Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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1998.07a
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pp.63-65
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1998
생쥐의 초기발생과정에서 배아 세포질의 제거로 nucleus/cytoplasm ratio를 증가시켰을 경우, 발생과 gene expression에는 영향을 미치지 않았으나 형태형성은 촉진되었다. 또, nucleus/cytoplasm ratio의 변화 없이 발생후기의 cytoplasm으로 일부 치환된 배아에서 발생과 gene expression, 형태형성은 모두 촉진되었다. 이상의 결과로 보아 초기배아의 gene expression과 형태형성과정에서 일어나는 time schedule의 조절은 nucleus/cytoplasm ratio가 직접적으로 영향을 미치지 않고 난자와 배아 내에 존재하는 cytoplasm factor에 의해 조절 받으며, 특히 형태 형성의 time schedule은 cytoplasmic factor와 이들에 의해 조절되는 물질의 상대적인 농도에 의해 조절될 것으로 여겨진다.
To examine the efficiency of nuclear transplantation the influence of electrical preactivation of recipient cytoplasm on the in vitro developmental potentyl in the nuclear transplant rabbit embryos were evaluated. The embryos of 16-cell stage were collected and synchronized to G1 phase of 32-cell stage. The recipient cytoplasms were obtained by removing the first polar body and chromosome mass by non-disruptive microsurgery procedure. The separated G1 phase blastomeres of 32-cell stage were put into the non-preactivated and/or the preactivated recipient cytoplasm by electrical stimulation. After culture until 20h post-hCG injection, the nuclear transplant oocytes were electrofused. The fused nuclear transplant embryos were co-cultured with rabbit oviduct epithelial cells and monitored every 24h to assess for developmental rate. After in vitro culture for 120h, the nuclear transplant embryos developed to blastocyst stage were stained with Hoechst 33342 and their blastomere were counted. The electrofusion rate was similar to the non-preactivated and preactivated recipient cytoplasm(81.8 and 85.7%, respectively). However, the in vitro developmental rate to blastocyst stage with the non-preactivated recipient cytoplasm (57.1%) was found significantly (P<0.05) higher, compared to the preactivated recipient cytoplasm(20.8%). The cell counts of nuclear transplant embryos developed to blastosyst stage were increased significantly (P<0.05) more in the non-preactivated recipient cytoplasm (163.7 cells), as compared with the preactivated recipient cytoplasm(85.4 cells). These results considered better that non-preactivated oocytes, MII phase oocytes, were used for recipient cytoplasms in the rabbit nuclear transplant procedure.
Chromosome condensation and swelling of the donor nucleus have been known as the early morphological indicators of chromatin remodelling after injection of a foreign nucleus into an enucleated recipient cytoplasm. The effects of non-preactivation and electrical preactivation of recipient cytoplasm, prior to fusing a donor nucleus, on the profile of nuclear remodelling in the nuclear transplant rabbit embryos were evaluated. The embryos of 16-cell stage were collected and synchronized to G1 phase of 32-cell stage. The recipient cytoplasms were obtained by removing the first polar body and chromosome mass by non-disruptive microsurgical procedure. The separated G1 phase blastomeres of 32-cell stage were injected into non-preactivated recipient cytoplasms. Otherwise, the enucleated recipient cytoplasms were preactivated by electrical stimulation and the separated G1 phase blastomeres of 32-cell stage were injected. After culture until 20h post-hCG injection, the nuclear transplant oocytes were electrofused by electrical stimulation. The nuclei of nuclear transplant embryos fused into non-preactivated and/or preactivated recipient cytoplasm were stained by Hoechst 33342 at 0, 1.5, 2, 4, 6, 8, 10 hrs post-fusion and were observed under an fluorescence microscopy. Accurate measurements of nuclear diameter were revealed with an ocular micrometer at 200$\times$. Upon blastomere fusion into non-preactivated recipient cytoplasm, a prematurely chromosome condensation at 1.5 hrs post-fusion and nuclear swelling at 8 hrs post-fusion were occurred as 91.6% and 86.1%, respectively. But the nuclei of nuclear transplant embryos fused into preactivated recipient cytoplasm, as o, pp.sed to non-preactivated recipient cytoplasm, were not occurred chromosome condensation and extensive nuclear swelling. Nuclear diameter fused into non-preactivated and preactivated recipient cytoplasm at hrs post-fusion was 30.2$\pm$0.74 and 15.2$\pm$1.32${\mu}{\textrm}{m}$, respectively. These results indicated that onset of unclear condensation and swelling which was associated with oocytes activation were critical steps in the process of chromatin swelling. Futhermore, complete reprogramming seemed only possible after remodelling of the donor nucleus by chromosome condensation and nuclear swelling.
Rye has been a major winter forage crop in Korea. Varietal improvement of rye has been practiced either by hybrid or population breeding systems. Hybrid breeding offers important advantages over population breeding since it is normally a cross-pollinated crop. The hybrid breeding in rye has been possible since cytoplasmically inherited forms of male sterility (CMS) and corresponding nuclear restorer genes were found. The objectives of this research were to develop the maintainer and restorer lines of Korean inbred lines and to estimate the effect of 'Pampa' type of CMS cytoplasm on yield and its related characteristics. For easy discrimination of male-sterile status of plants, anther scoring and the restore index system in which seed-setting and pollen quantity of viability were taken into account were established. High significant correlation between pollen quantity and pollen viability was found. For "Pampa" cytoplasm, four of 14 Korean inbred lines tested turned out to be a maintainer but no restorer was found. But for "235b" CMS cytoplasm, seven inbred lines acted as complete restorers. The Korean inbred rye lines acted mainly as maintainers in "Pampa" cytoplasm but acted mainly as restorer in "235b" cytoplasm. The 'Pampa' cytoplasm inducing male sterility reduced cohn length and plant height and increased the number of tiller, so forage yield and grain yield were enhanced. However, heading date was slightly delayed compared to the normal cytoplasm.elayed compared to the normal cytoplasm.
Dermal wound healing responses in the skin of the toad, Bombina orientalis, were examined using transmission electron microscopy. At 12 hours after wounding, debridement and collagenolysis occurred in damaged dermis. Histocyte has a large nucleus and long cytoplasm process. Phagocytic vesicle and lysosome were observed in the cytoplasm. Damaged blood cells were transformed spindle to irregular shape. Autolysis was observed in their cytoplasm. Histocytes are found in poly-band. The irregularly shaped nucleus is located peripheral region in cytoplasm. At 2 days after wounding, partial aggregation of blood cells is observed. Phagocytic, activity is observed in histocyte and collagenolytic collagen fibers are scattered. Fibroblast is observed in the dermis at 3 days after wounding. Clusters of ribosomes and some short cisternae of rough-surfaced endoplasmic reticulum are found in the cytoplasm. In histocyte at 7 days post wounding, various size granules composed of moderately dense material are found the cytoplasm. In this period histocyte is round to rod in profile, with slender processes projecting from the surface. At 7 day after injury, it was observed that formation of connective tissue fibers and amorphous ground substance in regenerating skin.
Acinous gland cells (A, B, C, D and E-type cells) and duct cell (G-type cell) are observed in acinus and in duct of salivary gland of Korean Slug respectively by electron microscope. The type-A gland cells are numerous and are packed with medium electron dense granules (diameter, $3{\mu}m$) in cytoplasm. The circular shaped nucleolus and evenly developed chromatins are observed in the nucleus of type-B cell, and cytoplasm includes medium electron dense granules (diameter, $2.5X3.7{\mu}m$). The type-C gland cell has a round nucleus, and thin elongated-shaped heterochromatins are evenly distributed in the nucleoplasm and many net shaped endoplasmic reticulums and oval serous granules of middle electron density (diameter, $3.5X5{\mu}m$) fill the cytoplasm. The type-D gland cell is the largest and the most numerous of the gland cells consisting the salivary gland and heterochromatins in nucleus are well developed in the nucleoplasm. Most of granules (diameter, $0.8X2.5{\mu}m$) in cytoplasm are round, and look dark for the high electron density, and cytoplasm is filled with net-shaped endoplasmic reticulums. The type-E gland cells are rarely existent around the salivary gland, and the granules of those cells are irregular in shape and size and are vacuolized in cytoplasm. Intralobular salivary duct is composed of the high electron dense squamus endotheliums, while the other interlobular salivary duct is filled with irregular columnar epitheliums. The interlobular duct cell contains the high electron dense granules (size, $0.3{\sim}1.5{\mu}m$) in cytoplasm and those granules are secreted into cilia of salivary lumen.
In order to study on the Sertoli cell, we attempt have been made to measure the average number of each germ cells per Sertoli cell on the 12 stages of cycle in matured korean Jindo dog. The fine structure of Sertoli cell junctional specialization was studied with electron microscope. The results were summarized as follows; 1. The average number of various germ cells associated with Sertoli cell was 9.77 to 13. 80 through stages of cycle and the total average number was 11.62. 2. Sertoli-Sertoli cell junctional specialization was present in seminiferous epilthelium, and Sertoli-spermatid cell junctional specialization rose from stage 8 spermatid, persisted to step 13 spermatid and then disappeared. The structure of Sedoli-spermatid cell juncticnal specialization was not similar to that of Sertoli cxlls. 3. Just after spermiation, free-surface of Sertoli-spermatid cell junctional specialization was replaced by Sertoli cell cytoplasm with tubulobulbar complex at the neiglaboring region observed. 4. The Sertoli cell process was located within the cytoplasm of late stage spermatids. Some membranes of residual body and spermatid cytoplasm partly disappeared, resulting in opening of the cytoplasm of spermatid into that Sertoli cell. This fact suggested that spermatid cytoplasm was partly eliminated.
Kim, Ji-Yeon;Woo, Hee-Jong;Kim, Kyoung-Heon;Kim, Eung-Ryool;Jung, Hoo-Kil;Juhn, Ho-Nam;Lee, Hyong-Joo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.6
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pp.998-1001
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2002
Potential antitumor activity of Lactobacillus plantarum cytoplasm was examined using F9 teratocarcinoma-bearing BALB/C mice. The cytoplasmic fraction of L. plantarum was separated by sonication followed by ultracentrifugation. The fraction at a dose of 100 or 200 mg/kg/day was orally administered for 7 consecutive days before or after tumor inoculation to 16 mice. As a control, heat-killed whole cell was used at a dose of 100 mg/kg/day. Upon oral administrations of both the cytoplasm and heat-killed whole cell, when performed after and before tumor inoculation, the survival of F9-bearing mice prolonged more effectively. Administration of the cytoplasm after tumor inoculation extended the average survival days by 30 and $40\%$ at daily dosages of 100 and 200 mg/kg/day, respectively. This result suggests that the cytoplasmic fraction of L. plantarum has strong antitumor activity against mouse F9 teratocarcinoma in vivo.
Kim Ji-Yeon;Lee Seong-Kyu;Jeong Do-Won;Hachimura Satoshi;Kaminogawa Shuichi;Lee Hyong-Joo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.5
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pp.786-790
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2006
Cellular components of Lactococcus lactis ssp. lactis (heat-killed whole cells, cytoplasm, and cell walls) were tested for their in vivo immunopotentiating activity. Peritoneal macrophages from mice orally administered with heat-killed whole cells exhibited significantly greater phagocytic activity than the groups administered with cell-wall fraction or cytoplasm fraction. The cytotoxicity of natural-killer cells was the highest in the group administered with whole cells, and the production of cytokines ($IFN-\gamma$, IL-2, and IL-12) in spleen cells was significantly higher, when cellular components were injected, and it tended to be higher in the cell-wall and cytoplasm groups than in the whole-cell group. Interestingly, the cytokine production of Peyer's patch cells was high, when cytoplasm fractions were administered. These results demonstrate that whole cells and cytoplasm and cell-wall fractions of L. lactis ssp. lactis have immunopotentiating activities, which are related to the stimulation of Peyer's patches.
Protoplast releasing mechanisms from Trichoderma koningii, fine structures of the released protoplsts, and their regeneration mode were studied by scanning and transmission electron microscopy. Two types of protoplast releasing mechanisms were observed. In one mechanism, cytoplasm emerged through a cell wall pore developed by cell lytic enzymes and formed a spherical protoplast. In the other mechanism, as the cell wall became progressively thinner, the inner cytoplasm partially rounded to form nonspherical bodies which became spherical protoplasts after being released into the enzyme solution. But, these two types of protoplast releasing mechanisms did not seem to be. mutually exclusive but could occur on the same mycelium simultaneously. And it appeared that cytoplasm which did not become a protoplast by the first mechanism could from a protoplast by the second mechanism. The preparations contained two types of protoplasts, released from different sites of the mycelia. Those released from younger mycelia had dense cytoplasm and small vesicles. Those released from the older mycelia had less dense cytoplasm and larger vacuoles. In the case of regeneration, before producing normal mycelia, most of the protoplasts assumed aberrant tube and yeast-like-forms. Normal mycelia were produced at the end of the yeastlike-forms and sometimes in the middle of the aberrant tube.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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