꽃송이버섯은 우리나라에서 2000년대 초반부터 재배를 시작하였고, 국내에서는 전라북도농업기술원이 육성한 '너울'이 2016년에 최초로 등록되어 있다. 그러나, 꽃송이버섯에 대한 재배매뉴얼이 없어 여전히 농가마다 자실체 생산성의 차이가 큰 실정이다. 이에 꽃송이버섯 '너울'의 발이조건을 구명하고 안정생산 기술을 개발하고자 배지 pH, 배지함수율, 종균접종량 조건에 따른 연구를 수행한 결과, 재배일수, 수확률과 자실체 중량을 고려한 연중 병당 수량은 pH 3.8 처리구가 363.6 g으로 가장 높게 나타났으나 pH 3.6 조건에서는 수량이 189.5 g으로 급감하는 점, pH 4.0 조건이 배양일수가 짧고 pH 3.8 조건과 비교하여 재배일수가 같으며, 자실체 중량 차이의 유의성이 인정되지 않는 점, 농가에서 활용 시 정밀한 pH 조절이 어려운 점을 고려하여 pH 3.9±1로 조절하여 재배해야 안정생산이 가능할 것으로 판단된다. 아울러 배지함수율을 65%로 조절하고, 배지부피의 4%에 해당하는 액체종균을 접종 후 배양실 내 습도조건을 50% 이하로 설정하면 연중 병당 341.8 g을 생산할 것으로 판단된다.
수평아리 사체를 이용한 효모의 최적 배양 조건과 효모배양물이 육계의 성장에 미치는 영향을 조사하였다. 수평아리 추출물의 단백질 농도는 72시간 동안 추출되었을 때 가장 높았으며, 수평아리 사체에서 추출물을 얻기 위한 물의 첨가 비율은 수평아리 사체의 무게에 1.5배(v/w ratio)가 적당하였다. 수평아리 사체의 추출물에서 지방은 효모의 성장에 영향을 미치지 못하였다. 수평아리 사체의 추출물과 4% sugarcane molasses로 구성된 SCELP2 배지는 1% yeast extract, 2% bacto pepton 그리고 2% glucose로 구성된 YEPD 배지보다 효모수가 26% 더 증가하였다. 또한 SCELP2 배지에 4% 폐이스트를 첨가한 SBYW2 배지는 SCELP2 배지보다 효모수가 8% 증가하였다. SBYW2 배지에서 배양된 효모배양물을 5주 동안 육계에 급여한 결과 종체량은 4% 첨가구가 대조구보다 9% 증가하였다. 따라서 본 연구 결과 부화부산물로 발생되는 수평아리 사체는 사료용 효모배양물을 생산하기 위한 효모배양 배지의 질소원으로서 이용될 수 있음을 의미한다.
This study was conducted to determine the effects of excess vitamin A on alkaline phosphatase (ALP) activity, contents of calcium-binding protein (CaBP), bone gla-protein (BGP) in culture medium and CaBP mRNA expression in chicken osteoblasts in vitro. Osteoblastic cells in the tibia from 1-day-old Arbor Acre broiler chickens were isolated using enzyme digestion. The subconfluenced cells were divided into eight treatments with six replicates in each treatment and cultured in a medium containing either vehicle or different levels of vitamin A (0, 0.2, 0.6, 1.0, 2.0, 5.0, 10.0 and $20.0\;{\mu}g$/ml), and the control received an equivalent volume of ethanol. The incubation lasted 48 h. The results showed that vitamin A down-regulated ALP activity in the culture medium as well as CaBP mRNA expression of osteoblasts in a linear dose-dependent manner (p = 0.124 and p<0.10, respectively), and suppressed the contents of BGP and CaBP in the culture medium in a quadratic dose-dependent manner (p<0.05 and p<0.10, respectively) with increasing addition of vitamin A. The addition of 0-$0.2\;{\mu}g$/ml vitamin A to the culture medium increased ALP activity, BGP and CaBP contents as well as CaBP mRNA expression compared with other groups, but positive effects of vitamin A tended to be suppressed when vitamin A was increased to $1.0\;{\mu}g$/ml, and adverse effects occurred when vitamin A was increased to 10.0-$20.0\;{\mu}g$/ml. These results implied that there was a threshold level of vitamin A inclusion beyond which inhibitory effects occurred, and the mechanism by which overdose of vitamin A reduced bone growth in chickens was probably reduced osteoblastic cell activity, and inhibited expression of CaBP mRNA and CaBP secretion.
초산이온이 대장균 성장을 저해하는 현상을 규명 하기 위해서 M9 배지, LB 배지를 사용해서 플라스 크, 발효조 배양을 수행하였다. 대장균의 초산 생성 은 높은 포도당 초기 농도, LB 배지와 같은 복합 배 지에서 활발하였고, 플라스크 배양과 같은 pH 조절 이 되지 않는 배양방법에셔는 초산의 생성에 따른 pH 감소에 따라 세포성장이 많이 저해되었다. 초산 을 외부에서 첨가하여 세포성장에 마치는 영향을 조 사하여 보았는데 LB 배지를 사용한 플라스크 배양 에서는 첨가된 초산의 농도가 2g/l 이상, M9 배지 를 사용한 플라스크 배양에서는 초산의 농도가 4g/l 이상, 그리고 M9 배지를 사용한 발효조 배양에 셔는 8g/l 이상에서 초산의 성장 저해효과가 나타 다. LB 한천 배지를 볕에 깐 LB 액체 배지의 플라스 크 배양을 수행하였다. LB 한천의 양이 증가함에 따라서 한천에서 포도당의 방출이 일어나 최종 대장 균 세포 O.D.가 증가하였다.
As a result of broth substitutions when each culture-mediums were difference, whole culture-medium was found to be best feeding solution for production of PS-7 by B. indica. Maximal production of PS-7 was 1$10.0\;g/{\ell}$ and its conversion rate from 2% (w/v) glucose to PS-7 was 50%. After 48 hr, 50%(v/v) medium of working volume began to substitute in 7L jar fermenter. Production of PS-7 increased after 48hr, recovered productivity of PS-7. Following this preliminary culture, the resultant culture was subjected to continuous flow conditions controlled that the dilution rate were $0.01\;{\sim}\;0.04\;h^{-1}$. Production of PS-7 increased at dilution rate $0.0100\;h^{-1}$ whereas productivity of PS-7 decreased gradually in dilution rate $0.0200\;{\sim}\;0.0400\;h^{-1}$. Maximal production of PS-7 was $10.0\;g/{\ell}$ in continuous culture.
In order to use the symbiotic bacteria from ethomophatogenic nematodes as a biological control agent for agriculture, the cultural condition for maintaining phase I and antifungal activity was investigated. Symbiotic bacteria (SB) 1 stain from nematodes were selected from the three strains isolated from entomopathogenic nematodes. The growth of the SB 1 strain in NB, TSB, TY and YS medium was higher than that of the SB 2 and SB 3 strain. The packed cell volume of the SB 1 strain was reduced in NB medium which showed radical pH change. Phase I of the SB 1 strain was maintained in TSB medium after being stored for 2 weeks at $4^{\circ}C$. Culture broth with the SB 1 strain in TSB medium for 6 days and 7 days showed antifungal activities against Rhizoctonia solani KACC 40142, Botrytis cinerea Pers. KACC 40854, and Botrytis cinerea Pers. KACC 41008. Culture broth with the SB 1 strain in TSB medium containing 100 mM L-proline for 5 days showed antifungal activities against Rhizoctonia solani KACC 40142, and Botrytis cinerea Pers. KACC 40854.
This study was conducted to investigate the effect of growth regulators and medium composition on the growth of each stage in apical meristem culture for mass propagation of Zanthoxylum piperitum var. inerme Makino. The source material, shoot tip segments were taken from three-years old graft trees. Apical meristems were cultured in vitro on basal MS, GD, WS, half strength MS(1/2MS) and half strength GD(1/2GD) media supplemented with various concentrations for growth regulators(BA, IBA) and inorganic nutrients. The results summarized are as follows: 1. In culture establishment stage, ratio of culture establishment was 96.7% and the best resuit was obtained using MS medium supplemented with 1.0mg/l BA and 0.2mg/l IBA. 2. In shoot multitication stage, both shoot multiplication and growth were achieved in average 5.6cm. These results were obtained on in MS medium supplemented with 1.0mg/l BA and 0.2mg/l IBA. 3. In roothing stage, phloroglucinol(PG) acted as IBA synergist in root initiation. The most faverable combinations for root development was half-strength MS medium supplemented with 162mg/l PG and 0.2mg/l IBA, and ratio of rooting was 58.0%. 4. In Vitro formed plantlets were transplanted to paper pots in greenhouse with 85% of relative humidity. 96% of survival rate was obtained from artificial soil mix having same volume of sand, vermiculite, peat, and soil.
느타리버섯 8품종의 균사생장은 $25{\sim}30^{\circ}C$의 온도 범위와 $5.5{\sim}6.5$의 pH 범위에서 가장 우수하였다. 영양원의 선발시험에서 탄소원으로서는 황백당, 밀가루 및 옥수수가루가, 그리고 질소원으로서는 대두분이 공시균주의 균사생장이 가장 우수하였다. 농업적으로 이용성이 우수한 황백당 3%, 대두분 0.3%, 인산칼륨 0.05%, 황산마그네슘 0.05%를 배지 조성으로 하는 농업용 액체배지를 선발하였다. 삼각플라스크 배양에서는 250 ml의 erlenmeyer flask에서 보다는 250ml의 shake flask에서 직경 6 mm의 균사절편을 2개 접종하여 배양액량 100ml에서 배양했을 때 공시균주의 균사체 생산이 우수하였다. 그리고 erlenmeyer flask에서 배양방법을 달리하여 느타리버섯의 균사를 배양하였을 때, $45^{\circ}$ 경사배양한 처리구에서 균사체 생산이 가장 우수하였으며, 길이 $50mm{\times}$ 직경 10mm의 유리막대를 넣고 배양한 처리구에서는 균체량이 가장 적었지만 펄프형의 균사생육을 유도할 수 있었다.
본 연구에서는 극지 연구소로부터 분양 받은 Arthrobacter sp. PAMC 27388 균주에서 생산되는 아밀라아제(amylase)를 물리적 요인(physical factor)들의 변화를 통하여 생산배지 최적화를 수행하였다. 한천 배지 상에서 lugol solution을 이용한 클린환의 확인을 통하여 아밀라아제가 생산됨을 확인하였으며, 16S rDNA를 이용하여 동정한 결과 Arthrobacter sp. 임을 확인할 수 있었다. 최적화 이전의 아밀라아제 생산량은 1.66 mU/L로 확인되었다. 최적화 결과, 2.49 mL의 접종부피, pH 6.85, 42.87 mL의 배지 부피의 조건에서 가장 많은 양의 아밀라아제가 생산될 것으로 예상되었으며, 생산량은 2.84 mU/L로 예상되었다. 확인 실험을 통하여 최적화 이전과 비교하여 생산량이 약 150% 증가한 2.50 mU/L의 아밀라아제가 생산됨을 확인할 수 있었다.
Transgenic plants with the herbicide-resistance gene (bar gene) were obtained via organogenesis from isolated mesophyll protoplasts of Nierembergia repens after applying electroporation. Transient ${\beta}-glucuronidase$ (GUS) activity of electroporated protoplasts assayed 2 days after applying an electric pulse showed that optimum condition (transient GUS activity 319 pmol 4 MU/mg per min and plating efficiency 2.43%) for electroporation was 0.5 kV/cm in field strength and $100{\mu}F$ in capacitance. The protoplasts electroporated with the bar gene at this condition initiated formation of microcolonies on medium after 2 weeks. After 4 weeks of culture, equal volume of fresh 1/2-strength Murashige and Skoog (MS) medium containing 0.2 mg/l bialaphos was added for selection of transformed colonies. After 6 weeks of culture, growing colonies were transferred onto regeneration medium containing 1.0 mg/l bialaphos, on which they formed adventitious shoots 1-2 months after electroporation. The adventitious shoots rooted easily after transfer onto MS medium with bialaphos lacking plant-growth regulators. Transformation of these regenerants with the bar gene was confirmed by Southern analysis. Some of the transformants showed strong resistance to the application of bialaphos solution at 10.0 mg/l.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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