This study was carried out to establish The regeneration of healthy seedlings from the nodal segment culture of Chinese yam (Dioscorea opposita cv. Danma), cultivated in Korea. Different explants such as leaves, petioles, roots and nodal pieces, excised from the in vitro grown seedlings of Chinese yam, were cultured on MS medium supplemented with various combinations of growth regulators. All the growth regulators used induced plantlet regeneration from the nodal segments at a high frequency, while there was no induction of shoot or callus from leaf, petiole or root tissues. The medium supplemented with 0.01mg/L NAA, 0.5mg/L BA, 0.5-1.0mg/L kinetin and without plant growth regulator was effective for shoot development of buds from the nodal segment culture. The concentration of BA and NAA was an important factor in the bud induction of buds from the nodal segments of Chinese yam. Nodal segments cultured on the medium containing 1.0mg/L NAA and 0.5-1.0mg/L BA gave the best response to bud formation. The addition of GA$_3$ to the culture medium suppressed shoot induction and growth, while it increased microtuber formation. The shoot growth and microtuber formation were also affected by medium strength and solidity. The MS basal medium containing 1 g/L gelrite was suitable for microtuber formation from the nodal segment of Chinese yam.
This study was carried out to determine the effect of medium solidity, salt strength, sugar and nitrogen sources, and pH levels on in vitro multiplication of pathogen-free yam (Dioscorea opposita Thunb.). Liquid medium was more effective in the growth of plant height, fresh weight, and formation of microbulb than the solid medium. Optimal condition for plant fresh weight, growth, and multiplication axillary bud was in 1MS salt strength with 60 $g{\cdot}L^{-1}$ sucrose and half strength of $KNO_3$. Optimal condition for microbulb formation was $\frac{1}{2}$ MS salt strength supplemented with glucose 60 $g{\cdot}L^{-1}$ and half strength of $KNO_3$. The number of leaves and nodes were sharply increased from 2 to 5 weeks, whereas plant fresh weight was steadily increased from 3 to 11 weeks after inoculation. Microbulbs were formed at 2 weeks after inoculation and continuously increased until 12 weeks.
The metabolism of [$^{14}\textrm{C}$] $\textrm{GA}_{12}$ in the Chinese yam (Dioscorea opposita Thunb. var. Tsukune) was examined to determine the identification of endogenous gibberellins. [$^{14}\textrm{C}$] $\textrm{GA}_{12}$ was metabolized to $\textrm{GA}_{53}$, $\textrm{GA}_{44}$, $\textrm{GA}_{19}$, $\textrm{GA}_{20}$, $\textrm{GA}_1$, $\textrm{GA}_8$, $\textrm{GA}_{15}$, $\textrm{GA}_{24}$, $\textrm{GA}_9$, $\textrm{GA}_{36}$ and $\textrm{GA}_4$. Radioactivity of GAs in non C-13 hydroxylation route was five-fold higher than that of early C-13 hydroxylation in analyzed GA-metabolites. Radioactivity of $\textrm{GA}_4$ was always four times higher than that of $\textrm{GA}_1$ at every feeding time. $\textrm{GA}_1$ radioactivity has always a lower level to below 200 DPM. The major pathway of endogenous GA metabolism in seedlings of the Chinese yam might be the non C-13 hydroxylation pathway.
D. K. Kang;H. Y. Shin;J. H. Sung;Park, J. H.;M. U. Chang
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.127.2-127
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2003
YMV-K strains were purified from D. oppostita Thunb. tv. Dung-Gun-Ma showing mosaic symptom on their leaves. YMV-K strains were filamentous particles of 780nm in length and induced cytoplasmic disorder such as inclusion body formation. Nucleotide and amino acid sequences of 5'-UTR, Pl and CP of YMV-K strains shared 80.8, 64.7 and 98.3% identity respectively to JYMV J1 in the mean value. Purification of YMV-K strains according to JYMV purification method(S. Fuji) was conducted to product antiserum. With antiserum against YMV-K strains, the Various diagnosis methods such as IC-RT-PCR, DIBA, RIPA and indirect-ELISA were used to detect YMV-K strains in Chinese yam plant.
Chinese yam necrotic mosaic virus (CYNMV) is one of the most widespread viruses in Chinese yam (Dioscorea opposita Thunb.) and causes serious yield losses. Currently, genetic information of CYNMV is very restricted and complete genome sequences of only two isolates (one from Japan and another from China) have been reported. In this study, we determined complete genome sequence of the CYNMV isolate AD collected from Andong, Korea. Genetic analysis of the polyprotein amino acid sequence revealed that the Korean isolate AD has high similarity with the Japanese isolate PES3 (97%) but relatively low similarity with the Chinese isolate FX1 (78%). Phylogenetic analysis using the CYNMV 3' proximal nucleotide sequences harboring the coat protein and 3' untranslated region further supported genetic relationship among the CYNMV isolates. Based on comparative analysis of the CYNMV genome sequences determined in this study and other previous studies, we generated molecular detection primers that are highly specific and efficient for CYNMV diagnosis.
To figure out optimum culturing condition for $in$$vitro$ yam ($Dioscorea$$opposita$ Thunb.) production, various media components and environmental controls were evaluated, effective temperature, light condition and timing of the liquid media replacement for multiplication of yam in liquid culture were determined in this study. There was no visible difference detected for $15^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$ temperature conditions. At $25^{\circ}C$, continuous light condition was more effective compared to 16 hour light/ 8 hour dark condition. Effect of media replacement was tested, and approximately 5 more microtubers obtained and 70% of increase in weight was detected when media replacement was performed. Timing for media replacement was tested at 2, 4, 6, 8, and 10 weeks after initial culture for 12 weeks. Considering both number and weight of microtubers, replacement of media 6 weeks after initial culture was most effective. In terms of component of media, significant increase in weight of microtubers was observed in MS media containing sucrose $60g{\cdot}L^{-1}$. In summary, the most effective condition for $in$$vitro$ propagation of chinese yam is replacing medium 6 weeks after initial inoculation with MS medium containing sucrose $60g{\cdot}L^{-1}$ in continuous light condition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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