성견 견치의 인위적 골결손부에 치근활택술 시행 후, 섬유소 처리, 구연산 탈회, 섬유소 처리및 구연산 탈회가 치주조직 재생에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 치근장축 방향으로 절편을 1일, 3일, 7일, 14일, 21일 간격으로 제작하여 광학현미경으로 관찰한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 술후 1일째 대조군을 제외한 섬유소 단독도포군, 구연산 단독도포군 및 섬유소-구연산 병용도포군에서 섬유소양이 대차없이 밀집되어 나타났으며, 술후 3일째부터 대조군과 섬유소 단독도포군에서 상피의 하방성장이 관찰되기 시작하였고 구연산 단독도포군과 섬유소-구연산 병용도포군에서는 상피의 하방성장이 거의 관찰되지 않았다. 술후 1주째부터 각 군의 섬유소가 부분적으로 교원섬유로 대치되기 시작하였으며 2주후 각 군간에 대차없이 대부분의 섬유소기 교원섬유로 대치되는 양상을 보였으며 , 술후 3주째에 구연산 단독도포군과 섬유소-구연산 병용도포군에서 부분적으로 교원섬유의 규칙적인 배열상이 관찰되었고 대조군 및 섬유소 단독도포군에서는 거의 관찰되지 않았다. 구연산 단독도포군과 섬유소-구연산 병용도포군에서는 술후 2주째부터 치근흡수가 관찰되었으며 3주째에는 병 용도포군에 비해 구연산 단독도포군에서 더 많은 치근흡수가 관찰되었다.
The authors have transplanted periodontally involved roots which had been root planed into healthy and periodontally involved extraction sockets, and studied the root resorption patterns as well as its effect on new bone formation and wound healing. Alveolar bone around mandibular premolars of 6 adult dogs has been surgically removed, followed by ligation of orthodontic elastic wires for 8 weeks inducing chronic periodontal disease. After removing the crown portions, roots were extracted, and notches were made on the root surfaces discriminating healthy and periodontally involved areas using burs. Controls and experimental groups were divided as follows. Control I : Transplantation of periodontally involved root into healthy extraction sockets. Control II : Transplantation of periodontally involved root into diseased extraction sockets. Experimental group I : Transplantation of root planed roots into healthy extraction sockets. Experimental group II : Transplantation of root planed roots into diseased extraction sockets. Extraction sockets were sutured after transplantations, completely submerging the roots. Healing progress was histologically observed at 2nd, 8th, 12th, and 20th weeks, and the results were as follows ; 1. No inflammation or infection within the extraction sockets had been observed in all groups throughout the experimental period. 2. Reversal lines were observed at week 2 in all groups, clearly discriminating socket walls and new bone, and numerous blood vessels were observed in the new bone trabeculae. 3. Experimental groups showed markedly less root resorption compared to the controls at week 2, but as time progressed, severe resorptions were present in all groups. 4. Localized areas of new bone ankylosis were observed, and the rest of the areas showed collagen fiber insertion with new bone formation at its periphery. 5. No clear differences were found in healing and alveolar bone regeneration between healthy and diseased extraction sockets. 6. The amount of root resorption and ankylosis had increased up to week 8 and 12, showing ankylosis of new bone and the roots. However, no further increase in ankylosis was observed at week 20. 7. Most of the cementum on healthy roots was directly ankylosed to new bone at week, 2, and were gradually resorbed and replaced by new bone thereafter. These results appear to indicate that root planing may inhibit early root resorption of transplanted roots, but gradual replacement by alveolar bone and collagen fibers eventually occur. Condition of the roots or presence of disease in extraction sockets do not appear to make marked differences in alveolar bone regeneration process.
Periodontal ligament(PDL) cells and human gingival fibroblasts(HGFs) play important roles in development, regeneration, normal function, and pathologic alteration. PDL cells and HGFs have the similarity related with general characteristics of fibroblast such as spindle shaped morphology, the presence of vimentin intermediate filament and the synthesis of interstitial collagens and fibronectin. There were many studies about the differences between PDL cells and HGFs, but they were not about whole gene level. In this study, we tried to explain the differences of gene expression profiles between PDL cells and HGFs, and the differences among three individuals by screening gene expression patterns of PDL cells and HGFs, using cDNA microarray. Although there were some variants among three experiments, a set of genes were consistentely and differentially expressed in one cell type. Among 3,063 genes, 49 genes were more highly expressed in PDL cells and 12 genes were more highly expressed in HGFs. The genes related with cell structure and motility were expressed more highly in PDL cells. These are cofilin 1, proteoglycan 1 secretory granule, collagen type I(${\alpha}$ 1), adducin gamma subunit, collagen type III(${\alpha}$ 1), fibronectin, lumican(keratan sulfate proteoglycan), and ${\alpha}$ -smooth muscle actin. Tissue inhibitor of metalloproteinase known as the enzyme controlling extracellular matrix with matrix metalloproteinase is more highly expressed in PDL cells, osteoprotegerin known as osteoclastogenesis inhibitory factor is more highly expressed in HGFs. We performed northern blot to verify cDNA microarray results on selected genes such as tissue inhibitor of metalloproteinase, fibronectin, osteoprogeterin. The result of northern blot analysis showed that each cell expressed the genes in similar pattern with cDNA microarray result. This result indicates that cDNA microarray is a reliable method in screening of gene expression profiles.
Purpose: An animal periodontitis model is essential for research on the pathogenesis and treatment of periodontal disease. In this study, we have introduced a lipopolysaccharide (LPS) of a periodontal pathogen to the alveolar bone defect of experimental animals and investigated its suitability as a periodontitis model. Methods: Alveolar bone defects were made in both sides of the mandibular third premolar region of nine beagle dogs. Then, the animals were divided into the following groups: silk ligature tied on the cervical region of tooth group, Porphyromonas gingivalis LPS (P.g. LPS)-saturated collagen with silk ligature group, and no ligature or P.g. LPS application group as the control. The plaque index and gingival index were measured at 0 and 4 weeks postoperatively. The animals were then euthanized and prepared for histologic evaluation. Results: The silk ligature group and P.g. LPS with silk ligature group showed a significantly higher plaque index at 4 weeks compared to the control (P<0.05). No significant difference was found in the plaque index between the silk ligature group and P.g. LPS with silk ligature group. The P.g. LPS with silk ligature group showed a significantly higher gingival index compared to the silk ligature group or the control at 4 weeks (P<0.05). Histologic examination presented increased inflammatory cell infiltration in the gingival tissue and alveolar bone of the P.g. LPS with silk ligature group. Conclusions: An additional P.g. LPS-saturated collagen with silk ligature ensured periodontal inflammation at 4 weeks. Therefore, P.g. LPS with silk ligature application to surgically created alveolar bone defects may be a candidate model for experimental periodontitis.
Purpose: Bone morphogenetic protein (BMP) is a potent differentiating agent for cells of the osteoblastic lineage. It has been used in the oral cavity under a variety of indications and with different carriers. However, the optimal carrier for each indication is not known. This study evaluated the bone regenerative effect of rhBMP-2 delivered with different carrier systems. Materials and Methods: 8 mm critical-sized rat calvarial defects were used in 60 male Sprague-Dawley rats. The animals were divided into 6 groups containing 10 animals each. Two groups were controls that had no treatment and absorbable collagen membrane only. 4 groups were experimentals that contained rhBMP-2 only and applied with absorbable collagen sponge($Collatape^{(R)}$), $MBCP^{(R)}$, Bio-$Oss^{(R)}$ each. The histological and histometric parameters were used to evaluate the defects after 2- or 8-week healing period. The shape and total augmented area were stable in all groups over the healing time. Results: New bone formation was significantly greater in the rhBMP-2 with carrier group than control group. rhBMP-2/ACS was the highest in bone density but gained less new bone area than rhBMP-2/$MBCP^{(R)}$ and rhBMP-2/Bio-$Oss^{(R)}$. The bone density after 8 weeks was greater than that after 2 weeks in all groups. However, rhBMP-2 alone failed to show the statistically significant difference in new bone area and bone density compared to control group. Also $MBCP^{(R)}$ and Bio-$Oss^{(R)}$ particles remained after 8 weeks healing period. Conclusion: These results suggest that rhBMP-2 with carrier system is an excellent inductive agent for bone formation and we can use it as the predictable bone tissue engieering technique. Future study will likely focus on the kinetics of BMP release and development of carriers that is ideal for it.
Purpose: Recombining bone morphogenetic protein (BMP) is usually acquiredfrom high level animals. Though this method is effective, its high cost limits its use. The purpose of this study was to evaluate the effect of bone morphogenetic protein-2 with protein transduction domain (BMP-2/PTD;TATBMP-2) on bone regeneration. Rat calvarial defect model and osteoblastic differentiation model using MC3T3 cell were used for the purpose of the study. Materials and Methods: MC3T3 cells were cultured until they reached a confluence stage. The cells were treated with 0, 0.1, 1, 10, 100, 500 ng/ml of BMP-2/PTD for 21 days and at the end of the treatment, osteoblastic differentiation was evaluated usingvon Kossa staining. An 8mm, calvarial, critical-size osteotomy defect was created in each of 48 male Spraque-Dawley rats (weight $250{\sim}300\;g$). Three groups of 16 animals each received either BMP-2/PTD (0.05mg/ml) in a collagen carrier, collagen only, or negative surgical control. And each group was divided into 2 and 8 weeks healing intervals. The groups were evaluated by histologic analysis(8 animals/group/healing intervals) Result: In osteoblastic differentiation evaluation test, a stimulatory effect of BMP-2/PTD was observed in 10ng/ml of BMP-2/PTD with no observation of dose-dependent manner. The BMP-2/PTD group showed enhanced local bone formation in the rat calvarial defect at 2 weeks. New bone was observed at the defect margin and central area of the defect. However, new bone formation was observed only in 50% of animals used for 2weeks. In addition, there was no new bone formation observed at 8 weeks. Conclusion: The results of the present study indicated that BMP-2/PTD(TATBMP-2) have an positive effect on the bone formation in vitro and in vivo. However, further study should be conducted for the reproducibility of the outcomes.
치주질환의 병원균은 세포벽의 항원에 의하여 조직내 존재하는 mononuclear phagocytes가 활성화되어 cytokine들이 생성됨 으로써 치주 결체조직의 파괴를 진행시킨다. 이런 관련된 cytokine들은 순차적으로 상주하는 치은세포 및 대식세포가 Matrix metalloproteinase 합성을 하도록 유도하여 조직파괴를 시작한다. 이들 Matrix metalloproteinase중 MMP-2, MMP-9 (Gelatinase A,B)는 type IV collagen 및 변성된 interstitial collagen을 파괴하며 치주환자의 치은 열구액, 치은조직, 타액 네에서 높게 보고 되어왔다. 당뇨병은 치주질환의 위험요소중 하나로 달뇨 환자에서는 치주질환의 유병율이 일반인에 비해 높고 치주질환의 중증도도 더 심하여 진행도 빠르다고 알려져 있다. 그 병리 기전 중 하나로는 당뇨 환자에서는 치은 열구액 내 중성구 유래의 Matrix metalloproteinase의 활성 증가 및$TNF-{\alpha}$ 의 활성 증가가 추정되고 있다. 본 실험에서는 제2형 당뇨병 환자와 비당뇨 환자들에서 만성 치주염 부위의 치은 및 건강한 치은에서 염증매개체 중 하나인 MMP-2, MMP-9 및 $TNF-{\alpha}$ 의 발현에 대해 상호 비교 분석함으로서 염증, 혈당이 미치는 영향을 밝히고 제 2형 당뇨병 환자에서 심한 치주조직 파괴의 기전을 연구하고자 하였다. 경북대학교병원 치주과 내원환자 중 제2형 당뇨병 환자와 비당뇨 환자들 및 치주질환이 없는 건강인 대조군을 대상으로 여러 가지 환자요소, 임상 치주상태를 기록하고, 전신적으로 건강한 환자의 건강한 부위(n=8,Group 1), 전신적으로 건강한 환자으 만성 치주염 부위(n=8, Group 2), 제2형 당뇨병 환자의 만성 치주염 부위 (n=8,Group 3)에서 각각 변연치은을 채득하고 액화질소에 급속 동결하였다. Western blotting을 이용하여 각 조직 내 MMP-2, MMP-9 및 $TNF-{\alpha}$ 의 발현을 관찰, densitometer를 이용하여 상대적 발현을 정량, 각 조직의${\beta}-actin$을 이용하여 표준화하여 실험군과 대조군들의 평균치를 비교하였다. 비당뇨 환자들의 만성 치주염 부위 및 제2형 당뇨병 환자의 만성 치주염 부위에서 모두 건강 대조군에 비해 MMP-2와 MMP-9 의 발현이 증가되었다. 또한 MMP-2와 MMP-9는 2형 당뇨 환자의 만성 치주염 부위가 비당뇨 환자의 만성 치주염 부위보다 증가된 발현양상을 보였으며, $TNF-{\alpha}$ 발현 비교시 각 군간 유의성 있는 변화는 없었으나 2형 당뇨환자군에서 MMP-2 및 MMP-9의 증가와 함께 다소 증가 양상을 보였다. 결론적으로 본 실험에서 MMP-2 및 MMP-9의 증가가 만성 치주염 및 2형 당뇨 환자에서의 만성치주염에서 비당뇨환자 보다 MMP-2, MMP-9의 증가양상을 보여 주었으며 $TNF-{\alpha}$ 가 2형 당뇨환자의 만성치주염 진행과정에 기여인자로써 역할을 하는 것으로 생각된다.
Purpose: Recombinant human bone morphogenetic protein-2(rhBMP-2) has been evaluated as potential candidates for periodontal and bone regenerative therapy. In spite of good prospects in BMP applications, there is economically unavailable for clinical use in dental area. The purpose of this study was to evaluate the osteogenic effect of rhBMP-2 produced by E.coli expression system. Materials and methods: Eight-mm critical-size calvarial defects were created in 48 male Sprague-Dawley rats. The animals were divided into 6 groups of 8 animals each. Each group received one of the following: Negative control(sham-surgery control), positive control(absorbable collagen sponge(ACS) alone) and experimental(ACS loaded with rhBMP-2). Defects were evaluated by histologic and histometric parameters following 2- and 8-week healing intervals. Results: The experimental group showed significant defect closure at 2 and 8weeks than the sham surgery and positive control groups. Moreover, the experimental group showed significantly greater new bone and augmented area than the other groups at both 2 and 8weeks. Conclusion: rhBMP-2 produced by E.coli expression system may be effective for bone regeneration.
The purpose of the present study is to evaluate the biological stability of the zirconia/alumina composite abutment by histologic and radiographic examination in clinical cases. 17 partially edentulous patients (5 men and 12 women, mean age 47) were treated with 37 implants. The implants were placed following the standard two-stage protocol. After a healing period of 3 to 6 months, zirconia/alumina composite abutments were connected. All radiographs were taken using paralleling technique with individually fabricated impression bite block, following insertion of the prosthesis and at the 3-, 6-, 12 month re-examinations. After processing the obtained images, the osseous level was calculated using the digital image in the mesial and distal aspect in each implant. An ANOVA and t-test were used to test for difference between the baseline and 3-, 6-, 12 months re-examinations, and for difference between maxilla and mandible. Differences at P <0.05 were considered statistically significant. For histologic examination, sample was obtained from the palatal gingiva which implant functioned for 12 months. Sections were examined under a light microscope under various magnifications. Clinically, no abutment fracture or crack as well as periimplantitis was observed during the period of study. The mean bone level reduction(${\pm}standard$ deviation) was 0.34 rom(${\pm}\;0.26$) at 3-months, 0.4 2mm(${\pm}\;0.30$) at 6-months, 0.62 mm(${\pm}\;0.28$) at 12-months respectively. No statistically significant difference was found between baseline and 3-, 6-, 12-months re-examinations (p > 0.05). The mean bone level reduction in maxilla was 0.33(${\pm}0.25$) at 3-months, 0.36(${\pm}0.33$) at 6-months, 0.56(${\pm}0.26$) at 12-months. And the mean bone level reduction in mandible was 0.35(${\pm}0.27$) at 3-months, 0,49(${\pm}0.27$) at 6-months, 0.68(${\pm}0.30$) at 12-months. No statistical difference in bone level reduction between implants placed in the maxilla and mandible. Histologically, the height of the junctional epithelium was about 2.09 mm. And the width was about 0.51 mm. Scattered fibroblasts and inflammatory cells, and dense collagen network with few vascular structures characterized the portion of connective tissue. The inflammatory cell infiltration was observed just beneath the apical end of junctional epithelium and the area of direct in contact with zirconia/alumina abutment. These results suggest the zirconia/alumina composite abutment can be used in variable intraoral condition, in posterior segment as well as anterior segment without adverse effects.
Rapuano, Bruce E.;Hackshaw, Kyle;Macdonald, Daniel E.
Journal of Periodontal and Implant Science
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제42권3호
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pp.95-104
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2012
Purpose: The purpose of this study was to determine whether increasing the Ti6Al4V surface oxide negative charge through heat ($600^{\circ}C$) or radiofrequency plasma glow discharge (RFGD) pretreatment, with or without a subsequent coating with fibronectin, stimulated osteoblast gene marker expression in the MC3T3 osteoprogenitor cell line. Methods: Quantitative real-time polymerase chain reaction was used to measure changes over time in the mRNA levels for osteoblast gene markers, including alkaline phosphatase, bone sialoprotein, collagen type I (${\alpha}1$), osteocalcin, osteopontin and parathyroid hormone-related peptide (PTH-rP), and the osteoblast precursor genes Runx2 and osterix. Results: Osteoprogenitors began to differentiate earlier on disks that were pretreated with heat or RFGD. The pretreatments increased gene marker expression in the absence of a fibronectin coating. However, pretreatments increased osteoblast gene expression for fibronectin-coated disks more than uncoated disks, suggesting a surface oxide-mediated specific enhancement of fibronectin's bioactivity. Heat pretreatment had greater effects on the mRNA expression of genes for PTH-rP, alkaline phosphatase and osteocalcin while RFGD pretreatment had greater effects on osteopontin and bone sialoprotein gene expression. Conclusions: The results suggest that heat and RFGD pretreatments of the Ti6Al4V surface oxide stimulated osteoblast differentiation through an enhancement of (a) coated fibronectin's bioactivity and (b) the bioactivities of other serum or matrix proteins. The quantitative differences in the effects of the two pretreatments on osteoblast gene marker expression may have arisen from the unique physico-chemical characteristics of each resultant oxide surface. Therefore, engineering the Ti6Al4V surface oxide to become more negatively charged can be used to accelerate osteoblast differentiation through fibronectin-dependent and independent mechanisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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