that the autoclaved sample showed a higher antimicrobial activity than did the filtrated sample.
Objectives: The objective of this study was to investigate the antioxidant effects of manufactured Wen-pi-tang-Hab-Wu-ling-san (WHW$^{(R)}$) in vitro. Methods: WHW$^{(R)}$ was prepared by the pilot manufacture of WHW water extract from a GMP system appointed company. Antioxidative activities were determined by in vitro tests as follows: the scavenging activities of oxygen free radicals including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical, superoxide anion, hydrogen peroxide and nitric oxide radicals, as well as ferrous ion chelating capacity and Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC). Results: WHW$^{(R)}$ significantly scavenged oxygen free radicals such as DPPH (IC$_{50}$=115.28 $\pm$ 0.25 $\mu$g/$m\ell$), superoxide anion (IC$_{50}$=8.56 $\pm$ 0.08 $\mu$g/$m\ell$), hydrogen peroxide (IC$_{50}$=240.36 $\pm$ 3.41 $\mu$g/$m\ell$) and nitric oxide (IC$_{50}$=162.28 $\pm$ 0.21 $\mu$g/$m\ell$) radicals. WHW$^{(R)}$ also showed ferrous ion chelating activity (IC$_{50}$=543.19 $\pm$ 4.85 $\mu$g/$m\ell$) and Trolox equivalent effects (IC$_{50}$=45.311 $\mu$g/$m\ell$) in TEAC and ORAC assay, respectively. Conclusion: This study demonstrates that WHW$^{(R)}$ has strong antioxidative properties through free radical scavenging activity. These data suggest that WHW$^{(R)}$ be used as an antioxidant agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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