Seo, Hee-Jung;Kang, Hyo-Jin;Choi, In-Ho;Cheon, Yong-Pil;Lee, Ki-Ho
Reproductive and Developmental Biology
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v.33
no.1
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pp.55-61
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2009
The epididymis in the male reproductive tract is the site where spermatozoa produced from the testis become mature. The epididymis is divided into 4 different segments, initial segment and caput, corpus, and caudal epididymis, depending upon functional and morphological features. Aquaporins (Aqps) are water channel molecules, which are present in the epididymis and play a major role in removal of epididymal water, resulting in creation of microenvironment for sperm maturation and concentration of sperms. Nandrolone decanoate (ND) is a synthetic anabolic-androgenic steroid, which is used to treat clinical diseases and improve physical ability and appearance. Even though it is well determined that the ND causes the male infertility by affecting the testis, little is known the effect of the ND on the epididymis. The present study was focused to examine the effect of ND at different treatment doses and periods on expression of Aqp1 and Aqp9 genes in the epididymis of pubertal rats. Results showed that mRNA expression of Aqp1 and Aqp9 genes among the parts of the epididymis was differentially regulated by ND treatment doses. In addition, treatment periods of ND caused differential expression of Aqp1 and Aqp9 mRNAs among segments of the epididymis. Therefore, it is believed that male infertility induced by ND could be resulted not only from malfunction of the testis but also from aberrant gene expression of Aqp1 and Aqp9 in the epididymis.
The reproductive function of G-protein subunit Galphaq (GNAQ), a member of the G protein alpha subunit family, has been extensively studied in humans and rats. However, no data is available on its status in ruminants. The objectives of this study were to evaluate the expression pattern of the GNAQ in the testis and epididymis of sheep by polymerase chain reaction (PCR). The mRNA expression levels were detected by real-time fluorescent quantitative PCR, and cellular localization of GNAQ in the testis and epididymis was examined by immunohistochemistry. Additionally, GNAQ protein was qualitatively evaluated via western blot, with the results indicating that similarities between GNAQ mRNA levels from sheep was highly conserved with those observed in Bos taurus and Sus scrofa. Our results also indicated that GNAQ exists in the caput and cauda epididymis of sheep, while GNAQ in the testis and epididymis was localized to Leydig cells, spermatogonial stem cells, spermatocytes, Sertoli cells, spermatid, principal cells, and epididymis interstitial cells. The concentrations of GNAQ mRNA and protein in the caput and cauda epididymis were significantly greater than those observed in the corpus epididymis (p<0.01) and testis (p<0.05). Our results indicated that GNAQ exists at high concentrations in the caput and cauda epididymis of sheep, suggesting that GNAQ may play an important role in gonad development and sperm maturation.
Recent studies clearly demonstrated that the novel expression of LH gene in the rat testis, and suggested the local action of the LH-like molecule. The present study was performed to analyze the expression of LH genes in the rat accessory reproductive organs. Expression of LH subunit genes in the rat uterus and epididymis was demonstrated by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and specific LH radioimmunoassay (RIA). The $LH_{beta}$ transcripts in these organs contained the published cDNA structure, the pituitary type exons 1-3, which encoded the entire $LH_{beta}$ polypeptide. Presence of the transcripts for the ${\alpha}$-subunit in the rat reproductive tissues were also confirmed by RT-PCR. In the LH RIA, significant levels of LH were detected in crude extracts from the rat ovary, uterus and epididymis. The competition curves with increasing amount of tissue extracts were parallel with those of standard peptide, indicating that the immunoreactive LH-like materials in these tissues are similar to authentic pituitary LH molecule. In rat epididymis, the highest amount of immunoreactive LH was detected in corpus area. Our findings demonstrated that the genes for LH subunits are expressed in the rat accessory reproductive organs, and suggested that these extrapituitary LH may act as a local regulator with auto and/or paracrine manner.
In the present study, real-time PCR was performed to evaluated expression of several isoforms of monocarboxylate transporters(MCTs) and two known MCT regulatory proteins, basigin (Bsg) and embigin, in the epididymis of the male reproductive tract during postnatal development. In addition, ERα�-mediated regulation of MCT1 expression in the epididymis was determined with estrogen receptor(ER) α� knockout(α�ERKO) mice by immunohistochemistry. Results from the current study demonstrated differential expression of MCT isoform(MCT 1, 2, 3, 4, and 8), Bsg, and embigin mRNAs in rat epididymis according to postnatal age and epididymal region. In addition, immunohistochemical study of MCT1 revealed the limited localization of MCT1 at apical area of corpus and caudal epididymis. The present study also showed that expression of MCT1 was not directly regulated by ERα�. The findings from the current study suggest that MCTs would involve in establishing adequate microenvironment for sperm maturation and storage in the epididymis, eventually leading to maintenance of male fertility.
Objective: We examined the localization and expression of H+ pumping vacuolar ATPase (V-ATPase) and cytokeratin 5 (KRT5) in the epididymis of pigs, expressed in clear and basal cells, respectively, during postnatal development. Methods: Epididymides were obtained from pigs at 1, 7, 21, 60, 120, and 180 days of age; we observed the localization and expression patterns of V-ATPase and KRT5 in the different regions of these organs, namely, the caput, corpus, and cauda. The differentiation of epididymal epithelial cells was determined by immunofluorescence labeling using cell-type-specific markers and observed using confocal microscopy. Results: At postnatal day 5 (PND5), the localization of clear cells commenced migration from the cauda toward the caput. Although at PND120, goblet-shaped clear cells were detected along the entire length of the epididymis, those labeled for V-ATPase had disappeared from the corpus to cauda and were maintained only in the caput epididymis in adult pigs. In contrast, whereas basal cells labeled for KRT5 were only present in the vas deferens at birth, they were detected in all regions of the epididymis at PND60. These cells were localized at the base of the epithelium; however, no basal cells characterized by luminally extending cell projections were observed in any of the adult epididymides examined. Conclusion: The differentiation of clear and basal cells progressively initiates in a retrograde manner from the cauda to the caput epididymis. The cell-type-specific distribution and localization of the epithelial cells play important roles in establishing a unique luminal environment for sperm maturation and storage in the pig epididymis.
To characterize the difference in glycoconjugates of mouse epididymis, lectin labeling of the tissue section was conducted using Ulex europaeus agglutinin I(UEA I), succinylated wheat germ agglutinin(sWGA), and Griffonia simplicifolia lectin-I(GSL-I). UEA I which binds to outer $\alpha$-L-fucose residue that is a terminal sugar of the side chain branched from oligosaccharide chain gave the labeling in the proximal caput epithelia exclusively. Lumen was commonly labeled in all of the organ. It suggested that the glycoconjugates bearing outer $\alpha$ -L-fucose residue were largely expressed in the initial segments ot epididymis and subjected to secretion. GSL-I which binds to terminal $\alpha$ -D-galactosyl residue of glycoconjugates gave the labeling in the cytoplasm of clear cells and basal cells, and cilia in corpus and cauda regions but not in the caput region. There was no vast difference in labeling pattern by sWGA which binds to N-acetyl-glucosamine residue among the epididymal regions. Clear cells in corpus and cauda epithelia showed more intense labeling by sWGA compared to principal cells, suggesting the functional specialization of this type of cells. The labeling intensities of luminal content by UEA I and sWGA decreased in cauda region compared to corpus region suggesting the presence of enzymatic activities responsible for processing the $\alpha$-L-fucose and N-acetyl-glucosamine residues from secreted glycoconjugates. In summary, the difference in glycoconjugates bearing the $\alpha$-L-fucose, $\alpha$-D-galactose, and N-acetyl-glucosamine residues according to the type of epithelial cells and epididymal segments suggests functional specialization and different roles of each segment in the processing of sperm surface antigens during the epididymal transit.
Direct communication between neighboring cells via gap junction in tissue is important for maintenance and regulation of its physiological functions. Each epididymal region has different composition of cell types. It is well recognized that the epididymis is a steroid hormone-responsive tissue. The present study was designed to determine the effect of estradiol benzoate (EB) or flutamide exposured at the early postnatal age on the expression of connexin (Cx) isoforms in the caudal epididymis. The EB or flutamide was subcutaneously administrated to male Spragure Dawley rat at 7 days of age, and expressional changes of Cx isoforms in the adult corpus epididymis were determined by quantitative real-time PCR. The treatment of low-dose EB resulted in decreases of Cx30.3, Cx31.1, Cx37, and Cx45 expression but caused an increase of Cx32 expression. Exposure to high-dose EB led into expressional increases of Cx31, Cx31.1, Cx32, Cx40, and Cx43, even though a decrease of Cx37 expression was found with a high-dose EB treatment. A low-dose flutamide induced increases of Cx31, Cx31.1, Cx32, and Cx43 expression but a decrease of Cx37 expression. Expression of most Cx genes were significantly increased by a high-dose flutamide, while no expressional change of Cx26 and Cx40 was detected by a high-dose flutamide. These results indicate that expression of Cx isoforms in the caudal epididymis is altered by exposure to steroidal compounds at the prepubertal age. It is suggested that a contact with environmental exogenous materials during the early postnatal period would lead to alteration of epididymal functions at the adult.
The ultrastructure of epididymal epithelium of 10, 20, 35 and 80 day-old mouse was observed to study the differentiation and function of the epithelial cells in connection with the absorption and secretion during sexual matruation. The differentiation of epididymis was divided into three phases of, 1) undiflerentiated phase until the day 20 after birth, 2) growing and differentiating phase between the day 20 and 35, and 3) maturating phase up to the adult. Each phase was closely related with the lumination of seminiferous tubule and the influx of spermatozoa within testicular fluid from testis. In adult, the ultrastructural features appeared an absorptive function in the principal cells of proximal caput epididymis, and a strong activity of protein synthesis and secretion in distal caput, corpus and cauda epididymis. Clear cells were predominantly located in corpus and cauda epidiymis, and plenty of absorption vesicles including membranous particles assumed to be the cellular residues from spermatozoa were observed at apical region. Therefore, the distribution of various cell types of epithelium and the ultrastructure even in the same type of epithelial cell, were different according to the epididymal regions.
Glucose is a major source of metabolic fuel and lipid and protein syntheses. Transport of glucose into the cell is regulated by an action of glucose transport.associated transporters, especially solute carriers 2A (Slc2a, protein symbol GLUT). The present study was focused on examination of mRNA expression of various Slc2a isoforms in the epididymis during postnatal development. Total RNAs isolated from different epididymal segments (caput, corpus, and caudal epididymis) were utilized for real-time polymerase chain reaction analyses. Results showed that Slc2a 1, 3, 4, 5, and 8 were expressed in the entire epididymal regions. In addition, the abundance of these Slc2a isoforms' transcripts was different within each epididymal regions. Moreover, the present study showed differential expression of these Slc2a isoforms among different epididymal segments according to postnatal ages. The current study suggests that glucose transport in the epididymis via various Slc2a isoforms would be necessary for maintenance of the epididymal functions.
Localization of mercury compounds was investigated in selective regions of the male reproductive tract using autometallography. The results demonstrated that mercury was observed in Sertoli and Leydig cells in testis, but not in the epithelial cells of rete testis and germ cells. In the efferent ductule, mercury compounds were observed in the cytoplasmic compartments of epithelial cells in the proximal and common regions, while they were observed in the supranuclear cytoplasmic compartments in the conus region. In the epididymis, the compounds were observed in the cytoplasmic compariments of narrow and basal cells, but not in the principal cells of the initial segment. In contrast, the compounds were evenly detected in the cytoplasmic compartments of principal cells in the caput. In the corpus and caudal epididymis, the compounds were observed in the basal region of principal cells. The data shows that mercury is differentially accumulated in the male reproductive tract in a region-specific manner.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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