The rice blast disease caused by of Magnaporthe oryzae is one of the most destructive diseases of rice. By the microarray analysis, we profiled expression changes of genes during conidiation and found out many putative genes that are up-regulated. Among those, we first selected MGG_06399 encoding a dual-specificity tyrosine-regulated protein kinase (DYRK), homologous to YAK1 in yeast. To investigate functional roles of MoYAK1, We made ${\Delta}Moyak1$ mutants by homology dependent gene replacement. The deletion mutant showed a remarkable reduction in conidiation and produced abnormally shaped conidia smaller than those of wild type. The conidia form ${\Delta}Moyak1$ were able to develop a germ tube, but failed to form apppressoria on a hydrophobic coverslip. The ${\Delta}Moyak1$ formed appressria on a hydrophobic cover slip when exogenous cAMP was induced, but the appressoria shape was abnormal. The ${\Delta}Moyak1$ also formed appressoria abberent in shape on onion epidermis and rice sheaths and failed to penetrate the surface of the plants. These data indicate that MoYAK1 is associated with cAMP/PKA pathway and important for conidiation, appressorial formation and pathogenic development in Magnaporthe oryzae. Detailed characterization of MoYAK1 will be presented.
흰날개무늬병원균의 분생자과를 형성시키기 위하여 NUV 광을 조사하면서 무균적으로 배양하였다. 흰날개무늬병원균을 Oatmeal Agar 배지상에 7일동안 배양시킨 후 살균처리된 배나무 가지를 을려놓아 2$0^{\circ}C$실온에서 5일 동안 NUV 광을 조사하면서 배양하였다. 그 결과, 배나무 가지표면에 분생자병속이 처리 5주후에 95% 형성시킬 수 있었다. 또한, 유기된 분생자병속으로부터 63%의 분생자가 형성되는 것을 관찰하였다. 새롭게 형성된 분생자병속과 분생자의 형태적 특성은 Dematophora necatrix에 대하여 보고된 것과 동일하였다.
인산가용화균 Aspergillus sp. PS-104를 생물비료화하기 위하여 이 균주의 액침배양 시 mycelial pellet 형성을 억제하는 배양조건(배지 종류, 초기접종량)과 배지 첨가물(점토광물, 계면활성제, PEG 200)의 종류에 대하여 조사하였다. 그 결과 이 균주는 배지 종류를 달리하여 배양했을 때 SDB=YPD>PDB 순으로 pellet 크기가 감소하였다. 또한 이 균주는 $1{\times}10^{3}{\sim}1{\times}10^{7}$ conidia/ml 범위의 초기접종농도에서는 농도가 높을수록 pellet의 크기가 감소하였다. 또한 bentonite를 제외한 점토광물인 zeolite, diatomite, 황토, kaoline과 talc를 0.1% 농도로 배지에 첨가하였을 경우 pellet 크기가 대조군에 비해서 1/6${\sim}$1/4로 감소하였다 계면활성제인 Tween 80과 Triton X-100 및 PEG 200을 0.1% 농도로 첨가하였을 경우 pellet의 크기가 감소하였고, SDS를 첨가한 경우에는 균의 성장이 완전히 저해되었다.
Previously, we identified the 20S proteasome ${\alpha}$-subunit of Magnaporthe oryzae (M. oryzae) induced during appressorium formation, and detected an increase in multiple protein ubiquitination during the early appressorium formation process (Kim et al., 2004). In this study, we further attempted to determine whether the proteasome is involved in the appressorium formation of M. oryzae both in vitro and in planta, using proteasome inhibitors. A significant increase in 20S proteasome during fungal germination and appressorium formation was observed using Western blot analysis with 20S proteasome antibody, demonstrating that proteasome-mediated protein degradation was involved in appressorium formation. Pharmacological analysis using proteasome inhibitors, MG-132, proteasome inhibitor I (PI) and proteasome inhibitor II (PII) revealed that germination and appressorium formation were delayed for 4 to 6 h on rice leaf wax-coated plates. Similarly, the treatment of proteasome inhibitors with fungal conidia on the rice leaf surface delayed appressorium formation and host infection processes as well. Additionally, fungal pathogenicity was strongly reduced at 4 days' postfungal infection. These data indicated that the fungal 20S proteasome might be involved in the pathogenicity of M. oryzae by the suppression of germination and appressorium formation.
전라북도 동충하초 재배농가 오염균은 Paecilomyces farinosus(Holm ex S. F. Gray) Brown & Smith로 동정되었으며 특성은 다음과 같다. 분리$.$균은 감자한천배지 상에서 24$\pm$1$^{\circ}C$, 14일간 배양한 결과 배지 앞면은 흰색, 뒷면은 노란색을 띠고 직경 19mm로 생장하였다. 균사 직경은 1.2-1.9$\mu\textrm{m}$이며 분생자병은 투명하며 직경 1.3-1.5$\mu\textrm{m}$이다. phialides는 윤생형으로 분생자병으로부터 2-4개가 형성되며 기부는 부풀어 있고 상단부로 갈수록 폭이 좁아지는 호리병형으로 3.8-5.8${\times}$1.5-1.8$\mu\textrm{m}$이다. phialides의 neck은 직경 0.6-0.8$\mu\textrm{m}$이며, 분생 포자는 분생자형성세포로부터 연쇄상으로 발생하며 타원형 혹은 방추형이며 크기 1.8-2.4${\times}$l.1-1.4$\mu\textrm{m}$이다. 균 농도 1${\times}$$10^{8}$ conidia/$m\ell$로 경피 접종된 누에의 감염률은 41.3%이었으며, 분생자병속 형성률은 23.7%이었다. 균 접종 5-9일 후 누에피부 상에 검은 반점이 형성되었으며, 보호기간 3-4일 후 감염누에 표피는 흰색의 균사에서 점차 노란색 균사로 덮이며, 분생자병속이 발생되었다 분생자병속은 노란색, 선단부로 갈수록 흰색을 나타내었으며 4-6mm 길이로 표피에 한 개에서 다수가 형성되었다. 또한 성숙된 분생자병속의 끝부분에는 분지 후 흰색의 분생포자가 다량 발생하였다.
Effect of temperature, relative humidity (RH) and free water period on anthracnose development by Colletotrichum gloeosporioides was examined on red pepper fruits. Mycelial growth of C. gloeosporioides was best at 28$^{\circ}C$, but greatly retarded at 32$^{\circ}C$. Minimum inoculum density required for lesion development varied with isolates, but was mostly above 1.0$\times$105 conidia/ml. Optimum temperature for lesion development on fruits was 31$^{\circ}C$. Percentage of lesion development was decreased as incubation temperature decreased. similar trend of temperature response was observed for acervulus formation on the developed lesions. Acervuli were not developed on the lesion as low as at 19$^{\circ}C$. Lesion development and acervuli formation tended to increase as increasing RH, but were greatly inhibited at the RH lower than 88%. More than 2 hours of free water period after inoculation were required for lesion development. Lesion development was increased as free water period increased. This study indicates that anthracnose development by C. gloeosporioides favors the conditions of high temperature above 28$^{\circ}C$, high humidity above 90% RH, and requires free water period longer than 2 hours.
근 동질유전자 보리계통에서 보리흰가루병에 대한 유도저항성의 몇가지 특성이 평가되었다. 열처리하여 살생시킨 비친화성균의 포자를 보리 1계통에 전접종한 후 경시적으로 전접종원 제거한 다음 동일부위에 친화성균을 후접종하였을 때 저항성은 유도되지 않았다. 그러나 살상된 전접종균을 제거하지 않고 친화성균을 후접종하였을 경우는 친화성균에 의한 균총형성이 $87.1\~91.2\%$까지 감소하였다. 감염이 이루어지기 전에 전접종했던 비친화성균을 제거하고 친화성균을 후접종하였을 경우에는 친화성균에 의한 균총형성의 감소만이 일어났으나 감염이 이루어진 후에 비친화성균을 제거하고 친화성균을 후접종한 경우에는 친화성균의 균총형성감소는 물론, 형성된 균총의 병반형이 모두 변하였고, 그 중 몇몇은 균총주위에 갈색반점이 형성되었다. 친화성균 혹은 비친화성균을 보리 1차전개엽의 중앙에만 전접종한 후 다시 잎의 전면에 경시적으로 친화성균을 후접종하였을 경우 중앙부위인접상단과 인접하단에서 후접종원에 의해 형성된 균총의 수는 대조구와 차이가 없었다. 그러나 인접사단에서는 형성된 친화성균총의 병반형이 변하지 않았으나 인접상단에서는 균총의 병반형이 약간 변화하였고 이들 균총들에 의해 형성된 포자의 수는 대조구보다 현저히 감소하였다.
클로렐라는 광합성을 통해 독립적으로 생활할 수 있는 녹조류로서 작물의 생육촉진효과와 더불어 식물병 발생을 억제한다고 알려져 있다. 그러나 클로렐라에 의한 식물병 억제 기작에 대해서는 연구가 미흡한 실정이다. 본 연구에서 클로렐라 일종인 C. fusca의 현탁액을 오이 잎에 전처리하였을 때 오이탄저병 진전이 억제되는지 여부를 조사하였으며, C. fusca를 전처리한 오이 잎에서 오이탄저병 억제 기작을 알아보았다. 그 결과, 무처리한 잎에 비해 C. fusca를 전처리한 잎에서 C. orbiculare의 부착기 형성률이 뚜렷하게 감소하였다. 또한 접종 부위에서 발견된 포자수도 무처리한 잎에 비해 유의성 있게 감소하였다. 한편, 살균제 $Benomyl^{(R)}$을 전처리한 오이 잎에서도 C. orbiculare의 부착기 형성률이 크게 감소하였으며 포자수도 C. fusca를 전처리한 잎과 유사하게 감소되었다. 따라서 이들 결과를 통해 C. fusca 전처리에 의해 오이탄저병 발생이 억제되며 이는 C. fusca에 의한 식물잎 표면에서 생화학적 또는 구조적 작용으로 인한 C. orbiculare의 부착기 형성 감소가 그 원인 중 하나일 것이라고 생각된다.
Biofilms are of vital significance in bioconversion and biotechnological processes. In this work, sugarcane molasses was used to enhance biofilms for the improvement of the production of fumigaclavine C (FC), a conidiation-associated ergot alkaloid with strong anti-inflammatory activities. Biofilm formation was more greatly induced by the addition of molasses than the addition of other reported biofilm inducers. With the optimal molasses concentration (400 g/l), the biofilm biomass was 6-fold higher than that with sucrose, and FC and conidia production was increased by 5.8- and 3.1-fold, respectively. Moreover, the global secondary metabolism regulatory gene laeA, FC biosynthetic gene fgaOx3, and asexual central regulatory genes brlA and wetA were upregulated in molasses-based biofilms, suggesting the upregulation of both asexual development and FC biosynthesis. This study provides novel insight into the stimulatory effects of molasses on biofilm formation and supports the widespread application of molasses as an inexpensive raw material and effective inducer for biofilm production.
Rusty root of ginseng has been known as one of the limiting factors in ginseng production in Korea. An attempt was, therefore, made to elucidate biological and chemical natures of the rusty root, and the redox Potential of the ginseng cultivated soils were measured and compared with diseased and non-diseased soils. Reddish discoloration was most frequently observed on the epidermis of ginseng root and the pigments were accumulated in all epidermal cells of the diseased lesions. The lower the redox potential of the ginseng cultivated soil was, the more severe the rusty root was observed. Fe content in the diseased epidermis was 3 times higher than that of healthy one. Organic acids such as oxalic, malonic, succinic, and citric acids were also higher in the mss root than in the healthy one. Thin layer chromatogram of phenolic acid fractions obtained from the epidermal cells of the rusty root of ginseng exhibited 3 to 4 unidentified substances not found in the healthy root. Also lignification of the epidermal cells and the activity of phenylalanine ammonia lyase were greater in the rusty root than the healthy root. Colony formation and conidia production of F. solani, And mycelial growth and sclerotium formation of Sclerotinia sp. isolated from ginseng root were suppressed in a nutritionally minimal medium supplemented with water extract of rusty ginseng root epidermis. It is, therefore, suggested that rusty root of ginseng is caused by unfavorable rhizosphere environmental stress or stresses resulting abnormal metabolism in the root as a selfdefence mechanism of non-specific resistance responses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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