Genetic Recombination by Protoplast Fusion of Cellulomonas sp CS 1-1

원형질체 융합법에 의한 cellulomonas sp. CS 1-1의 유전자 재조합

Autoxotrophic mutants of a cellulolytic baterium Cellulomonas sp. CS 1-1 were grown at $30^{\circ}C$ for 6hr using a complete medium containing 0.5M sucrose and for another 90 min after addition of 0.3 U/ml penicillin G, and were protoplasted by 0.2mg/ml lysozyme for 2hr. Prototrophic recombinants were obtained at the rates of $10^{-3}$ to $10^{-5}$by fusing the protoplasts in the presence of 40% polyethyleneglycol3350. Nystatin could be used to eliminate fungal contamination during the regeneration of the plotaplasts.

Cellulose를 이용하는 Cellulomonas sp. CS 1-1을 육성하는 방법으로 원형질본합법을 응용하기 위해 영향요구변이주 간의 융합을 시도하였다 원형질본 형성 및 이들의 봉합 및 재생의 최적조건은 다음과 같다. 0.5M sucrose를 함유하는 복합배지에서 6시간 배양하고 0.2$\mu\textrm{m}$ penicillin G로 90분 처리한다. 이들 균체를 분리하여 0.2 mg/ml lysozyme으로 2시간 동안 처리하여 원형질체를 만들고, 이들을 40% polyethyleneglycol로 15분 처리하여 $10^{-3}$ ~$10^{-5}$의 빈도로 속운자 재조합이 이루어졌다. 원형질본의 재생에서 곰팡이의 오염을 방지하기 위해 Nystatin을 이용할 수 있었다.