Frog culture industry is not yet familiar but has much potential. Generally, in farm, the population density is higher than that of in nature and frog farm is not the exception. But when population density is high, it can easily leads to stressful condition, poor sanitation. When a disease occur, it is a primary factor that makes the population more susceptible and the results more grave. Because of severe Rhabditoidea- helminth infection and subsequent bacterial septicemia, 50~70% of the total population had been died in a farm in Jeong-sun in Gangwon-do and Chungju in Chungcheongbuk-do from late June, 2012 to September, 2012. Diseased frogs showed ruptured lung, bloody ascites, liver discoloration, myocardium weakness, congested kidney, microcytic anemia and so on. Enterobacteriacea, Citrobacter.sp, Cupriavidus metallidurans, Acinetobacter.sp were isolated as major bacterium that had caused septicemia in frogs. Among isolated bacterium, Cupriavidus metallidurans, Ewingella americana, Shewanella aquimarina and Pseudoalteromonas sp. have not reported as potential pathogens in frogs before. It is a good example that severe helminth infection in frogs can lead to secondary infection of bacteria.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.28
no.7
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pp.757-763
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2006
In our previous studies, we have isolated bacteria from BTEX-contaminated sediment, which utilized BTEX as a sole carbon source and $NO_3$-N as an electron acceptor. For the possibility of field application, we have applied co-culture of those isolates in the BTEX-contaminated soil and evaluated their biodegradation efficiencies. To investigate the relationship between the isolates and indigenous microorganism in soil, changes of microbial community structure in soil samples with respect to time were monitored. To examine this, soil samples were artificially contaminated with benzene, toluene, ethylbenzene and o-xylene. BTEX-degrading bacteria such as Pseudomonas stutzeri strain 15(DQ 202712), Klebsiells sp. strain 20(DQ 202715) and Citrobacter sp. strain A(DQ 202713) were injected into the soil samples in the ratio of 2:1:1. Our results showed that the highest BTEX biodegradation efficiency was achieved when both BTEX and $NO_3-N$ existed simultaneously. The change in soil microbial community structure was characterized by PCR-DGGE analysis comparing the relative DGGE band intensities. The band intensities of indigenous microorganisms in the soil were reduced by injecting co-culture of the three isolates. On the contrary, the relative band intensities of the isolates were increased. Among the three isolates, Pseudomonas stutzeri strain 15 rendered the highest band intensity. This indicates that the Pseudomonas stutzeri was the dominant microbial species found in the soil samples.
YNB54 strain which shows inhibitory activities specific to the plant pathogenic Phytophthora sp. on potato dextrose agar medium was screened among lots of strains isolated from Korean soils. To identify taxonomy of the Phytophthora specific antagonistic bacteria YNB54, 165 rDNA sequence, MIDI fatty acid composition, DNA-DNA hybridization, GC content, and commercial multitest systems such as API 20E and Biolog GN were performed. Results of commercial kits including lots of biochemical and physiological reactions showed that this strain was closely related to taxa including Enterobacter cloacae and Enterobacter cancerogenus species than other genera(Citerobacter Klebsiella, Leclercia). Also, analysis of its MIDI, G+C contents, and DNA-DNA hybridization suggests that this strain was more similiar to the Genus Enterobacter than other genera (Citerobacter Klebsiella, Leclercia). This strain was potentially identified as Enterobacter sp. by these results. But our 16S ribosomal DNA sequences (rDNA) analysis confirmed that it was more closely related to the cluster of Citerobacter freundii ATCC 29935 than any other Enterobacter species. In the absence of defined phylogenetic critia for delineating genera, the results observed with Citrobacter and Enterobacter species suggest that further studies are needed to clarify their relationships. This investigation demonstrates that YNB54 strain is genetically diverse and potentially more taxonomically complex than hitherto realized. Further study is necessary to confirm their taxonomic positions.
The marine microalga Pavlova viridis can grow fast and has the ability to accumulate essential nutrients for culturing marine animals, such as EPA and DHA, and it has been used as food for raring larval fish and prawn. The symbiotic relationship between the flagellate microalga Pavlova viridis and its associated bacteria was investigated. An axenic culture of P. viridis was obtained by repeated treatment of the microalga with an antibiotic cocktail. The axenic status was confirmed after sub-culturing three times in a sterile f/2 medium without an antibiotic. The axenic alga was then co-inoculated with five bacteria, arbitrarily designated as I1–I5, isolated from the alga to test the growth promotion of the algae. All bacterial strains promoted the growth of P. viridis, and bacterial isolate I3 was the most effective among the five bacteria tested. The cell number of P. viridis in the co-culture with I3 was significantly higher than that of the control culture. A sequence analysis of the 16S rRNA gene isolated from I3 revealed a 97% nucleotide sequence similarity to that of Citrobacter sp. The growth of strain I3 was also significantly enhanced by co-culturing with P. viridis, indicating a symbiotic relationship between the microalga and its associated bacterium. The association between the microalga and bacterium was confirmed by scanning electron microscopy.
The bacteriological and physiochemical analysis of seawater in Tongyeong harbor was conducted to evaluate sanitary conditions, The samples were collected at 6 stations established once a month from January to December, 2000. During the study period, the ranges of temperature, transparency, chemical oxygen demand, dissolved oxygen, dissolved nitrogen, phosphate and chlorophyll-a were $6.8\sim25.2^{\circ}C,\;1.0\sim2.5\;m,\;1.79\sim2.41\;mg/L,\;5.7\sim10.1\;mg/L,\;6.59\sim10.53{\mu}g-at/L,\;0.56\sim1.01{\mu}g-at/L\;and\;1.21\sim9.54\;mg/m^3$, respectively, The viable cell counts of seawater in Tongyeong harbor ranged from $3.0\times10^4CFU/mL\;to\;6.9\times10^6CFU/mL$. The coliform group and fecal coliform MPN's of the samples were ranged $23\~4,600\;MPN/100\;mL$ (means 540 MPN/100 mL) and $11\~1,600\;MPN/100\;mL$ (means 210 MPN/100 mL), respectively, The coliform group was classified with IMViC reactions and pathogenic vibrios were analyzed. Two hundred eighteen strains that were obtained from seawater samples in Tongyeong harbor represented Escherichia coli group, $66.1\%$; Citrobacter freundii group, $11.0\%$; Enterobacter aerogenes, $9.6\%$; and unknown, $13.3\%$, respectively. During the study period, infectious bacteria such as Vibrio cholerae O1, Salmonella sp. and Shigella sp. were not detected from the samples, but detection ratios of V. parahaemolyticus, V cholerae non-O1 and V. vulnificus were $10.0\sim30.1\%$.
Using a rotating biological contactor modified with a sequencing bath reactor system (SBRBC) designed and operated to remove phosphate and nitrogen [58], the microbial community structure of the biofilm from the SBRBC system was characterized based on the extracellular polymeric substance (EPS) constituents, electron microscopy, and molecular techniques. Protein and carbohydrate were identified as the major EPS constituents at three different biofilm thicknesses, where the amount of EPS and bacterial cell number were highest in the initial thickness of 0-100${\mu}m$. However, the percent of carbohydrate in the total amount of EPS decreased by about 11.23%, whereas the percent of protein increased by about 11.15% as the biofilm grew. Thus, an abundant quantity of EPS and cell mass, as well as a specific quality of EPS were apparently needed to attach to the substratum in the first step of the biofilm growth. A FISH analysis revealed that the dominant phylogenetic group was $\beta$- and $\gamma$-Proteobacteria, where a significant subclass of Proteobacteria for removing phosphate and/or nitrate was found within a biofilm thickness of 0-250${\mu}m$. In addition, 16S rDNA clone libraries revealed that Klebsiella sp. and Citrobacter sp. were most dominant within the initial biofilm thickness of 0-250${\mu}m$, whereas sulfur-oxidizing bacteria, such as Beggiatoa sp. and Thiothrix sp., were detected in a biofilm thickness over 250${\mu}m$. The results of the bacterial community structure analysis using molecular techniques agreed with the results of the morphological structure based on scanning electron microscopy. Therefore, the overall results indicated that coliform bacteria participated in the nitrate and phosphorus removal when using the SBRBC system. Moreover, the structure of the biofilm was also found to be related to the EPS constituents, as well as the nitrogen and phosphate removal efficiency. Consequently, since this is the first identification of the bacterial community and structure of the biofilm from an RBC simultaneously removing nitrogen and phosphate from domestic wastewater, and it is hoped that the present results may provide a foundation for understanding nitrate and phosphate removal by an RBC system.
Park Hee-Kyung;Shim Sung-Sub;Kim Su-Yung;Park Jae-Hong;Park Su-Eun;Kim Hak-Jung;Kang Byeong-Chul;Kim Cheol-Min
Journal of Microbiology
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v.43
no.4
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pp.345-353
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2005
The complex ecosystem of intestinal micro flora is estimated to harbor approximately 400 different microbial species, mostly bacteria. However, studies on bacterial colonization have mostly been based on culturing methods, which only detect a small fraction of the whole microbiotic ecosystem of the gut. To clarify the initial acquisition and subsequent colonization of bacteria in an infant within the few days after birth, phylogenetic analysis was performed using 16S rDNA sequences from the DNA iso-lated from feces on the 1st, 3rd, and 6th day. 16S rDNA libraries were constructed with the amplicons of PCR conditions at 30 cycles and $50^{\circ}C$ annealing temperature. Nine independent libraries were produced by the application of three sets of primers (set A, set B, and set C) combined with three fecal samples for day 1, day 3, and day 6 of life. Approximately 220 clones ($76.7\%$) of all 325 isolated clones were characterized as known species, while other 105 clones ($32.3\%$) were characterized as unknown species. The library clone with set A universal primers amplifying 350 bp displayed increased diversity by days. Thus, set A primers were better suited for this type of molecular ecological analysis. On the first day of the life of the infant, Enterobacter, Lactococcus lactis, Leuconostoc citreum, and Streptococcus mitis were present. The largest taxonomic group was L. lactis. On the third day of the life of the infant, Enterobacter, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, S. mitis, and Streptococcus salivarius were present. On the sixth day of the life of the infant, Citrobacter, Clostridium difficile, Enterobacter sp., Enterobacter cloacae, and E. coli were present. The largest taxonomic group was E. coli. These results showed that microbiotic diversity changes very rapidly in the few days after birth, and the acquisition of unculturable bacteria expanded rapidly after the third day.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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