This study was done to evaluate the effect of fixed orthodontic patients on the level of oral streptococci, Streptococcus mutans, lactobacilli, yeasts in saliva. 35 patients wearing bands were compared with age-matched 35 non-banded control group by conlony counting method on the specially designed culture medium. The following results were obtained ; 1. The colony forming unit(CFU) of total streptocci per militer of saliva in subjects with or without orthodontic treatment showed no significant statistical difference between them(p>0.05). 2. The colony forming unit(CFU) of total Streptococcus mutans per mililiter of saliva in subjects with orthodontic treatment showed significantly higher than those without orthodontic treatment(p<0.05). 3. The colony forming unit(CFU) of total lactobacilli per mililiter of saliva in sujects with or without orthodontic treatment showed no significant statistical difference between them but higher tendency in those with orthodontic treatment(p=0.052). 4. The colony forming unit(CFU) of total yeasts per mililiter of saliva in subjects with or without orthodontic treatment showed no significant statistical difference between them(p>0.05).
Objectives: The purpose of this study was to compare colony forming unit (CFU) method and multiplex real-time polymerase chain reaction (MRT-PCR) method for accurate quantitative analysis of bacteria. Methods: We compared the CFU method and the MRT-PCR method, which are still used in Korea, for Prevotella intermedius (P. intermedius), a periodontal disease pathogen selected by MRT-PCR, and Streptococcus mutans (S. mutans), a dental caries causative organism. The subjects of this study were 30 patients who visited the C dental hospital. Results: Total microorganisms in MRT-PCR method were significantly higher in both types of bacteria (p<0.05), since DNA of dead bacteria was also analyzed. This was because the periodontal dise(-) anaerobes, and even dead bacteria contain large amounts of toxic substances called LPS in the extracellular membrane, and fimbriae and pili, which are motility structures, still remain as a strong toxic substance in periodontal tissue. Conclusions: Therefore, in terms of the total amount of bacteria found, the MRT-PCR method will be a useful technique for searching all the bacteria in the oral cavity including live bacteria, as well as sterilization.
Chemokines are small chemotalic cytokines that have a number of biological functions. Some chemokines regulate the proliferation of hematopoietic stem and progenitor cells(HSPC). Leukotactin-l(Lkn-l) is a CC chemokine and is known to reduce colony forming unit(CFU). The N-terminal truncated Leukotactin-l(rtLkn-l), produced by Pichia pastoris, suppressed CFU from 40 to 60%. The rtLkn-l protected CFU from cytotoxic effect of anticancer drug such as Ara-C, doxorubicin, cyclophosphamide and 5-FU by cell cycle arrest.
The polymerase chain reaction was used to selectively detect sequences within the fimbrial antigen of Salmonella enteritidis. Sterile milk was artificially inoculated with known amount of S. enteritidis and then DNA was extracted with guanidine thiocyanate/phenol/chloroform, followed by PCR. A detection limit of as few as 100 colony forming unit (cfu) per 0.5 ml milk was obtained with this method. For the whole procedure, it took only 5 h. A semi-quantitative polymerase chain reaction assay which allows an estimation of colony forming unit of S. enteritidis was developed. Known amount of standard plasmid pGem-4Z-Sef B(-) containing cloned S. enteritidis fimbrial antigen gene was co-amplified with Salmonella genomic DNA isolated from artificially inoculated milk. The same set of primers were used for the amplification and the products were cleaved with Bam HI. The concentration of the target DNA could be estimated by comparing the intensity of the two bands after electrophoresis. The PCR-based protocol described in this paper provides a rapid, simple, and sensitive method for detecting S. enteritidis in milk.
Background: Ginseng (G) and Ligustrum lucidum Ait (LLA) are core traditional Chinese medicines in treating myelosuppression formula. The present study was designed to profile effect of G and LLA herb pair (G-LLA) on myelosuppressed mice. Methods: The mice myelosuppression model was established by intraperitoneal (i.p.) injection of cyclophosphamide (Cy). Hematopoietic function of bone marrow was measured by hemopoietic progenitor cell culture and peripheral blood count, and serum hemopoietic factors were tested by enzyme-linked immunosorbent assay. Bone marrow cell cycle was performed by flow cytometry. HPLC was used to measure 20 potential chemical components related to myelosuppression, including ginsenoside Rg1, Re, Rb1, Rc, Rb2, Rb3, Rd, Rk3, Rh4, 20 (S)-Rg3, 20 (R)-Rg3, Rk1, Rg5, salidroside, and so on. Results: G, LLA, and G-LLA improved the amount of peripheral blood cells and bone marrow cells of myelosuppressed mice (P < 0.01). They significantly increased the colony quantity of colony-forming unit-granulocyte macrophage, burst-forming unit-erythroid, colony-forming unit-erythroid, and colony-forming unit-megakaryocyte and amount of G2/M and S phase cells (P < 0.01). They also significantly decreased the amount of hematopoiesis-related cytokines (P < 0.01). The content of chemical components in G-LLA changed, and the change of rare saponin was the most obvious. Conclusion: These results show that G-LLA herb pair might produce synergistic or complementary compatibility effects on bone marrow suppression after chemotherapy. It suggests that the substance basis of G-LLA for treating bone marrow suppression may be effective chemical components.
The purpose of this work was to investigate the effect oftea catechin, epigallocatechin gallate (EGCG) on killing of oral bacteria. The antibacterial activity of 2.5 mg/ml and 5.0 mg/ml EGCG was investigated for target bacteria of which initial cell number was approximately adjusted to $10^{7}ml$. The antibacterial activity of EGCG was proportional to the concentration according to colony-forming unit(CFU) of target bacteria enumerating on selective and complex media. Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus at 5mg/ml EGCG were completely killed within 8 hrs. Lactobacillus plantarum and Lactobacillus acidophilus were also killed within 2 hrs and 4 hrs under the same conditions, respectively. Oral bacteria at 2.5 mg/ml EGCG were completely killed within 10 hr. Colony numvers of S. mitis and S. salivarius treated with 2.5 mg/ml EGCG were decreased on MS solid media and no colony was observed on the media within 12 hrs. In consequence, EGCG would be a natural and effective compound that kill oral bacteria being caused of bad breath, plaque and gingivitis, and for preventing and treating dental caries.
Kim, Soon Ki;Ghil, Hye Yoon;Song, Sun U.;Choi, Jong Weon;Park, Sang Kyu
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.48
no.8
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pp.894-900
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2005
Purpose : Because of the unavailability of marrow transplantation, umbilical cord blood (CB) is increasingly being used. We evaluated the potential of ex vivo expansion and clonality in CD34+ cells separated from cord blood source and mobilized peripheral blood (PB) in a serum-free media. Methods : The CD34+ cells, selected from CB and mobilized PB, were expanded with hematopoietic growth factors. They were then cultured for burst-forming units of erythrocytes (BFU-E), colony-forming units of granulocytes and monocytes (CFU-GM) and colony-forming units of megakaryocytes (CFU-Mk) at culture days 0, day 4, day 7, and day 14 with various growth factors. Results : The CB-selected CD34+ cells showed significantly higher total cell expansion than those from the PB at day 7 (2 fold increase than PB). The CB-selected CD34+ cells produced more BFU-E colonies than did the PB on culture at days 7 and at day 14. Also, the CB-selected CD34+ cells produced more CFU-Mk colonies than did the PB on culture at day 4 and at day 7. Conclusion : The ex vivo expansion of the CB cells may be promising in producing total cellular expansion, CFU-Mk and BFU-E compared with PB for 7 to 14 days. The growth factors combination including megakaryocyte growth and development, flt3-ligand and interleukin-3 showed more expansion in the view of total cells and clonal maintenance compared with less combination.
Lee, Moses;Choi, Yoorim;Yoon, Dong Suk;Lee, Jin Woo;Yoon, Gil Sung;Choi, Woo Jin;Han, Seung Hwan
Journal of Korean Foot and Ankle Society
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v.18
no.3
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pp.100-107
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2014
Purpose: The purpose of this study is to evaluate the efficacy of mesenchymal stem cell (MSC) isolation by the magnetic-activated cell sorting (MACS) method in tendon tissue-derived cells compared to the colony picking method for isolation of MSCs by picking colony-forming cells. Materials and Methods: Human tendon-derived cells were isolated by enzyme digestion using normal tendon tissues from three donors. We used the magnetic kit and well-known MSC markers (CD90 or CD105) to isolate MSCs in tendon-derived cells using MACS. Cloning cylinders were used to isolate colony-forming cells having MSC characteristics in tendon-derived cells. Colony-forming unit-fibroblast (CFU-F) assay was used to evaluate the self-renewal capacity of cells isolated using the colony picking method or MACS. For comparison of differentiation potentials into osteogenic or adipogenic lineage between two groups, alizarin red S and oil red O staining were performed at 14 days after induction of differentiation in vitro. Results: Flow cytometry results showed that early passage tendon-derived cells expressed CD44 in 99.13%, CD90 in 56.51%, and CD105 in 86.19%. In the CFU-F assay, CD90+ or CD105+ cells isolated with MACS showed larger colony formation in size than cells isolated using the colony picking method. We also observed that CD90+ or CD105+ cells were constantly differentiated into both osteogenic and adipogenic lineages in cells from all donors, whereas cells isolated using the colony picking method were heterogeneous in differentiation potentials to the osteogenic and adipogenic lineages. Conclusion: CD90+ or CD105+ cells isolated using MACS showed superior MSC characteristics in the self-renewal and multi-differentiation capacities compared with cells isolated using the colony picking method.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.2
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pp.271-276
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1986
Amphotericin B and rifampin or 5-fluorocytosine were tested for synergism against Candida albicans in a synthetic mdium. The test was based on viability studies in which fungicidal activity was determined during the incubation hours of drug exposure. Concentration of amphotericin B(0.2ug per ml and 0.4ug per ml) in combination with inactive concentration of rifampin(12.5ug per ml) or 5-fluorocytosine(25ug per ml) resulted in rapid decrease of colony froming unit(CFU). On the basis of these and earlier studies, it is concluded that amphotericin Band rifampin or 5-fluorocytosine are synergistic against various yeasts and yeast-like fungi under widely differing experimental conditions.
In vivo administration of Leucostim, a human recombinant granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), was evaluated for the effects on survival, hematologic recovery, and colony forming unit- spleen (CFU-5) in murine bone marrow transplantation (BMT) model. Sublethally irradiated (9 Gy) mice received bone marrow cells from untreated mice, and then were treated with G-CSF subcutaneously at doses of 2.5,5, or $10\mu\textrm{g}$/kg or vehicle solution (control) for 14 days from one day after BMT. There was no effect of irradiation and BMT on mortality. The repeated subcutaneous injections of Leucostim for 14 days post- BMT significantly facilitated hematologic recovery compared with vehicle control in a dose-dependent manner. Moreover, mice treated with Leucostim had significantly increased numbers of CFU-s colonies on day 10 post-BMT. These results suggest that Leucostim, a new G-CSF, has beneficial effects on hematologic reconstitution after BMT.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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