• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제3권2호
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• pp.86-90
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• 1993

CMCase positive clones were screened from Cellulomonas sp. YE-5 and named pCE1, pCE2 and pCE3. Among the positive clones pCE1 was used for this study, because it has the smallest insert and the highest CMCase activity among the 3 clones, and its nucleotide sequence was determined. The CMCase gene in pCE1 was composed of 1071 bp of nucleotides coding 357 amino acids. Computer analysis showed that the pCE1 has 65% sequence homology with the endoglucanase from Cellulomonas fimi.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권4호
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• pp.376-382
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• 1990

토양과 퇴비 등에서 섬유소 자화력이 있는 세균을 분리하고 이 균주들 중 cellulase 생산능이 가장 우수한 균주를 선별하여 Cellulomonas sp.로 동정하였다. Cellulomonas sp. YE-5의 최적 배양조건은 pH6.5 Solka floc 0.8(w/v), urea 0.06(w/v), K2HPO4 0.1(w/v), bacto peptone 0.2(w/v), yeast extract 0.2(w/v) 그리고 MgSO4.7H2O 0.0(w/v) 이었으며, 이러한 배지를 사용하여 $30^{\circ}C$ 에서 48시간 배양하였을 때 avicelase, CMCase 그리고 Beta-glucosidase는 각각 0.350, 3.180, 0.882units/ml의 활성을 나타내었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제6권2호
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• pp.51-57
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• 1978

섬유소 자화세균의 분리 및 이용과정에서 혼합배양하므로써 균체증식이 향상 되었는데, 이러한 혼합배양에 따른 여러 가지 영향과 보조균을 동정한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) Cellulomona flavigena의 단독배양에서는 O.D.가 0.26이였으나, 보조균과 혼합배양하므로써 O.D.가 0.37로 증가하였다. 2) 보조균은 gliding motility가 있었으며, microcyst가 확인되었는데 이것은 Sporocytophga 속과 일치하였다. 3) 혼합배양에서 생육최적 pH는 7.2 부근이 좋았으며, 최적온도는 3$0^{\circ}C$ 부근이었다. 4) 혼합배양에 있어서 두 균의 분포도는 10 : 1 정도로 Cellulomonas flavigena가 주로 분포되어 있었다. 5) Cellulomonas flavigena의 growth factor로서 thiamine과 biotin을 요구하였으며, Sporocytophaga sp.는 vitamin 요구성이 없었다. 6) Cellulomonas flavigena의 단독배양액에서는 추적할 만한 glucose 량이 없었으나, 혼합배양에서는 glucose가 확인되었다. 7) Cellulomonas flavigena의 균체중 필수아미노산으로 valine, leucine, arginime이 비교적 많은 편이였다

• 농업과학연구
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• 제3권2호
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• pp.225-234
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• 1976

섬유소 분해균 Cellulomonas sp. CS1-1의 각종 탄소원에서의 ${\beta}$-글루코시다아제 생성을 살피기 위하여 Quickfit FVIL 발효장치를 이용하고, 뉴트리엔트 이스트브로스, 카르복시멜틸셀룰로오스, 아비셀, 셀로비오스 등을 탄소원으로 한 배지에 뱃치로 배양하여 그 배양적 특성과 세포내 또는 세포외 ${\beta}$-글루코시다아제의 분포를 검토한 결과 : i)${\beta}$-글루코시다아제는 공시한 모든 배양 조건하에서 생성되었고 세포내 효소로서 배양여액에서는 검출되지 않았다. ii) 뉴트리엔트 이스트브로스와 카르복시메틸 셀룰로오스를 탄소원으로 할 때 보다 셀로비오스 및 아비셀을 탄소원으로 하는 경우 효소의 비활성도가 높았다. iii) 공시한 모든 기질에서 공히 균의 대수기(對數期)에 극대치의 비활성도를 나타내었다.

• 미생물학회지
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• 제23권4호
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• pp.309-314
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• 1985

Cellulose를 이용하는 Cellulomonas sp. CS 1-1을 육성하는 방법으로 원형질본합법을 응용하기 위해 영향요구변이주 간의 융합을 시도하였다 원형질본 형성 및 이들의 봉합 및 재생의 최적조건은 다음과 같다. 0.5M sucrose를 함유하는 복합배지에서 6시간 배양하고 0.2$\mu\textrm{m}$ penicillin G로 90분 처리한다. 이들 균체를 분리하여 0.2 mg/ml lysozyme으로 2시간 동안 처리하여 원형질체를 만들고, 이들을 40% polyethyleneglycol로 15분 처리하여 $10^{-3}$ ~$10^{-5}$의 빈도로 속운자 재조합이 이루어졌다. 원형질본의 재생에서 곰팡이의 오염을 방지하기 위해 Nystatin을 이용할 수 있었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제38권6호
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• pp.490-495
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• 1995

Cellulomonas sp. KL-6 균주가 생산하는 cellulase 중 CMCase나 FPase는 세포외로 다량 분비되나 ${\beta}-glucosidase$는 cell bound form으로 존재하여 배양액에서의 생산은 극히 미약하였다. CMCase와 FPase는 배양 5일째에, ${\beta}-glucosidase$는 배양 4일째에 각각 최대생산을 나타내었다. $CaCO_3(0.1%)$가 첨가된 효소생산 최적조건에서 CMCase는 $82\;unit/m{\ell}$를, FPase는 $80\;unit/m{\ell}$를 그리고 ${\beta}-glucosidase$는 $1.2\;unit/m{\ell}$를 각각 생산하였고 이는 기본배지에서 보다 $60{\sim}70%$의 생산증가를 가져왔다. KL-6 균주는 lignase와 laccase의 생산은 없었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권6호
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• pp.1196-1199
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• 2004

A bacterium, isolated from rabbit's waste and identified as Cellulomonas sp., had cellulase and thermostable $\alpha$-amylase activity when grown on wheat bran. Maximum activity of thermostable $\alpha$-amylase was obtained by adding $3\%$ soluble starch. However, soybean oil (1 ml $1^{-1}$) could increase the production of $\alpha$-amylase and cellulase in 'wheat bran. The $\alpha$-amylase was characterized by making a . demonstration of optimum activity at $90^{\circ}C$ and pH 6- 9, with soluble starch as a substrate. The effect of ions on the activity and the stability of this enzyme were investigated. This strain secreted carboxymethyl cellulase (CMCase), cellobiase ($\beta$­glucosidase), and filter paperase (Fpase) during growth on wheat bran. Carboxymethy1cellulase, cellobiase, and Fpase activities had pH optima of 6, 5.5, and 6, respectively. CMCase and cellobiase activities both had an optimum temperature of $50^{\circ}C$, whereas Fpase had an optimum temperature of $45^{\circ}C$.

• 미생물학회지
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• 제22권3호
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• pp.167-173
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• 1984

The cellabiase (${\beta}$-glucosidase) gene in a Cellulomonas sp. CS1-1 was cloned into E. coli HB101 using the vector plasmid pBR322, and the expression of the gene in E. coli studied. The chromosomal DNA of the cellulomonas was digested by seveal restriction enzymes, each of which has only one cleaving site in plasmid pBR322. The recombinant plasmid, pSB2, created with Sal I frament, was expressed for the cellobiase gene in E. coli. The recombiant plasmid was estimated to contain 6.4 Kb foreign DNA at the Sal I site of plasmid pBR322 and the inserted DNA was mapped by single and double digestion with several enzymes. E. coli HB101(pSB2) has slowly grown in a mineral liquid medium containing cellobiose as a sole carbon source. The cellobiase activity in the transformed E. coli was 132 units per liter, which is equivalent to one twenty fifth of that in doner strain Cellulomonas sp. CS1-1. The transforned cell with plasmid containing cellulase gene grow well in the LB mediuns. The synthesis of cellobiase in the strain, E. coli HB101 (pSB2), was inhibited by glucose and at high concentration of cellobiose, and induced by cellobiose at low concentration.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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• pp.525.1-525
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• 1986

To clone ${\beta}$-glucosidase gene from Cellulomonas sp. a gene library was constructed using E. coli JM83 pUC9. Among 2,500 pseudotransformants obtained, 20 clones developed yellow color on the p-nitrophenyl- -D-glucopyranoside filter paper These 20 clones were classified into three groups based on the results of activity staining using nondenaturating polyacrylamide gel electrophoresis and restriction enzyme digestions. Among the three groups, only one group containing pCEl plasmid has specificity for cellobiose.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권2호
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• pp.164-168
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• 1992

Cellulomonas sp.YE-5가 생산하는 cellulase를 분리, 정제하여 효소의 특성을 알아보았다. Avicelase, CMCase, $\beta$-glucosidase의 반응 최적온도은 각각 40, 45, $40^{\circ}C$이었고, 반은 최적 pH는 5.5, 6.0 그리고 6.0이었다. 효소의 열안정성은 30~$70^{\circ}C$에서 6시간 처리하였을 때 avicelase와 $\beta$-glucosidase는 $50^{\circ}C$ 이상에서 거의 실활하였고, CMCase는 $50^{\circ}C$에서 약 40%의 활성을 유지하였다. 효소의 안정성에 미치는 pH의 영향은 $25^{\circ}C$에서 24시간 처리하였을 때 avicelase와 CMCase는 PH 5.0~9.0 사이에서 안정하였으며, $\beta$-glucosidase는 pH 5.0~8.0 사이에서 안정하였다.