• 한국임상수의학회지
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• 제29권5호
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• pp.377-383
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• 2012

송아지 설사병은 국내 축산산업에 큰 피해를 주는 중요한 질병이다. 다양한 감염성 원인체들이 송아지 설사병에 관련될 수가 있기 때문에 효과적인 치료를 위해서는 신속한 감별진단이 필수적이다. 따라서 소설사병 바이러스(BVDV), 소 코로나바이러스(BCoV), A형 소 로타바이러스(BRV), 살모넬라, $K99^+$ 대장균, Cryptosporidium parvum등의 6개의 주요 병원체들을 동시에 검출하는 두 개의 multiplex real-time PCR으로 구성된 PCR 패널을 개발하여 국내 농가에서 전북대학교 동물질병진단센터로 접수된 97개의 설사 분변을 검사하였다. 또한 현미경 검사법을 이용하여 97개의 분변에서 Coccidium 충란을 검사하였다. 개발된 multiplex PCR의 민감도는 BVDV, BCoV와 BRV의 경우는 0.1 $TCID_{50}$, $K99^+$ 대장균은 5 CFU, Salmonella는 0.5 CFU, Cryptosporidium는 50 oocysts로 측정되었다. 또한 multiplex PCR의 증폭효율은 병원체에 따라0.97에서 0.99였다. 국내에서 접수된97개의 분변 중 36개의 분변은 multiplex PCR에 의해 최소 하나의 병원체에 대해 양성으로 판정되었고, 6개의 샘플은 2개의 병원체에 동시에 양성반응을 보였다. 또한 1달 이상 연령의 송아지 분변48개에서는 Coccidium 충란이 발견되었다. 결과적으로, 새로이 개발된 multiplex real-time PCR은 BVDV, BCoV, BRV, $K99^+$ 대장균, Salmonella와 Cryptosporidium과 관련된 송아지 설사병을 신속하고 정확하게 진단할 수 있는 유용한 검사법이 될 수 있을 것으로 기대되며 향후 Coccidium까지 검출할 수 있는 동시 진단법이 개발될 필요가 있을 것으로 생각된다.

• 상하수도학회지
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• 제21권5호
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• pp.531-538
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• 2007

The effects of temperature, coagulants and pre-chlorination on the removal of turbidity and pathogenic protozoa by coagulation process were investigated using jar test of lab scale. In room temperature ($25^{\circ}C$), protozoa were removed over 1.0log at the proper concentration range of coagulants, and up to over 2log at the optimal concentration of coagulants. Considering the 1.5log target removal for Giardiain the processes of coagulation, sedimentation, and filtration, this results implies that the target could be satisfied. However, the removal of protozoa and turbidity was reduced, and optimal PAC concentration was narrowed in low turbidity and cold temperature ($5^{\circ}C$). These results suggest that the drop of coagulation efficiency may be occurred in winter if the conditions are not optimized. Despite the effect of water temperature, the relation of turbidity and protozoa removal appeared to be good. The various kinds of coagulants did not significantly affected for removals of turbidity and protozoa when the concentrations of $Al_2O_3$ were considered. Prechlorination did not increase or decrease the removal of turbidity and protozoa in optimum condition at room temperature, pH 7, 15mg/L of PAC concentration.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제49권1호
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• pp.25-31
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• 2011

Cryptosporidium parvum is known as one of the most highly resistant parasites to gamma irradiation. To morphologically have an insight on the radioresistance of this parasite, ultrastructural changes in C. parvum sporozoites were observed after gamma irradiation using various doses (1, 5, 10, and 25 kGy) following a range of post-irradiation incubation times (10 kGy for 6, 12, 24, 48, 72, and 96 hr). The ultrastructures of C. parvum oocysts changed remarkably after a 10-kGy irradiation. Nuclear membrane changes and degranulation of dense granules were observed with high doses over 10 kGy, and morphological changes in micronemes and rhoptries were observed with very high doses over 25 kGy. Oocyst walls were not affected by irradiation, whereas the internal structures of sporozoites degenerated completely 96 hr post-irradiation using a dose of 10 kGy. From this study, morphological evidence of radioresistance of C. parvum has been supplemented.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제34권2호
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• pp.113-120
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• 1996

서울 및 전남 지역 주민의 작은와포자충(Cryptosporidium parvum) 감염 상황을 알아보기 위하여 1992년에 표본조사를 실시하였다. 한편, 높은 오시스트 양성률을 보인 전남 화순군 이양면에 대해서는 1995년에 재조사를 시행하였다. 구체적 대상 지역은 서울의 8개 동(동) 및 전라남도 도시지역 4개 동 및 농촌지역 7개 면으로 하였다. 총 3,146명을 무작위로 선정하여 분변을 채취하였고, 포르말린-에텔법으로 침전시킨 다음 침사로부터 도말표본을 1인 1매 제작하였다. 표본을 modified acid fast 법으로 염색한 후 작은와포자충의 오시스트 양성 여부를 조사하였다. 총 오시스트 양성률은 7.9%(248/3. 146)이었으나 서을 0.5%(4/853) 및 전라남도 10.6% (244/2.293)로서 지역별로 큰 차이를 보였다. 오시스트의 크기는 $4.8{\;}{\pm}{\;}0.5{\;}by{\;}4.2{\;}{\pm}{\;}0.5{\;}\mu\textrm{m}$로 C. parvum에 부합되었다. 전라남도의 경우 농촌 지역은 14.0%로 도시 지역의 3.7%보다 유의하게 양성률이 높았다. 특히 대표적인 농촌 지역의 하나인 화순군 이양면의 경우에는 40.0%(74/185)의 매우 높은 양성률을 나타내었다. 절체 조사 대상자에서 볼 때 51-70세 연령군 이 모든 연령군 중 가장 높은 양성률을 보였다. 화순군 이양면에 대한 제2차 조사(1995년)에서는 주민 125명 중 44(35.2%)명이. 소 15두 중 14두(93.3%)가 분변내 오시스트 양성이었다 이상의 결과로 전라남도 농촌 지역이 작은와포자충의 농후 유행지임을 알 수 있었고 중요한 감염원 (감염 방식)으로는 오염된 물이나 감염된 소와의 접촉일 것으로 추정되었다.

• 상하수도학회지
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• 제20권1호
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• pp.71-78
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• 2006

The removal of protozoa in the coagulation process was evaluated under the different pH and turbidity using the jar test after the addition of polyaluminium chloride (PAC) as a coagulant. Two well-known protozoa of Cryptosporidium parvum and Giardia lamblia were tested at the same time with turbidity, the critical water quality parameter of the water treatment process. Both protozoa were removed about 1log (and up to 2log) at the optimum injection of PAC. The source water turbidity and pH affected the removal of protozoa and turbidity. At neutral and alkaline pH, 1.3-1.7log removal of protozoa for low turbid water with 5NTU, and 1.6-2.3log removal for high turbid water with 30NTU were achieved. However, at acidic pH, maximum 0.8-1.0log and 1.1-1.2log were removed for low and high turbid water, respectively, at the optimum PAC injection of 15mg/L. The relation of protozoa and turbidity removals were expressed as the 1st order equation (significantly positive relation) in the most of the tested conditions. In addition, the relation of protozoan removals with residual turbidity were also expressed the 1st order equation (significantly negative relation), although the significance of the equations were reduced at acidic pH. Therefore, residual turbidity could be a good index of efficient protozoan removal in the coagulation process, probably except at the low pH condition.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제42권2호
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• pp.85-89
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• 2004

Cryptosporidium parvum oocysts were isolated from a child suffering from acute gastroenteritis and successfully passaged in a calf and mice (designated hereafter SNU-H1) in the Republic of Korea; its molecular genotype has been analyzed. The GAG microsatellite region was amplified by a polymerase chain reaction (PCR), with a 238 base pair product, which is commonly displayed in C. parvum. The isolate was shown to be a mixture of the genotypes 1 (anthroponotic) and 2 (zoonotic). To study its infectivity in animals, 2 calves and 3 strains of mice were infected with the SNU-H1; in these animals, the propagation of both genotypes was successful. In immunosup-pressed (ImSP) BALB/c and C57BU6 mice the number of oocysts decreased after day 10 post-infection (PI); but in ImSP ICR mice, they remained constant until day 27 PI. The results show that both the C. parvum genotypes 1 and 2 can be propagated in calves and ImSP mice.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제36권3호
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• pp.171-182
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• 1998

반추동물에 있어서 쥐와포자충의 감염 동태에 관한 지식에는 불충분한 점이 많다. 그래서 11마리의 1~20일령의 재래산양과 면양에 $2{\;}{\times}{\;}10^7$의 쥐와포자충 (MCR주) 난포낭 (oocyst)을 한 번에 경구투여한 다음 분변 내의 난포낭 배설 양상을 관찰하였다. 11마리의 재래산양과 면양 중 4마리에서만 분턴에서 억대 (108/day/head)에 이르는 난포낭이 검출되었는데 반해 3마리에서 천만대, 나머지 예에서는 극히 적은 수만이 검출되었다. 전기생충증명기는 19-35일로서 평균 $28.1{\;}{\pm}{\;}5.8일$, 기생충증명기는 16-85일로서 평균 $47.8{\;}{\pm}{\;}21.1일$, 분변 내 난포낭 배설량은 최고가 $613.5{\;}{\times}{\;}10^6$, 평균 $156.6{\;}{\times}{\;}10^6{\;}{\pm}{\;}253.6{\;}{\times}{\;}10^$이었으며, 이 원충에 대한 연령의존성 저항은 인정 할 수 없었다 한편, 감염 후 44일째 난포낭 배설 극기에 희생시킨 재래산양의 제4위 점액세포의 미세융모 내에서 이 원충의 모든 단계의 발육기를 관찰할 수 있었다. 모든 발육기에서 바깥쪽이 숙주세포의 두터운 사상돌기로 둘러싸여 있는 쥐와포자충 특유의 전단 돌출부를 볼 수 있었다. 또, 이 원충의 재래산양/마우스 모델 감염실험에서 마우스 고유의 난포낭 배설 양상이 인정되었다. 이 원충의 면역원성과 난포낭의 재생산이 도전감염실험과 면역억제에 의하여 증명되었다. 이상의 실험 결과로 반추수에 있어서 쥐와포자충의 내생발육을 입증하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제35권4호
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• pp.245-250
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• 1997

마우스에 있어서 쥐와포자충 감염에 대한 면역기전을 해명하기 위하여 이 원충을 최초 및 도전 감염시켜 위점막 비만세포수의 동태를 관찰하였다. ICR계 SPF3주령 마우스에. 그리고 감염 내과 후 분변 내의 오오시스트 음전 후에 두 번에 걸쳐 각각 $2{\;}{\times}{\;}10^6$의 쥐와포자충 (MCR주) 오오시스트를 경구투여하였다 최초 감염 후 5일 및 도전 감염 후 10일 간격으로 희생시켜 위를 적출하여 pH 2.0으로 조정된 Camoy's solution에 5-6시간 고정한 다음 pH 0.3으로 조정된 l% alcian blue에서 2시간. pH 1.0의 0.5% sihnin에서 5분간 염색하여 위점막 비만세포수를 계수하였다. 위점막 비만세포수는 최초 감염 후 15일에서 25일까지 최고치에 이른 다음 30일에 감소하여 그 이후에는 정상으로 복귀하였으며. 도전 감염 후 20-30일에도 역시 증가하였다 최초 감염 후 이 세포의 증가 후에는 분변에 배설되는 오오시스트의 수도 감소하였으며. 도전 감염 후에는 분변에서 오오시스트를 거의 검출할 수 없었다 이러한 사실로 미루어 보아 이 세포는 최초 감염 흡충체 배출. 그리고 도전 감염의 방어기전과 관련이 있다고 생각한다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제56권5호
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• pp.419-427
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• 2018

This study aimed to develop a new multiplex real-time PCR detection method for 3 species of waterborne protozoan parasites (Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, and Cyclospora cayetanensis) identified as major causes of traveler's diarrhea. Three target genes were specifically and simultaneously detected by the TaqMan probe method for multiple parasitic infection cases, including Cryptosporidium oocyst wall protein for C. parvum, glutamate dehydrogenase for G. lamblia, and internal transcribed spacer 1 for C. cayetanensis. Gene product 21 for bacteriophage T4 was used as an internal control DNA target for monitoring human stool DNA amplification. TaqMan probes were prepared using 4 fluorescent dyes, $FAM^{TM}$, $HEX^{TM}$, $Cy5^{TM}$, and CAL Fluor $Red^{(R)}$ 610 on C. parvum, G. lamblia, C. cayetanensis, and bacteriophage T4, respectively. We developed a novel primer-probe set for each parasite, a primer-probe cocktail (a mixture of primers and probes for the parasites and the internal control) for multiplex real-time PCR analysis, and a protocol for this detection method. Multiplex real-time PCR with the primer-probe cocktail successfully and specifically detected the target genes of C. parvum, G. lamblia, and C. cayetanensis in the mixed spiked human stool sample. The limit of detection for our assay was $2{\times}10$ copies for C. parvum and for C. cayetanensis, while it was $2{\times}10^3$ copies for G. lamblia. We propose that the multiplex real-time PCR detection method developed here is a useful method for simultaneously diagnosing the most common causative protozoa in traveler's diarrhea.

• 대한환경공학회지
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• 제29권5호
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• pp.533-539
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• 2007

본 연구에서는 염소, 오존, UV에 의한 크립토스포리디움의 불활성화정도를 평가하기 위해 HCT-8세포를 사용하는 세포배양법과 최적확수기법을 결합하였다. 이 방법은 크립토스포리디움 감염성을 평가하는데 있어 "gold standard"라고 여겨지는 동물감염성 실험 만큼이나 민감하였고 소독제에 의한 크립토스포리디움의 불활성화를 측정할 수 있는 유용한 방법이었다. 실험실규모의 연구결과, $5^{\circ}C$, pH 7.0 조건에서 크립토스포리움을 약 1 log 불활성화시키기위한 염소와 오존 CT값은 각각 $1,250mg{\cdot}min/L,\;16mg{\cdot}min/L$ 이었다. 이는 오존을 사용하여 소독하였을 때 조차도 낮은 온도에서는 크립토스포리디움을 불활성화시키기 어렵다는 것을 보여주는 것이다. 염소와 오존과는 달리 UV는 온도에 상관없이 크립토스포리디움을 불활성화시키기에 매우 효과적이어서 UV가 2 $mJ/cm^2$ 조사되었을 때 크립토스포리디움이 3 log 이상 불활성화되었다.