International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제4권2호
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pp.163-168
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2002
We report for the first time the cDNA sequence encoding a ferritin subunit from the spiders Araneus ventricosus. The complete cDNA sequence of A. ventricosus ferritin subunit comprised 516 bp with 172 amino acid residues. The A. ventricosus ferritin subunit cDNA contained a conserved iron responsive element sequence in the 5 untranslated region. An alignment of the deduced protein sequence of the A. ventricosus ferritin subunit gene to that of other heavy chain ferritin molecules showed that A. ventricosus ferritin subunit is most similar to the great pond snail, Lymnaea stagnalis, ferritin with 70.2% of protein sequence identity.
본 논문에서는 나무나 염소 뿔처럼 대부분의 동식물이 대칭임을 살펴본다. 또한 DNA를 가지고 있는 인간의 신체 역시 대칭이다. 피보나치수열, 식물의 나선, 동물의 대수 나선에서 볼 수 있는 것은 대칭이다. 해바라기 꽃은 원형이다. 원(元)은 원점을 중심으로 회전을 해도 모양이 꼭 같으므로 회전대칭이다. 공간상의 회전변환을 넘어서, 시간 공간의 대칭적 변환으로 일반화하면 아인슈타인의 특수상대성 이론이 시공간 변환관계이다. 동식물의 나선은 좌우 나선들이 대칭을 이루며 그 속에는 element-wise inverse가 존재한다. Hadamard 행렬 중 가운데 하중 값을 2로 준 것은 자연대수의 밑 2와 같고, 나선 행렬은 Symmetric하며 역행렬은 element-wise inverse이다.
The chromosomal DNA fragment from Phaffia rhodozyma CBS 6938 which is able to autonomously replicate in the yeast Saccharomyces cerevisiae was cloned on an integrative URA3 plasmid. Its minimal fragment exhibiting autonomously replicating activiy in the S. cerevisiae gave a higher frequency transformation efficiency than that found for centromere-based plasmid, and enabled extrachromosoma1ly stable transmission of the plasmids in one copy per yeast cell under non-selective culture condition. The 836-bp DNA element lacked an ORF and did not contain any acceptable match to an ARS core consensus. Sequence analysis, however, displayed a cluster of three hairpin-Ioop-sequences with individual $\triangle {G_{25}}^{\circ}C$ free energy value of -10.0, -17.5, and -17.0 kcal. $mor^{-l}$as well as a 9-bp sequence with two base pair mismatches to the S. cerevisiae/E. coli gyrase-binding site. This 836-bp sequence also included one 7-bp sequence analogous to the core consensus of centromeric DNA element III (CDEIII) of S. cerevisiae, but CDEIII-like 7 bp sequence alone did not give a replicative function in this yeast.
한국미생물생명공학회 2001년도 Proceedings of 2001 International Symposium
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pp.35-39
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2001
The Integration Host factor (IHF) of Escherichia coli is a small, basic protein that is required for a variety of functions including site-specific recombination, transposition, gene regulation, plasmid replication, and DNA packaging. It ,is composed of two subunits that are encoded by the ihfA ($\alpha$-subunit) and ihjB ($\beta$-subunit) genes. IHF binding sites are composed of three elements called the WATCAR, TTG, and poly (dAT) elements. We have characterized IHF binding to the H site of bacteriophage λ. We have isolated suppressors that bind to altered H' sites using a challenge phage selection. Two different suppressors were isolated that changed the adjacent $\alpha$P64 and $\alpha$K65 residues. The suppressors recognized both the wild-type site and a site with a change in the WATCAR element. Three suppressors were isolated at $\beta$-E44. These suppressors bound the wild-type and a mutant site with a T:A to A:T change (H44A) in the middle of the TIR element. Site-directed mutagenesis was used to make several additional changes at $\beta$E44. The wild-type and $\beta$E44D mutant could not bind the wild-type site but were able to bind the H44A mutant site. Other mutants with neutral, polar, or a positive charge at $\beta$E44 were able to repress both the wild-type and H44A sites. Examination of the IHF crystal structure suggests that the ability of the wild-type and $\beta$E44D proteins to discriminate between the T:A and A:T basepairs is due to indirect interactions. The $\beta$-E44 residue does not contact the DNA directly. It imposes binding specificity indirectly by interactions with residues that contact the DNA. Details of the proposed interactions are discussed.
Absorption spectra of biological specimens in the soft X-ray region have been presented with special reference to the XANES (X-ray absorption Near Edge Structure) of constituent elements. Absorption spectrum in this wavelength region is characterized by the absorption edges from which elemental content could be derived. In addition, XANES has a characteristic profile for chemical environment around the element such as chemical bond. Using the specific absorption peak we can assign not only the chemical bond but also molecules having such a chemical bond. In the present paper, absorption spectrum of DNA was measured in the wavelength range from 1.5nm to 5nm. Spectrum of Chinese Hamster Ovary (CHO) cells was compared with the DNA spectrum. XANES were distinct at the K absorption edges of major elements, C, N and O. In the spectrum of the cells prominent peaks at the L absorption edge of minor element Ca were also detectable. XANES profiles in small local areas in a cell could also be measured in combination with X-ray microscopy. These give information about local chemical environment in a cell. XANES at the phosphorus K absorption edge in a human HeLa cell was successfully obtained corresponding to a sharp and intensive XANES peak of DNA.
누에, 멧누에, 천잠 및 작잠에서의 형질전환용 vector 개발을 위한 첫단계로 이미 인간을 포함한 여러 곤충에서 그 존재가 확인된 mariner transposable element가 이들 견사 곤충에 존재하는지의 여부를 탐색하기 위해서 이미 보고된Drosophila mauritiana와 Hyalophora ceropia의 mariner transposase 유전자의 고도로 보존성이 높은 부위에 대한 degenerctive primer pair를 제작하여 이들의 존재 여부를 탐색하였다. 결과적으로 예상되는 약 500bp의 PCR product가 관찰됨에 따라서 모든 견사곤충의 genome에는 maminer-like element(MLE)가 존재한다는 것을 간접적으로 확인할 수 있었다. 이미 cloning된 pBmoMAR를 probe DNA로하여 southern hybridization을 수행한 결과에서도 확인 할 수 있었으며, 각 견사층의 genome내에 high copy로 존재한다는 것을 추정할 수 있었다. 따라서 이와 같은 결과는 견사곤충에서 MLE가 vector system으로써 개발될 수 있는 기초자료로 제공될 수 있을 것이다.
Our previous report demonstrated that the rhp51$^+$, a recA and RAD51 homolog of the fission yeast, encodes three transcripts of 1.9, 1.6 and 1.3 kb which have at least six polyadenylation sites. The 3'-end of the gene alone can direct the formation of multiple, discrete 3'ends of the transcripts. To identify the regulatory element required for the 3'-end formation of -rhp51$^+$ deletion mapping analysis was performed. Northern blot analysis revealed that the 254-bp DNA fragment including 4 distinct poly (A) sites downstream from the Hindlll site, is crucial for normal 3'-end formation. Deletion of the 3'-terminal AU rich region caused appearance of read-through RNA, leading to enhancement of survival rate of the rhp51 deletion mutant in response to DNA damaging agent, methylmethane sulfonate (MMS). The results imply that the rhp51$^+$ system may be useful for molecular analysis of the 3'-end formation of RNA in the fission yeast.
한국식물학회 1987년도 식물생명공학 심포지움 논문집 Proceedings of Symposia on Plant Biotechnology
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pp.349-356
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1987
Insertions of transposable elements in or near a structural gene give rise to null phenotypes, reduced levels of gene expression, or alteration on the tissue-specific pattern of gene expression. Null phenotypes often result from insertions in exons. Reduced levels of gene expression results from insertions in various regions such as promoter region, 5' non-translated region, exon and intron. The maize allele of Adh1-3F1124 is an example of alteration in the tissue-specific patetern of gene expression. Adh1-3F1124 contains a Mu element inserted 31 bp 5' to the transcriptional start site of the wild-type Adh1 activity in seeds and anaerobically-treated seedlings but normal levels in the pollen. Upon the insertion of a transposable element a certain number of host DNA sequences at the insertion site is duplcated. When transposable elements excise, all element sequences are deleted. However, the duplicated host sequences may be left intact or deleted to various extents. This results in null phenotypes, restoration of original levels of gene expression, or altered levels of gene expression. On the basis of effects of transposable-element insertions or excisions on gene expression, the usefulness of transposable ellements for studies on gene expression is discussed.
한국미생물생명공학회 2000년도 Proceedings of 2000 KSAM International Symposium and Spring Meeting
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pp.178-181
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2000
In order to develop the novel gene expression system, we introduced new control elements which could influence the foreign gene expression in animal cells. When the foreign genes are introduced into the genome of higher eukaryotic cells, the expressions from these integrated genes are often low and can vary greatly depending on the positions of the integration sites due to the complex nature of the chromatin structures (1). First we screened the various DNA sequence elements which can function as an insulator of gene expression from these position effects and can cooperate with the SV40 enhancer/promoter. Among the several DNA elements from the various sources, we identified the particular DNA element which confers the increased frequency of the positive colonies, assayed by the reporter gene from stable selections indicating significantly reduced position effects. This element also showed the several fold-increased expression level as well as the copy-number dependent expression with host cell specificity. Second we modified the transcription termination element where we introduced the specific terminator in combination with SV40 polyA signal. This modified terminator showed the increased efficiency and the level of the gene expression. By combining these two elements, we made the animal cell expression system and tested successfully for the recombinant protein productions of TGF ${\beta}$-soluble receptor, Antithrombin III, and single chain Pro-Urokinase. [Supported by grants from MOCIE]
In the present study, we first examined whether the changes in the DNA binding activities of the transcription factors, cAMP response element binding protein (CREB) and activator protein-1 (AP-1) mediate the long-term effects of morphine in differentiated SH-SY5Y human neuroblastoma cells. The increases in CREB and AP-1 DNA binding activities were time-dependent up to 6 days of morphine treatment (1, 4, and 6 days). However, the significant reduction in the DNA binding activities of CREB and AP-1 was observed after 10 days of chronic morphine $(10\;{\mu}M)$ administration. Secondly, we examined whether the changes of CREB and AP-1 DNA binding activities could be modulated by dopamine and haloperidol. Dopamine cotreatment moderately increased the levels of the CREB and AP-1 DNA binding activities induced by 10 days of chronic morphine treatment, and haloperidol cotreatment also resulted in a moderate increase of the CREB and AP-1 DNA binding activities. However, dopamine or haloperidol only treatment showed a significant increase or decrease of the CREB and AP-1 DNA binding activities, respectively. In the case of acute morphine treatment, the CREB and AP-1 DNA binding activities were shown to decrease in a time-dependent manner (30, 60, 90, and 120 min). Taken these together, in differentiated SH-SY5Y cells, morphine tolerance seems to involve simultaneous changes of the CREB and AP-1 DNA binding activities. Our data also suggest the possible involvement of haloperidol in prevention or reversal of morphine tolerance at the transcriptional level.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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