D-type cyclins control the onset of cell division and the response to extracellular signals during the G1 phase. In this study, we transformed a D-type cyclin gene, Nicta;CycD3;4, from Nicotiana tabacum using an Agrobacterium-mediated method. A predicted 1.1 kb cyclin gene was present in all of the transgenic plants, but not in wild-type. Northern analyses showed that the expression level of the Nicta;CycD3;4 gene in all of the transgenic plants was strong when compared to the wild-type plants, suggesting that Nicta;CycD3;4 gene driven by the CaMV 35S promoter was being overexpressed. Our results revealed that transgenic plants overexpressing Nicta;CycD3;4 had an accelerated growth rate when compared to wild-type plants, and that the transgenic plants exhibited a smaller cell size and a decreased cell population in young leaves when compared to wild-type plants.
Park, Kyoung-Jun;Choi, Do-Hee;Kwon, Sung-Hun;Kim, Joon-Ho;Bae, Sung-Ho
Korean Journal of Microbiology
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v.46
no.2
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pp.122-126
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2010
RAD53 functions as an effector kinase of checkpoint pathways in Saccharomyces cerevisiae, which plays a central role to regulate many downstream cellular processes in response to DNA damage. It also involves in transcriptional activation of various genes including RNR genes which encode the key enzyme required for dNTP synthesis. In this study, we identified CYC8 as a suppressor for the hydroxyurea sensitivity of $rad53{\Delta}$ mutation. $Rad53{\Delta}$ mutant transformed with a multi-copy plasmid containing CYC8 showed increased hydroxyurea resistance. In contrast, TUP1 which forms a complex with CYC8 did not function as a suppressor. In the case of mutations, both $cyc8{\Delta}$ and $tup1{\Delta}$ suppressed hydroxyurea sensitivity of $rad53{\Delta}$. Since CYC8 can propagate as a prion in yeast, overexpression of CYC8 induced misfolding of the normal CYC8 proteins, resulting in dominant cyc8-phenotype. Therefore, it is suggested that CYC8 can act as a multi-copy suppressor due to its prion property. It was observed that the levels of RNR transcription were increased in the yeast strains containing either multi-copies of CYC8 gene or $cyc8{\Delta}$ mutation, suggesting that the increased level of RNR will elevate the intracellular pools of dNTPs, which, in turn, suppress the phenotype of $rad53{\Delta}$ mutation.
D-class cyclins play important roles in controlling the cell cycle in development and in response to external signals by forming the regulatory subunit of cyclin-dependent kinase (CDK) complexes. To evaluate the effects of D-class cyclins in transgenic rice plants, Arabidopsis cyclin D2 gene (CycD2) was linked to the maize ubiquitin1 promoter (Ubi1) and introduced into rice by the Agrobacterium-mediated transformation method. Genomic deoxyribonucleic acid (DNA), ribonucleic acid (RNA), and Western blot hybridizations of the Ubi1:-CycD2 plants revealed copy number of transgene and its increased expression in leaf and callus cells at messenger RNA (mRNA) and/or protein levels. The H1 kinase assay using the immunoprecipitates of protein extracts from the Ubi1:CycD2 plants and nontransgenic controls demonstrated that the introduced Arabidopsis CycD2 forms a functional CycD2/CDK complex with an unidentified CDK of rice. Shoot and root growth was enhanced in the Ubi1:CycD2 seedlings compared with nontransgenic controls, together, suggesting that Arabidopsis cyclin D2 interacts with a rice cyclin-dependent kinase, consequently enhancing seedling growth.
D-type cyclins are believed to regulate the G1 to S phase transition in response to nutrient and hormonal signals. We investigated the expression characteristics of the key cell-cycle regulators, mitotic and G1 cyclins in potato (Solanum tuberosum L.). We isolated D-type cyclin gene from potato and it was classified as D3 cyclin by sequence similarities and a phylogenetic analysis, and named as StcycD3;1. The accumulation of transcripts was predominantly associated with mitotically active organs, such as stolons, roots, flowers, leaves, and stems. Transcription of StcycD3;1 can be induced by sucrose.
In Drosophila melanogaster, it is known that the circadian clock consists of an autoregulatory feedback loop, which includes so-called clock genes, such as per, tim, dClk and cyc and produces periodical expression of per. It is recently suggested, however, that the circadian oscillation without the rhythmical expression of per is involved in the regulation of circadian locomotor rhythms. In the present study, we examined the existence and the property of the possible per-less oscillation using arrhythmic clock mutant flies carrying per$^{01}$, tim$^{01}$, dClk$^{Jrk}$ or cyc$^{01}$. When temperature cycles consisting of 25$^{\circ}$C and 30$^{\circ}$C with varying periods (T = 8~32 hr) were given, they showed rhythms synchronizing with the given cycle under constant darkness (DD). per$^{01}$ and tim$^{01}$ flies always showed a peak around 7 hr after the onset of thermophase irrespective of Ts of temperature cycles, while dClk$^{Jrk}$ and cyc$^{01}$ flies did not. In addition, several days were necessary to establish a clear temperature entrainment in per$^{01}$ and tim$^{01}$ flies, when they were transferred from a constant temperature to a temperature cycle under DD. These results suggest that per$^{01}$ and tim$^{01}$ flies have a temperature-entrainable weak oscillatory mechanism. The fact that dClk$^{Jrk}$ and cyc$^{01}$ flies did not show any sign of the endogenous oscillation suggests that the per-less oscillatory mechanism may require CLK and CYC.
This study investigates the effects of loading frequency (f) and specimen size on the liquefaction resistance of clean sand. A series of cyclic direct simple shear tests were conducted on Jumunjin sand with varying consolidated relative densities (40% and 80%), f values (0.05, 0.10, and 0.20 Hz), and diameter to height (D/H) ratios (3.63, 3.18, 2.82, and 2.54). The results demonstrated the significant influence of f and D/H ratio on the number of cycles to liquefaction (Ncyc-liq) and the cyclic resistance ratio (CRR15). It was observed that increasing f linearly increased Ncyc-liq. Increasing the specimen height also led to higher Ncyc-liq values irrespective of the f or relative density. Moreover, a positive correlation between CRR15 and f indicated that higher f yielded higher CRR15. This relationship was more pronounced in dense sand than in loose sand. Specimen height also significantly affected CRR15, with increasing the specimen height resulting in higher CRR15 values. Furthermore, the effect of f on CRR15 was less significant compared to the influence of specimen height. The effect of f on the normalized cyclic resistance ratio (NCRR) was relatively negligible for loose sand but more substantial for dense sand depending on the D/H ratio. Data analysis revealed that the NCRR generally decreases as the D/H ratio increases. An interpolation formula was provided to calculate the NCRR based on the D/H ratio regardless of the f and relative density.
The circadian clock system enables organisms to anticipate the rhythmic environmental changes and to manifest behavior and physiology at advantageous times of the day. Transcriptional/translational feedback loop (TTFL) is the basic feature of the eukaryotic circadian clock and is based on the rhythmic association of circadian transcriptional activator and repressor. In Drosophila, repression of dCLOCK/CYCLE (dCLK/CYC) mediated transcription by PERIOD (PER) is critical for inducing circadian rhythms of gene expression. Pacemaker neurons in the brain control specific circadian behaviors upon environmental timing cues such as light and temperature cycle. We show that amino acids 657-707 of dCLK are important for the transcriptional activation and the association with PER both in vitro and in vivo. Flies expressing dCLK lacking AA657-707 in $Clk^{out}$ genetic background, homologous to the mouse Clock allele where exon 19 region is deleted, display pacemaker-neuron-dependent perturbation of the molecular clockwork. The molecular rhythms in light-cycle-sensitive pacemaker neurons such as ventral lateral neurons ($LN_vs$) were significantly disrupted, but those in temperature-cycle-sensitive pacemaker neurons such as dorsal neurons (DNs) were robust. Our results suggest that the dCLK-controlled TTFL diversify in a pacemaker-neuron-dependent manner which may contribute to specific functions such as different sensitivities to entraining cues.
Kim, Tae-Kwon;Jung, Se-Wook;Go, Young-Hoon;Lee, Yong-Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.11
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pp.1678-1683
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2006
A novel suspension-phase enzyme reaction system for the intermolecular transglycosylation of L-ascorbic acid into 2-O-${\alpha}$-D-glucopyranosyl L-ascorbic acid supplementing extrusion starch as the glycosyl donor was developed using cyclodextrin glucanotransferase from Thermoanaerobacter sp. A high conversion yield compared to the conventional soluble-phase enzyme reaction system using cyclodextrins and soluble starch was achieved. The optimal reaction conditions were 2,000 units of cycIodextrin glucanotransferase, 20 g/l of L-ascorbic acid, and 50 g/l of extrusion starch at $50^{\circ}C$ for 24 h. The new suspension-phase enzyme reaction system also exhibited several distinct advantages other than a high conversion yield, including a lower accumulation of oligosaccharides and easily separable residual extrusion starch by centrifugation or filtration in the reaction mixture, which will facilitate the purification of 2-O-${\alpha}$-D-glucopyranosyl L-ascorbic acid. The new suspension-phase enzyme reaction system seems to be potentially applicable as the industrial process for the production of thermally and oxidatively stable 2-O-${\alpha}$-D-glucopyranosyl L-ascorbic acid.
The retardation effect of fatigue crack propagation after cyclic overloading seems to be affected by strain hardening exponent. Namely, for the material with high values of n, the delay effect is found to be severe. We proposed a modified crack retardation equation which may apply the retardation of fatigue crack growth after a cyclic overloading, as (da/dN)'$_{cyc}$=($\mu$n+λ)B $\Delta$$K^{q}$ /[(1- $R_{eff}$) $K_{cf}$ -$\Delta$K]. where, $R_{eff}$ is effective stress ratio [=( $K_{min}$-K, os)/( $K_{max}$- $K_{res}$)] The constants $\mu$=-0.5 and λ=0.6, and the values are found to be identical for materials such as aluminum (A 1060), steel (SS 34), brass ( $B_{s}$ SIB) and stainless steel (SUS 304) used in this investigation. (SUS 304) used in this investigation.ation.n.n.
Jang, Su Jin;Shin, Sung Hae;Yee, Sung Tae;Hwang, Baek;Im, Kyung Hoan;Park, Ky Young
Molecules and Cells
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v.20
no.1
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pp.136-141
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2005
Mild stresses such as high temperature ($30^{\circ}C$) or a low $H_2O_2$ concentration induced transient cell cycle arrest at G1/S or G2/M depending on the cell cycle stage at which the stress was applied. When stresses were introduced during G0 or G1, the G1/S checkpoint was mainly used; when stresses were introduced after S phase, G2/M was the primary checkpoint. The slowing of cell cycle progression was associated with transient delays in expression of A-, B-, and D-type cyclins. The delay in expression of NtcycA13, one of the A-type cyclins, was most pronounced. The levels of expression of Ntcyc29 (a cyclin B gene) and of CycD3-1 differed most depending on the applied stress, suggesting that different cellular adjustments to mild heat and a low concentration of $H_2O_2$ are reflected in the expression of these two cyclins.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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