To investigate control efficacy of flusulfamide GR (granule) on Chinese cabbage clubroot caused by Plasmodiophora brassicae, experiment was accomplished in field located in Gangneungshi alpine area contaminated by P. brassicae. Flusulfamide GR provided control value of 84.6% and that was statistically significant difference from standard fungicides containing untreated control. To investigate ratio of reduction of resting spore according to fungicide treatment, soil of Chinese cabbage field before and after fungicide treatment were sampled and investigated density of resting spore. Resting spore density was not uniform in soil before fungicide treatment. Therefore, to investigate control efficacy of fungicide against clubroot, investigation on resting spore density was conducted before experiment and reflected in experimental design. Flusulfamide GR and DP (dust powder) provided 64.2% and 63.7% of reduction of resting spore on field soil after fungicide treatments. This result indicated that control efficacy of the fungicides was correlated with reduction of resting spore of P. brassicae. The increasing rate in fresh weight of above-ground part of Chinese cabbage by flusulfamide DP and GR, fluazinam DP and trifloxystrobin SC (suspension concentrate) was 14.3%, 13.0%, 13.8% and 3.8%, respectively. From above result, flusulmide GR have outstanding control efficacy against clubroot of Chinese cabbage and is effectively decreasing of resting spore density in soil.
Bacillus subtilis XF-1, a strain with demonstrated ability to control clubroot disease caused by Plasmodiophora brassicae, was studied to elucidate its mechanism of antifungal activity against P. brassicae. Fengycin-type cyclopeptides (FTCPs), a well-known class of compounds with strong fungitoxic activity, were purified by acid precipitation, methanol extraction, and chromatographic separation. Eight homologs of fengycin, seven homologs of dehydroxyfengycin, and six unknown FTCPs were characterized with LC/ESI-MS, LC/ESI-MS/MS, and NMR. FTCPs (250 ${\mu}g/ml$) were used to treat the resting spores of P. brassicae ($10^7/ml$) by detecting leakage of the cytoplasm components and cell destruction. After 12 h treatment, the absorbencies at 260 nm ($A_{260}$) and at 280 nm ($A_{280}$) increased gradually to approaching the maximum of absorbance, accompanying the collapse of P. brassicae resting spores, and nearly no complete cells were observed at 24 h treatment. The results suggested that the cells could be cleaved by the FTCPs of B. subtilis XF-1, and the diversity of FTCPs was mainly attributed to a mechanism of clubroot disease biocontrol.
Kim, Min-Jeong;Shim, Chang-Ki;Kim, Yong-Ki;Hong, Sung-Jun;Park, Jong-Ho;Han, Eun-Jung;Lee, Min-Ho;Jee, Hyeong-Jin
Research in Plant Disease
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v.18
no.2
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pp.123-128
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2012
We investigated the resistance of 50 commercial Chinese cabbage cultivars against clubroot disease caused by Plasmodiophora brassicae in the three difference fields, Suwon, Hwacheon, and Pyeongchang. Wilting symptom on Chinese cabbage was first observed at 15 days after transplanting in Pyeongchang and Hwacheon, while disease symptoms appeared later in Suwon after the rainy season. Among 50 cultivars, eight cultivars, SC26, SC29, SC30, SC31, SC34, SC46, SC47 and SC50 showed highly susceptible symptoms like wilting and heavy root galls in all three fields. Meanwhile, seven cultivars such as SC05, SC06, SC07, SC09, SC11, SC17, and SC36 showed moderate resistance with delayed wilting and few root galls. Only two cultivars, Chuwol (CB22) and Gohyangssam (CB23) were highly resistant to clubroot disease until the harvest season in all of the three fields. These two commercial cultivars may be considered as candidate cultivars for cultivation of organic Chinese cabbage in Suwon, Hwacheon, and Pyeongchang.
Inbred lines of Chinese cabbage KU-101 (resistant line against Plasmodiophora brassicae race race 6) and CS-113 (susceptible line) were crossed and their progeny lines F$_1$, BC$_1$F$_1$, F$_2$, and F$_3$ were produced for the construction of the genetic linkage map of R brassicae race 6-resistant Brassica campestris ssp. pekinensis genome. Restriction fragment length polymorphism (RFLP) was applied to compare between parents and their f$_2$ progenies with a total of 192 probes and 5 restriction enzymes. The constructed RFLP map covered 1,104 cM with a mean distance between genetic marker of 8.0 cM, and produced 10 linkage groups having 121 genetic loci. The loci of P. brassicae race 6 (CR6)-resistant Brassica genome were determined by interval mapping of quan-titative trait loci (QTL), which resulted from bioassay using the same race of the fungi in P3 population. Resistant loci were estimated in numbers 1 (Gl) and 3 (G3) linkage groups. In the regression test, Gl had a value of4.8 logarithm of odd (LOD) score, while C3 had values of 4.2-7.2. Given these results, the location of the CR6-resistant loci within the Brassica genome map can now be addressed.
Cruciferous vegetable crops grown in several locations in Korea were surveyed from 1996 to 2000. Clubroot severely occurred up to a maximum of 100% in Chinese cabbage fields in 15 out of 42 locations, and in cabbage fields in 5 out of 13 locations surveyed. The disease also severely occurred up to a maximum of 40% in radish fields in 6 out of 35 locations, and up to a maximum of 40% and 100% in turnip and brown mustard fields in one each out of the few locations surveyed, respectively. The disease occurred less than l% in one kale field in one out of two locations surveyed. A total of 268 isolates of Plasmodiophora brassicae was obtained from six cruciferous vegetable crops. The isolates were classified into 13 races based on their pathogenicity to the differential varieties of cabbage and rutabaga. There were 13 races found in isolates from Chinese cabbage, while 6 races each were found in isolates from cabbage and radish. There were five and three races found in turnip and brown mustard isolates, respectively. One isolate from kale was identified as race 8. Race 8 was the most frequently isolated from five cruciferous vegetable crops, except brown mustard. Races 3 and 14 were isolated only from Chinese cabbage.
Development of root galls of clubroot disease on Chinese cabbage seedlings was first observed 17days after inoculation of Plasmodiophora brassicae at $25^{\circ}C$ 4-11days earlier than at 5, 20, 3$0^{\circ}C$ and 35$^{\circ}C$. Subsequent enlargement of root galls was also fastest at $25^{\circ}C$ and 2$0^{\circ}C$ but delayed at 15$^{\circ}C$ and 3$0^{\circ}C$ or above. Chinese cabbage seedlings with root gall formation showed reduction in number of leaves above ground fresh weight and amount of root hairs but increase in root weight, Root galls development was highest at soil moisture level of 80% of maximum soil moisture capacity than at 60% and 100%. Optimum soil pH for root gall development was pH 6 although root galls were formed at a range of pH 5 to 8. Period of light illumination also affected root gall development with the greatest gall development at 12hr/12hr in light/dark period and the least at 8hr/16hr. Site of root gall formation and gall shape did not differ greatly among treatments of temperature soil moisture pH and light experiments.
This research was performed to establish basic technology for Chinese cabbage clubroot chemical control by investigating the soil contamination of Plasmodiophora brassicae in major producing regions of fall Chinese cabbage. PCR primers were developed to detect P. brassicae, a causal agent of Chinese cabbage club-root that generally occurs in Cruciferae family. A primer set, PbbtgF761 and PbbtgR961, specifically amplified a 245 bp fragment from P. brassicae only. At places well known for fall Chinese cabbage, 10 out of 33 in Haenam-gun, 5 out of 13 in Yeongam-gun and Yeonggwang-gun, 1 out of 6 in Gochang-gun, 2 out of 12 in Hongseong-gun, and 5 out of 17 in Dangjin-si resulted positive for P. brassicae contamination. The results show that the soil contamination rate of P. brassicae was 30.3% in Haenam-gun, 38.5% in Yeongam-gun and Yeonggwang-gun, 16.7% in Gochang-gun, 16.7% in Hongseong-gun, and 29.4% in Dangjin-si. The six places where Chinese cabbage clubroot was visible by naked eye were 100% confirmed by the PCR test of the P. brassicae contaminated soil. Thus, simple PCR test may be utilized as an index to decide on chemical control of P. brassicae.
This study was conducted to select endophytic actinomycetes as biocontrol agents against Chinese cabbage clubroot caused by Plasmodiophora brassicae. A total of 81 endophytic actinomycetes were isolated from surface-sterilized roots of Chinese cabbage that was grown on paddy field and upland soils collected from various locations in Korea. By using 16S ribosomal DNA (rDNA) gene sequencing, they were classified to 8 actinobacterial genera. The genus Microbispora (67%) was most frequently isolated, followed by Streptomyces (12%) and Micromonospora (11%). Three of the 81 isolates, when inoculated in germinated Chinese cabbage seeds and then transplanted to pots, effectively suppressed the occurrence of a post-inoculated strain of P. brassicae in the pots. They showed control values of 58% for strain A004, 33% for strain A011, and 42% for strain A018. Based on cell wall components, morphological characteristics, and phylogenetic analyses, the three antagonistic isolates were identified as Microbispora rosea subsp. rosea (A004 and A011) and Streptomyces olivochromogenes (A018). Further researches on the field efficacy and action modes of the three actinomycetes are in progress.
To develop the efficient screening methods for antifungal compound active to Chinese cabbage clubroot caused by Plasmodiophora brassicae, the control efficacy of three fungicides fluazinam, ethaboxam, and cyazofamid on the disease was tested under several conditions such as soil types, cultivars of Chinese cabbage, growth stages of the host, and inoculum concentrations. The in vivo antifungal activities of the fungicides on clubroot of two Chinese cabbage cultivars were hardly different. At 7- and 14-day-old seedlings, the fungicides were more effective to control of clubroot than at 21-day-old seedlings. In a commercial horticulture media soil (CNS), disease severity of untreated controls was higher and control activity of the fungicides was less than in a mixture of CNS and upland soil (1:1, v/v). Disease development of the seedlings inoculated with P. brassicae at $1.8{\times}10^7$ spores/pot to $1.1{\times}10^9$ spores/pot was almost same, but control efficacy of the fungicides was negatively correlated with inoculum dosages. To effectively select in vivo antifungal compound on Chinese cabbage clubroot, 14-day-old seedlings need to be inoculated with P. brassicae by drenching the spore suspension to give $1{\times}10^8$ spores/pot 1 day after chemical treatment. To develop clubroot, the inoculated plants are incubated in a growth chamber at $20^{\circ}C$ for 2 days, and then cultivated in a greenhouse ($20{\pm}5^{\circ}$) for four weeks.
Population density of Plasmodiophora brassicae in soil of severely infested fields of Chinese cabbage decreased as soil depth increases. More than 97% of total population was found in surface soil (0-5cm depth), and a few resting spores of the pathogen were also detected in 40 cm-deep soil. the clubroot pathogen was evenly distributed over the surface soil without clustering around a Chinese cabbage plant. Density of P. brassicae in soil at 23 Chinese cabbage fields in Pyongchang, Kangwon province ranged widely from less than 10$^4$resting spores/g soil to above 10$\^$6/ resting spores/g soil. Few or none of P. brassicae was found in virgin soil without any cropping history, intermediate with 0.36-2.75$\times$10$^4$resting spores/g soil in fields of other crops but more than 10 times higher population was found in severely infected Chinese cabbage fields. Density of P. brassicae was highest in the fields of monocropping of crucifers with some exceptions, but was low in rotated fields with corn, rye, medicinal crops or other non-host vegetables. Pathoen density in soil was decreased rapidly when rye or medicinal crops were cultivated after Chinese cabbage, suggesting that survival of clubroot pathogen appears to be influenced greatly by cropping system. The improved method for detecting resting spores of P. brassicae in soil used in this study seemed to be adequate for estimating population density of P. brassicae in soil in aspects of clearer dyeing, increased detecting sensitivity, and simplicity in preparation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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