In order to screen new tyrosinase inhibiting principle which is expected to be a new biofunctional skin whitening cosmetics, we have isolated 600 strains of the marine- derived fungi and investigated tyrosinase inhibiting activity for their acetone extracts. The significant activities (>70% Inhibition) were observed in the extract of 10 strains of fungi (MFA7, MFA27, MFA58, MFA317, MFA318, MFA345, MFA412, MFA552, MFA562, MFA581). These active strains were cultured in SWS medium with 1 L scale and the resulting broth and mycelium were extracted to afford mycelium extract (000M) and broth extract (000B), respectively. Tyrosinase inhibiting activity for all extracts has been tested. As the results, the broth extracts of 4 strains (27B, 58B, 552B and 581B) exhibited relatively high levels of activity of $IC_{50}$ values of $3.0-19.0\;{\mu}g/mL$. The active component of 581B was purified by assay-guided isolation to yield the known kojic acid (1), and its structure was determined by physicochemical evidence. Kojic acid showed the significant tyrosinase inhibitory activity with $IC_{50}$ values of $12.0\;{\mu}M$.
To investigate nisin production and resistance of Lactococcus lactis ssp. tactis ML (L. lactis $ML_8$, effects of medium, pH of culture broth, and cell growth on the nisin activity, and effect of nisin with or without $Ca^[2+}$ ion on the growth of L. lactzs were analyzed. In the bio-assay of nisin by the agar diffusion method, inhibition-zone diameter of Micrococcus Javus was propotional to the logarithm of nisin concentration ranged 0.5~20 unitlml (12.5~500 ng/mf). Nisin activity of the pasteurized culture filtrates of L. lactis MLs was high at pH 2!3 but was inactivated completely at pH over 6.0. Nisin production of the L. lactis $ML_8$ cultured on LTB broth increased at late logarithmic phase and reached 10.5 unitlml after 16 hr. The cell growth of L. lactis LM 0230, a plasmid free and nisin sensitive strain, was inhibited on agar medium containing 7 unitlrnl of nisin, while L. lactis $ML_8$ showed high survival ability at 20 unitld of nisin. When 40 mM $Ca^[2+}$ ion was added to Elliker broth with 8 unitlml of nisin, the growth pattern of L. lactis $ML_8$ was similiar to that on control medium which did not contain nisin and $Ca^[2+}$ ion, and this suggested that $Ca^[2+}$ increased the nisin resistance of the L. lactis.
We conducted a screening and checked the cultivation methods of lactic acid bacteria, which have anti-atopic dermatitis functions, by determining the lactic acid bacteria's immune enhancement by FACS, and antimicrobial activity against Staphylococcus aureus. The increase of Tcell CD4+/CD25+/foxp3+ was bigger in Lactobacillus plantarum than Lactococcus lactis subsp. lactis (Lc. lactis) and the antimicrobacterial activity against S. aureus was the opposite. The antimicrobial activity of Lb. plantarum culture with medium containing Lc. lactis culture broth was not enhanced, but the antimicrobial activity of Lc. lactis cultured in a medium containing Lb. plantarum culture broth was enhanced. As the optimal method caltivation of Lc. lactis in a medium containing 10% of heat-killed Lb. plantarum culture broth was chosen. By this method, the antibacterial activity of the pure Lc. lactis culture increased sharply at the end of the log phase, while a restraint effect on the growth of S. aureus increased 1.29 times.
This study was carried out to identity the effects of antifungal bacteria isolated from the soil grown kiwi fruit plants on the growth inhibition of Botrytis cinerea causing gray mold in kiwi fruit plants in the southern districts of Jeonnam. Two hundred and fifty antagonistic microorganisms were isolated and examined into the antifungal activity against Botrytis cinerea. We screened and isolated four bacterial strains which strongly inhibited Botrytis cinerea from the soil grown kiwi fruit plants. And the best antifungal bacterial strain which called CHO 163 was finally selected. Antagonistic microorganism CHO 163 was identified to be the genus Bacillus sp. based on the morphological and biochemical characterization. Bacillus sp. CHO 163 showed 86.9% of antifungal activity against Botrytis cinerea. By the bacterialization of culture broth and heated filtrates of culture broth, Bacillus sp. CHO 163 showed almost all of antagonistic activity against Botrytis cinerea. And we also confirmed that in vitro the treatment of Bacillus sp. CHO 163 cultured by SD+B+P broth efficiently controled the growth of Botrytis cinerea causing gray mold in kiwi fruit plants.
Kim, Myung-Kon;Choi, Han-Seok;Park, Hyo-Suk;Kim, Sung-Jun
The Korean Journal of Mycology
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v.31
no.3
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pp.187-191
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2003
Armillaria mellea, honey mushroom is well known as a symbiotic fungus with Gastodia elata, The mycelial yields of the fungus were compared when cultured with various broth media. The highest yield of cell mass, 2.31 g dry weight/50mL, was obtained on germinated-malt extract broth (GMEB). The optimal broth concentration which was measured hand refractometer for mycelium production was $15\;Brix^{\circ}$. The optimal conditions estimated with response surface methodology under temperature, pH and incubation period were $25.9^{\circ}C$, pH 5.72, 15.22 days, respectively, on GMEB having $15\;Brix^{\circ}$ concentration for mycelial production of A. mellea.
A Bacillus strain which produces ${\beta}-galactosidase$ with high transgalactosylation activity, was isolated from soil and tentatively designated as Bacillus sp. A1. When ${\beta}-galactosidase$ from Bacillus sp. A1 reacted with 40% (w/w) lactose, transgalactosylation ratio reached up to 90% at the 70% conversion of the initial lactose. The biosynthesis of the enzyme in Bacillus sp. A1 required lactose as an inducer and was repressed by glucose. Observing that the addition of amino acids to culture medium resulted in enhancing, to a significant extent, both the growth and the enzyme production of the strain, yeast extract and commercially available hydrolysates of protein were examined for the suitability as amino acid source. As it turned out, SMP, an enzymatic hydrolysis product of soybean protein from Fuji Oil Co.(Japan), was the most suitable for optimization of the culture medium. When Bacillus sp. A1 was cultured in the presence of 0.5% SMP and 2% lactose, the enzyme activity increased up to $1.8\;U/m{\ell}-broth$.
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are ubiquitous in the environment. They are highly toxigenic and carcinogenic. Probiotic bacteria isolated from fermented foods were tested to check their ability to degrade and/or detoxify PAHs. Five probiotic bacteria with distinct morphologies were isolated from a mixture of 26 fermented foods co-cultured with benzo(a)pyrene (BaP) containing Bushnell Haas minimal broth. Among them, B. velezensis (PMC10) significantly reduced the abundance of BaP in the broth. PMC10 completely degraded BaP presented at a lower concentration in broth culture. B. velezensis also showed a clear zone of degradation on a BaP-coated Bushnell Haas agar plate. Gene expression profiling showed significant increases of PAH ring-hydroxylating dioxygenases and 4-hydroxybenzoate 3-monooxygenase genes in B. velezensis in response to BaP treatment. In addtion, both live and heat-killed B. velezensis removed BaP and naphthalene (Nap) from phosphate buffer solution. Live B. velezensis did not show any cytotoxicity to macrophage or human dermal fibroblast cells. Live-cell and cell-free supernatant of B. velezensis showed potential anti-inflammatory effects. Cell-free supernatant and extract of B. velezensis also showed free radical scavenging effects. These results highlight the prospective ability of B. velezensis to biodegrade and remove toxic PAHs from the human body and suggest that the biodegradation of BaP might be regulated by ring-hydroxylating dioxygenase-initiated metabolic pathway.
Lactobacillus brevis BK11 obtained from Baikkimchi was selected to study the effects of culture medium, initial pH, atmosphere composition, incubation temperature and time, and prebiotics on growth and production of antimicrobial substances. Growth and antimicrobial substances production of L. brevis BK11 were significantly higher in MRS broth than in BHI or M17 broth. The production of cell mass, lactic acid, and bacteriocin by BK11 strain was at maximum in MRS broth adjusted to pH 6.0. Aerobic and microaerobic conditions were favored cell growth and antimicrobial substances production than anaerobic condition. Biomass and lactic acid production and antimicrobial substances activity of BK 11 were significantly better at 30 and $37^{\circ}C$ than at $25^{\circ}C$. Growth of the strain BK11 entered the stationary growth stage at 24 h after inoculation, and decreased after 36 h. Antimicrobial activities of cell-free culture supernatant and bacteriocin solution were highest when cultured in MRS broth with an initial pH 6.0 for 24-30 h at $37^{\circ}C$. In addition, the highest cell number and lactic acid and bacteriocin production were recorded in the presence of 1 and 2% (w/v) fructooligosaccharide (FOS), however, inulin and raffinose did not affect biological and physicochemical characteristics and antimicrobial activities of L. brevis BK11 cultures. According to these results, production of antimicrobial substances by L. brevis KB11 was closely associated with cell density. Under optimal conditions for antimicrobial substances production, L. brevis BK11 effectively inhibited the growth of Helicobacter pylori ATCC 43504.
We isolated a bacterium which produces antifungal substances from the Lake of Saimaa soils in Fin-land. The isolated strain was identified as Bacillus sp. and shown a strong antifungal activity on plant pathogenic fungi. Bacillus sp. KMU-1011 produced maximum level of antifungal substances under incubation aerobically at $24^{\circ}C$ for 48 hours in nutrient broth containing 1.0% glucose and 1.0% polypeptone at 180 rpm and initiated pH adjusted to 6.0. Precipitate of culture broth by $30{\sim}60%$ ammonium sulfate precipitation exhibited strong antifungal activity against Botrytis cinerea KACC 40573 by dry cell weight. Chloroform extract of cultured broth also shown fungal growth inhibitory activity against C. gloeosporioides KACC 40804, D. bryoniae KACC 40669, F. oxysporum KACC 40037, F. oxysporum KACC 40052, F. oxysporum f. sp. radicis-lycopersici KACC 40537, F. oxysporum KACC 40902, M. cannonballus KACC 40940, P. cambivora KACC 40160, R. solani AG-1 KACC 40101, R. solani AG-4 KACC 40142, and S. scleotiorum KACC by agar diffusion method.
Jun, Jun Hack;Jin, Na Young;Lee, You Kyoung;Lee, Bo Ram;Youn, Young Nam;Yu, Yong Man
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.20
no.2
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pp.152-158
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2016
The cause of death was investigated with several dead cabbage moth larvae in breeding box. Bacterial strains were isolated and selected from the dead larvae by bioassay. One of them was identified as Serratia marcescens used by morphological characteristics and gene sequencing. S. marcescens were cultured by Luria Bertani (LB) media broth for bioassay. When 100-fold dilution of culture broth to third larvae of diamondback moth, Plutella xylostella, it was showed a 100% mortality at 2 days after treatment, and only 10-fold dilution of supernatant liquid was showed 86.6% mortality. When the culture broth of S. marcescens was applied to the larvae of beet armyworm, Spodoptera exigua, contact and feeding toxicity were 20 and 8% of mortality, respectively. Otherwise, when the culture broth of S. marcescens was applied to 5 major plant pathogens, antibacterial activities against Fusarium oxysporum, Rhizoctonia solani, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophthora capsici and Sclerotinias clerotiorum were 4.7, 11.3, 20, 15.7 and 42.6%, respectively. Also, degradation ability of S. marcescens against protein and chitin were examined.
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