The isolation of respiratory viruses, especially from clinical specimens, often shows poor efficiency with classical cell culture methods. The lack of suitable methods to generate virus particles inhibits the development of diagnostic assays, treatments, and vaccines. We compared three inoculation methods, classical cell culture, the addition of a JAK2 inhibitor AZD1480, and centrifugation-enhanced inoculation (CEI), to replicate human respiratory syncytial virus (HRSV) and human metapneumovirus (HMPV). In addition, a combined method using AZD1480 treatment and CEI was used on throat swabs to verify that this method could increase virus isolation efficiency from human clinical specimens. Both CEI and AZD1480 treatment increased HRSV and HMPV genome replication. Also, the combined method using CEI and AZD1480 treatment enhanced virus proliferation synergistically. The combined method is particularly suited for the isolation of interferon-sensitive or slowly growing viruses from human clinical specimens.
Kim, Myoung-Dong;Lee, Woo-Jong;Park, Kwan-Hwa;Rhee, Ki-Hyeong;Seo, Jin-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.2
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pp.273-278
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2002
Two-step fed-batch fermentations were carried out to overproduce Bacillus licheniformis maltogenic amylase (BLMA) in recombinant Escherichia coli. The first step was to increase the cell mass by controlling the feeding of a glucose solution, while the second step was designed to improve the amylase expression efficiency by supplementing organic nitrogen sources. The linear gradient feeding method was successfully adopted to maintain the glucose concentration below 0.2 g/l during the fed-batch mode, as effectively minimizing acetic acid formation. When the dissolved oxygen (DO) level became limiting, an accumulation of acetic acid and drastic decrease in specific BLMA productivity were observed. Glucose and organic nitrogen sources consisting of yeast extract and casein hydrolysate were simultaneously supplied in the pH-stat mode to further increase the specific BLMA expression efficiency. An organic nitrogen source consisting of 200 g/1 yeast extract and 100 g/1 casein hydrolysate was found to be the best among the various combinations tested. The feeding of an organic nitrogen source in the second-step fed-batch period was highly beneficial in enhancing the BLMA production. The optimized two-step fed-batch culture resulted in 78 g/l maximum dry cell mass and 443 U/ml maximum BLMA activity, corresponding to 1.5-fold increase in the dry cell mass and 3.7-fold enhancement in BLMA production, compared with the simple fed-batch fermentation.
A phenolic resin industrial wastewater containing about 41,000 mg/l of phenol and 2,800 mg/l of formaldehyde was biologically treated by a mixed culture GE2 immobilized on ceramic beads. This study was carried out with three experimental groups : Control-only added the sludge of papermill wastewater ; GE2 treatment-added GE2 to Control ; Ceramic treatment-applied ceramic carrier to GE2 treatment. When the original wastewater was diluted 80 times with aerated tap-water, influent COD$_{Mn}$ WaS 1,140 mg/l and that of the effluent was in the range of 22-35 mg/l, which was not much different among the experimental groups. However, at 20-times dilution, influent COD$_{Mn}$ was 4,800 mg/l and the effluent COD$_{Mn}$ of Control, GE2 treatment and Ceramic treatment was 179, 128 and 94 mg/l, respectively. COD$_{Mn}$, removal efficiency by Ceramic treatment was the highest, at 98.0%. At this time, the effluent phenol concentration of Control, GE2 treatment and Ceramic treatment was 10.71, 7.93 and 5.60, respectively. As the dilution times decreased, the removal efficiency of COD$_{Mn}$ and phenol did not change much, but COD$_{Mn}$ and phenol concentration of the effluent increased. Consequently, it is likely that the phenolic industrial wastewater containing phenol and formaldehyde can be biologically treated using a GE2 and ceramic carrier and that at 40-times dilution, the effluent completely meets the effluent standards for industrial wastewater treatment plant.
Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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2006.05a
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pp.251-254
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2006
The application of reflex media in education has been widely used in the aspects of teaching & learning method, humanitarian education and the culture of school lives. It has been resulted from the generality of the applicable scope within conveying the information, propagation velocity, and the efficiency of the amount of conveyable information through the reflex. To utilize this kind of efficiency of reflex media in producing new graduation culture, I intend to show students the graduate reflex including their 3years' school lives and try to find out its effect from them. And then with this result I have studied the changes of the students behavior in the graduation ceremony. As a result I can notice that the intent of graduation reflex which aims to look back into their past and keep in mind it has been reflected to students. In addition I can ascertain their friendship and love for their school have been lifted while watching the reflex with laugh and cry.
The efficiency of bioremedation can be measured by the enumeration of microorganism, respiration rate and decomposition rate. The side-effect can be measured by using Daphnia, oyster larvae and rainbow trout. Oxygen transfer could be a problem in the on-site treatment. For these, hydrogen peroxide can be used for solvents such as benzenes. Oleophilic nitrogen and phosphorus can be added for the treatment of oil pollution. Mixed microbial population or pure culture can be used for the inoculum. The pure culture used is Pseudomonas and Phanerochate. Sometimes enzymes are added and Photodegadation is coupled to increase the efficiency. For the treatment of oil pollution residue on soil such as waste lubrication oil and machine oil sludges, top soil of 15cm∼20cm depth is plowed and oil residue with approximately 5% concentration is applied. The optimum pH range is 7∼8, the ratio of phosphorus to hydrocarbon is 1:800. Appropriate drainage is necessary. For the treatment of marine oil pollution residue, addition of oleophilic fertilizer is effective. Air pollutiant such as oder can be treated by bioremediation. In this case, biofilters or biosrubbers are used for the reactor.
This study was to examine the service and the product evaluation factors of Korean internet fashion shopping malls and to suggest marketing implications for Korean internet fashion shopping malls wanting to expand into the Chinese market. This study conducted a questionnaire survey for college female students in Qingdao, China, who have shopped at Korean internet shopping malls, and 310 surveys were used in the final analysis, frequency analysis, factorial analysis, and regression analysis. The results of the study were as follows. First, Most of the respondents answered that they found the Korean internet fashion shopping malls through the internet, and the most purchased item was outer clothing. Second, the system stability and web site structure excellence factors had a positive influence on the service satisfaction for the shopping mall 'S', while the system satisfaction, service efficiency, interactivity and web site structure excellence factors had positive influences on service satisfaction for the shopping mall 'P', and the system satisfaction, service efficiency, interactivity factors had positive influences on service satisfaction for the shopping mall 'N'. Third, examining the correlation between product satisfaction for the shopping mall 'S', 'P', and 'N' with fashion product evaluation factors showed that, design factors and quality excellence factors of the three shopping malls had positive influences on product satisfaction. The results of this research provide useful information in forming an efficient operating system and improving marketing strategies for internet fashion shopping malls planning to enter or having already entered the Chinese market.
The aim of this paper was to study the effect of spent medium recycle on Spodoptera exigua Se301 cell line proliferation, metabolism, and baculovirus production when grown in batch suspension cultures in Ex-Cell 420 serum-free medium. The results showed that the recycle of 20% of spent medium from a culture in mid-exponential growth phase improved growth relative to a control culture grown in fresh medium. Although both glucose and glutamine were still present at the end of the growth phase, glutamate was always completely exhausted. The pattern of the specific glucose and lactate consumption and production rates, as well as the specific glutamine and glutamate consumption rates, suggests a metabolic shift at spent medium recycle values of over 60%, with a decrease in the efficiency of glucose utilization and an increase in glutamate consumption to fuel energy metabolism. Baculovirus infection provoked a change in the metabolic pattern of Se301 cells, although a beneficial effect of spent medium recycle was also observed. Both growth rate and maximum viable cell density decreased relative to uninfected cultures. The efficiency of glucose utilization was dramatically reduced in those cultures containing the lowest percentages of spent medium, whereas glutamine and glutamate consumption was modulated, thereby suggesting that infected cells were devoted to virus replication, retaining their ability to incorporate the nutrients required to support viral replication. Recycle of 20% of spent medium increased baculovirus production by around 90%, thus showing the link between cell growth and baculovirus production.
This study describes an efficient protocol for Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of two subgroups of genotype AAA bananas (Musa acuminata cv. Pei Chiao and Musa acuminata cv. Gros Michel). Instead of using suspension cells, cauliflower-like bud clumps, also known as multiple bud clumps (MBC), were induced from sucker buds on MS medium containing $N^6$-Benzylaminopurine (BA), Thidiazuron (TDZ), and Paclobutrazol (PP333). Bud slices were co-cultivated with A. tumefaciens C58C1 or EHA105 that carry a plasmid containing Arabidopsis root-type ferredoxin gene (Atfd3) and a plant ferredoxin-like protein (pflp) gene, respectively. These two strains showed differences in transformation efficiency. The EHA105 strain was more sensitive in Pei Chiao, 51.3% bud slices were pflp-transformed, and 12.6% slices were Atfd3-transformed. Gros Michel was susceptible to C58C1 and the transformation efficiency is 4.4% for pflp and 13.1% for Atfd3. Additionally, gene integration of the putative pflp was confirmed by Southern blot. Resulting from the pathogen inoculation assay, we found that the pflp transgenic banana exhibited resistance to Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4. This protocol is highly advantageous to banana cultivars that have difficulties in setting up suspension cultures for the purpose of quality improvement through genetic transformation. In addition, this protocol would save at least 6 months in obtaining explants for transformation and reduce labor for weekly subculture in embryogenic cell suspension culture systems.
Several experiments were carried out to transfer LEAFY gene to Dendranthema grandiflora 'Shuho-no-chikara' by Agrobacterium LBA4404 carrying pSK109 encoding LEAFY gene. Kanamycin 10mg/L was used in first selection medium, and 20mg/L in the second one. Co-culture for 3 days was more effective in increasing transformation efficiency than that for 7 days. The transformation efficiency by Agrobacterium LBA4404 carrying pSK109 encoding LEAFY gene was about 2.8% until the second selection, but only 0.13% of shoots (two plants) was confirmed as a transgenic plants in Southern analysis. The escape of putative transformants was occured seriously in the process of selections, PCR analysis for confirming of neomycin phosphotransferaseII (npt II), and Southern analysis for LEAFY gene. One transgenic plant appeared 7 days'early flowering in field.
Information sharing is one of the key factors enhancing government efficiency and public convenience. However, critics argue that Korean government is now facing various kinds of barriers such as insufficient collaboration among agencies, inappropriate statutes, and technical problems. Thus, this study aims to develop policy alternatives that help resolve the existing problems suggested above. In order to achieve research objectives, this study employs both quantitative and qualitative methods as ways to investigate different dimensions of information sharing in government. Both survey and interview include six dimensions such as organization, technology, culture, management, policy and law. The results show that Korean government needs to implement following alternatives; developing its own database that helps support government decision making, changing organizational culture, continuous extension in terms of the number of object information and affiliated agency, and developing a statute dealing with government information sharing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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