The purpose of this study was to evaluate the osteogenic capacity of water extract of danshen (Salvia miltiorrhiza Bunge). We have established in rat critical-sized calvarial defect model using the combination with collagen scaffold and danshen hydrophilic extract. All rats were extinguished at 8 weeks after bone graft surgery, and the bone regeneration ability of bone grafting sides was evaluated by plain radiography and micro-CT. These results revealed water extract of danshen had the potential to promote osteogenesis especially continuous oral administration with local treatment compared to one-shot local treatment. This compound may provide a new alternative agent for growth factors to promote bone healing and bone regeneration. In conclusion, these results suggest that danshen hydrophilic extract have the potential to promote osteogenesis in bone defects. Further studies about fusion technology with salvianolic acid B, peptides, growth factors, and scaffolds using of the combination of tissue engineering, cell engineering and mechanical engineering are needed.
Proceedings of the Korean Institute of Surface Engineering Conference
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2017.05a
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pp.3-23
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2017
The achievement of tissue engineering can be highly depending on the capability to generate complicated, cell seeded three dimensional (3D) micro/nano-structures. So, various fabrication techniques that can be used to precisely design the architecture and topography of scaffolding materials will signify a key aspect of multi-functional tissue engineering. Previous methods for obtaining scaffolds based on top-down are often not satisfactory to produce complex micro/nano-structures due to the lack of control on scaffold architecture, porosity, and cellular interactions. However, a bioprinting method can be used to design sophisticated 3D tissue scaffolds that can be engineered to mimic the tissue architecture using computer aided approach. Also, in recent, the method has been modified and optimized to fabricate scaffolds using various natural biopolymers (collagen, alginate, and chitosan etc.). Variation of the topological structure and polymer concentration allowed tailoring the physical and biological properties of the scaffolds. In this presentation, the 3D bioprinting supplemented with a newly designed plasma treatment for attaining highly bioactive and functional scaffolds for tissue engineering applications will be introduced. Moreover, various in vivo and in vitro results will show that the fabricated scaffolds can carry out their structural and biological functionality.
The primary goal of the wound healing is rapid wound closure. Recent advances in cellular and molecular biology have greatly expanded our understanding of the biologic processes involved in wound repair and tissue regeneration. This study was conducted to develop a new sponge type of biomaterial to be used for either wound dressing or scaffold for tissue engineering. We designed to make a comparative study of the wound healing effect of silk fibroin/hyaluronic acid (SF/HA) blend sponge in full-thickness dermal injury model of rat. Two full-thickness excisions were made on the back of the experimental animals. The excised wound was covered with either the silk fibroin (SF), hyaluronic acid (HA) or SF/HA (7 : 3 or 5 : 5 ratio) blend sponge. On the postoperative days of 3, 7, 10 and 14, the wound area was calculated by image analysis software. Simultaneously, the tissues were stained with Hematoxylin-Eosin and Masson's trichrome methods to measure the area of regenerated epithelium and collagen deposition. In addition, we evaluated the degree of the epithelial cell proliferation using immunohistochemistry for proliferating cell nuclear antigen (PCNA). We found that the half healing time ($HT_{50}$) of SF/HA blend sponge treated groups were significantly decreased as compared with either those of SF or HA treatment group. Furthermore, SF/HA blend sponges significantly increased the size of epithelialization and collagen deposition as well as the number of PCNA positive cells on epidermal basement membrane as compared with those of control treatment. Especially, the 5 : 5 ratio group of SF/HA among all treatment groups was most effective on wound healing rate and histological studies. These results suggest that SF/HA blend sponges could accelerate the wound healing process through the increase of epithelialization, collagen deposition and basal cell proliferation in full thickness skin injury.
Ipriflavone (IP), a non-hormonal isoflavone derivative, has been shown to interfere with bone remodeling by inhibiting bone resorption and stimulating bone formation. IP consistently increased the amount of Ca incorporated into the cell layer by mesenchymal stem cells (MSCs). In this study, we developed the novel IP loaded poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds for the possibility of the application of the tissue engineered bone. IP/PLGA scaffo1ds were prepared by solvent casting/salt leaching method and were characterized by porosimeter, scanning electron microscopy, determination of residual salt amount, differential scanning calorimetry, and X-ray diffractometer, respectively. IP/PLGA scaffolds were implanted into the back of athymic nude mouse to observe the effect of IP on the osteoinduction compared with control PLGA scaffo1ds. Thin sections were cut from paraffin embedded tissues and histological sections were stained H&E, von Kossa, and immunohistochemical staining for Type I collagen and osteocalcin. It can be observed that the porosity was above 91.7% and the pore size was above 101 $\mu\textrm{m}$. Control scaffo1d and IP/PLGA scaffo1ds of 50% IP were implanted on the back of athymic nude mouse to observe the effect of IP on the induction of cells proliferation for 9 weeks. The evidence of calcification, osteoblast, and osteoid from the undifferentiated stem cells in the subcutaneous sites and other soft connective tissue sites having a preponderance of stem cells has been observed. From these results, it seems that IP plays an important role for bone induction in IP/PLCA scaffolds.
We developed laminated cylindrical scaffolds composed of poly(lactide-co-glycolide)(PLGA) and keratin, and investigated their potential for tissue engineering and disk regeneration. The scaffold was designed to have two parts, i.e. inner cylinder and outer disk, to mimic a natural disk. The outer disk was composed of PLGA and the inner cylinder was prepared using PLGA film or PLGA/keratin hybrid film. In this study, we investigated the effects of keratin on the growth and proliferation of annulus fibrous(AF) cells in the cylindrical scaffolds. Scaffolds containing PLGA/keratin films showed a significantly higher cell proliferation and expression of collagen I and II than the counterpart with PLGA films. Keratin containing scaffolds also exhibited an excellent mechanical strength, demonstrating that keratin influences the proliferation of annulus fibrous cells. The results provide valuable information on PLGA/keratin films for tissue engineered disk regeneration.
Jung, Yeon Joo;Kim, Kyung-Chul;Heo, Jun-Young;Jing, Kaipeng;Lee, Kyung Eun;Hwang, Jun Seok;Lim, Kyu;Jo, Deog-Yeon;Ahn, Jae Pyoung;Kim, Jin-Man;Huh, Kang Moo;Park, Jong-Il
Molecules and Cells
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v.38
no.7
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pp.663-668
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2015
hBMSCs are multipotent cells that are useful for tissue regeneration to treat degenerative diseases and others for their differentiation ability into chondrocytes, osteoblasts, adipocytes, hepatocytes and neuronal cells. In this study, biodegradable elastic hydrogels consisting of hydrophilic poly(ethylene glycol) (PEG) and hydrophobic poly(${\varepsilon}$-caprolactone) (PCL) scaffolds were evaluated for tissue engineering because of its biocompatibility and the ability to control the release of bioactive peptides. The primary cultured cells from human bone marrow are confirmed as hBMSC by immunohistochemical analysis. Mesenchymal stem cell markers (collagen type I, fibronectin, CD54, $integrin1{\beta}$, and Hu protein) were shown to be positive, while hematopoietic stem cell markers (CD14 and CD45) were shown to be negative. Three different hydrogel scaffolds with different block compositions (PEG:PCL=6:14 and 14:6 by weight) were fabricated using the salt leaching method. The hBMSCs were expanded, seeded on the scaffolds, and cultured up to 8 days under static conditions in Iscove's Modified Dulbecco's Media (IMDM). The growth of MSCs cultured on the hydrogel with PEG/PCL= 6/14 was faster than that of the others. In addition, the morphology of MSCs seemed to be normal and no cytotoxicity was found. The coating of the vascular endothelial growth factor (VEGF) containing scaffold with Matrigel slowed down the release of VEGF in vitro and promoted the angiogenesis when transplanted into BALB/c nude mice. These results suggest that hBMSCs can be supported by a biode gradable hydrogel scaffold for effective cell growth, and enhance the angiogenesis by Matrigel coating.
Allomatrix (Wright Medical Tech, Inc., Arlington, Tenn, USA), is a newly designed, injectable putty with a reliable demineralized bone matrix (DBM), derived from human bone. The compound contains 86% DBM and other bone growth factors such as bone morphogenic protein (BMP)-2, BMP-4, insulin-like growth factor (IGF)-1, and transforming growth factor (TGF)-${\beta}1$. It has excellent osteoinduction abilities. In addition, DBM is known to have osteoconduction capacity as a scaffold due to its collagen matrix. This product contains a powder, which is a mix of DBM and surgical grade calcium sulfate as a carrier. A practitioner can blend the powder with calcium sulfate solution, making a putty-type material which has the advantages of ease of handling, better fixation, and no need for a membrane, because it can function as membrane itself. This study reports the clinical and radiographic results of various guided bone regeneration cases using Allomatrix, demonstrating its strong potential as a graft material.
Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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2009.11a
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pp.12.1-12.1
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2009
Nano-hydroxyapatite (N-HAp)has shown the pivotal role in producing bone-regenerative materials since it has similarity to natural bone minerals in terms of size, morphology, and the composition. Currently, the combination of biopolymers and N-HAp is recognizedas an attractive approach in generating hybrid scaffolds for bone tissueengineering. Surface engineering is an important issue since it determines whether cells can effectively adhere and proliferate on porous scaffolds. We aim to develop a synthetic approach to porous 3D scaffolds by immobilizing N-HAp on pore surfaces. The discrete nano-level anchoring of N-HAp on the scaffold pore surface is achieved using surface-repellent stable colloidal N-HAp with surface phosphate functionality. This rational surface engineering enables surface-anchored N-HAp to express its overall intrinsic bioactivity,since N-HAp is not phase-mixed with the polymers. The porous polymer scaffolds with surface-immobilized N-HAp provide more favorable environments thanconventional bulk phase-mixed polymer/N-HAp scaffolds in terms of cellular interaction and growth. In vitro biological evaluation using alkalinephosphatase activity assay supports that immobilized N-HAp on pore surfaces of polymer scaffolds contributed to the more enhanced in vitro osteogenicpotential. Besides, the scaffolds with surface-exposed N-HAp provide favorable environments for enhanced in vivo bone tissue growth, estimated by characteristic biomarkers of bone formation such as collagen. The results suggest that newly developed hybrid scaffolds with surface-immobilized N-HApmay serve as a useful 3D substrate with pore surfaces featuring excellent bonetissue-regenerative properties. Acknowledgement. This research was supported by a grant (code #: 2009K000430) from 'Center for Nanostructured Materials Technology' under '21st Century Frontier R&D Programs' of the Ministry of Education, Science and Technology, Korea.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.41
no.4
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pp.335-343
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2014
Regenerative endodontic treatment has the potential to heal a necrotic pulp, which can affect root development in immature teeth. However, several drawbacks and unfavorable outcomes are associated with regenerative endodontic treatment, of which the most significant is coronal discoloration due to the presence of minocycline in triple antibiotic paste and mineral trioxide aggregate (MTA). To prevent tooth discoloration following pulp treatment, the modified triple antibiotics (ciprofloxacin, metronidazole, clindamycin) were used as canal disinfectants and Retro MTA, a $ZrO_2$-containing calcium aluminate cement, was used to seal the canal. Following access cavity acquisition, the canal was copiously irrigated with 2.5% sodium hypochlorite. A modified triple antibiotic paste was then applied to the canal. Once the tooth was asymptomatic (after between 3 and 8 weeks), Retro MTA was carefully placed over the blood clot or a collagen plug. Follow-up radiographs revealed normal periodontal ligament space and root development. In two cases, successful regenerative endodontic treatment of the infected immature tooth, without discoloration, was achieved with disinfection using modified triple antibiotics and Retro MTA sealing.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.43
no.6
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pp.373-387
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2017
Objectives: The purpose of this study was to introduce our three experiments on bone morphogenetic protein (BMP) and its carriers performed using the critical sized segmental defect (CSD) model in rat fibula and to investigate development of animal models and carriers for more effective bone regeneration. Materials and Methods: For the experiments, 14, 16, and 24 rats with CSDs on both fibulae were used in Experiments 1, 2, and 3, respectively. BMP-2 with absorbable collagen sponge (ACS) (Experiments 1 and 2), autoclaved autogenous bone (AAB) and fibrin glue (FG) (Experiment 3), and xenogenic bone (Experiment 2) were used in the experimental groups. Radiographic and histomorphological evaluations were performed during the follow-up period of each experiment. Results: Significant new bone formation was commonly observed in all experimental groups using BMP-2 compared to control and xenograft (porcine bone) groups. Although there was some difference based on BMP carrier, regenerated bone volume was typically reduced by remodeling after initially forming excessive bone. Conclusion: BMP-2 demonstrates excellent ability for bone regeneration because of its osteoinductivity, but efficacy can be significantly different depending on its delivery system. ACS and FG showed relatively good bone regeneration capacity, satisfying the essential conditions of localization and release-control when used as BMP carriers. AAB could not provide release-control as a BMP carrier, but its space-maintenance role was remarkable. Carriers and scaffolds that can provide sufficient support to the BMP/carrier complex are necessary for large bone defects, and AAB is thought to be able to act as an effective scaffold. The CSD model of rat fibula is simple and useful for initial estimate of bone regeneration by agents including BMPs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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