• 제목/요약/키워드: Cellulomonas fimi

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대장균에서 발현되는 Cellulomonas fimi $\beta$-glucosidase의 효소학적 특징 (Characteristics of Cellulomonas fimi $\beta$-glucosidase expressed in Escherichia coli)

  • 김하근
    • 자연과학논문집
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    • 제8권2호
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    • pp.57-61
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    • 1996
  • Cellulomonas fimi에서 유래한 $\beta$-glucosidase 유전자를 갖고 있는 대장균으로부터 $\beta$-glucosidase 효소를 정제하였다. 전기 영동과 크로마토그라피 실험을 수행함으로써 정제된 효소의 분자량은 56,000 달톤이며 단일 폴리펩티드로 구성되어 있음을 알 수 있었다. 정제된 $\beta$-glucosidase 효소는 당이 $\beta$-결합을 하고 있는 cellobiose, PNPG, PNPC 등의 기질에 대하여 작용하여 분해시킬 수 있었으나, $\alpha$-결합을 갖고있는 maltose는 분해할 수 없었으므로, $\beta$-결합에 대한 기질 특이성을 갖고 있음을 알았다. 철, 수은, 구리 등의 중금속 이온들에 의해 효소 활성이 저해되었고 DTT에 의해 효소의 활성이 활성화됨을 보임으로써 $\beta$-glucosidase 효소의 활성화 부위는 -SH 기가 중요하게 작용하고 있음을 시사하였다.

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Intergeneric protoplast fusion between Bacillus pumilus and Cellulomonas fimi

  • Kim, D.M.;Lee, K.H.
    • 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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    • 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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    • pp.528.1-528
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    • 1986
  • Cellulose utilising hybrids between Cellulomonas fimi and Bacillus pumilus were isolated after PEG mediated protoplast fusion. 33% (w/v) PEG #6, 000 and 50mM $Ca^{++}$were optimum concentration. The intergeneric fusion frequency was 3.2$\times$10$^{-7}$ xtracellular CMCase and $\beta$-glucosidase activities were detected from one hydrid unlike only CMCase was detected from Cellulomonas fimi.

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Cellulomonas fimi의 분리(分離) 및 동정(同定), cellulase 특성(特性)과 톱밥의 Ethanol 전환(轉換) (Isolation and Identification of Cellulomonas fimi, Characteristics of its Cellulase and Conversion of the Sawdust into Ethanol)

  • 이찬용;이계호
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제28권2호
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    • pp.98-105
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    • 1985
  • 소와 양의 Rumen에서 Hungate's roll tube 방법에 의해 통성 혐기성 섬유소 분해세균을 분리하였다. 가장 강한 섬유소 분해력을 갖는 균주를 선발하여 형태학적 배양학적 생리학적 특성 및 전자현미경사진을 검토하여 Cellulomonas fimi C-14으로 동정(同定)하였다. 분리된 C. fimi C-14의 균생육 및 효소생산은 $30^{\circ}C$, pH6.5에서 최대이었으며, 그의 조효소(組酵素)는 pH6.0, $40^{\circ}C$에서 최대 역가를 보였으며 그 $C_1,\;C_x,\;{\beta}-glucosidase$의 Activity 는 20.6, 227.6, 0.56 $(unit{\times}10^3/ml)$ 이었다. 곰팡이 Cellulase의 첨가로 Enzyme Activity가 증가하였으며, 현사시나무의 톱밥을 기질로 하여, 분리균과 S. cerevisiae DY2를 접종하여 Ethanol 발효생산시 ${\beta}-glucosidase$의 첨가로 상승효과를 보였으며, 이단계 발효법보다 동시 당화 발효법에 의한 Ethanol 생산이 더 좋았다.

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Factors affecting the protoplast formation and regeneration of Bacillus pumilus and Cellulomonas fimi for intergeneric protoplast fusion

  • Kim, D.M.;Lee, K.H.
    • 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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    • 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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    • pp.527.3-527
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    • 1986
  • Several factors predicted to affect the protoplast formation and regeneration were investigated. The optimum lysozyme, casamino acid and PVP concentration were 0.5 (mg/$m\ell$), 0.1 (%) and 1.5(%). In B. pumilus, Penicillin-G treatment concentration was 0.3 (U/$m\ell$) and optimum treatment period was transit log. phase. And in the case of Celm. fimi, 0.3 (U/$m\ell$) and initial log. phase. Osmotic stabilizer and di-cation for OSM medium of B.pumilus and Gelm .fimi were 25mM CaCl2, 0.5M sodium sucinate and 50mM MgCl$_2$, 100mM CaCl$_2$, 0.4M sodium succinate. The regeneration frequency of B.pumilus and Celm. fimi were 14.6(%) and 6.9(%).

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Cloning and DNA Sequence of Carboxymethylcellulase (CMCase) Gene from Cellulomonas sp. YE-5

  • Her, Song;Kim, Dong-Seob;Choi, Sun-Jin
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제3권2호
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    • pp.86-90
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    • 1993
  • CMCase positive clones were screened from Cellulomonas sp. YE-5 and named pCE1, pCE2 and pCE3. Among the positive clones pCE1 was used for this study, because it has the smallest insert and the highest CMCase activity among the 3 clones, and its nucleotide sequence was determined. The CMCase gene in pCE1 was composed of 1071 bp of nucleotides coding 357 amino acids. Computer analysis showed that the pCE1 has 65% sequence homology with the endoglucanase from Cellulomonas fimi.

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농산폐자원의 이용에 관한 연구(제이보) 섬유소자화세균의 분리 및 동정 (Studies on the Utilization of Agricultural Wastes (Part 2) Isolation and Identification of Cellulose Utilizing Bacteria.)

  • 배무;김병홍
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제2권1호
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    • pp.1-7
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    • 1974
  • 농산페자원을 기질로 하여 섬유소단세포단백을 생산하기 위해 전국에서 수집한 썩은 나무, 퇴비, 토양 등 시료에서 enrichment culture technique으로 172주의 섬유소자화세균을 분리하였다. 이들중 섬유소 자화력이 강한 균 6주를 동정하여 다음 결과를 얻었다. 1. 선별한 6주 중 5주는 Cellulomonas속이었으며 나머지 1주는 Sporocytophaga속이었다. 2. Sporocytophaga속의 세균은 microcyst가 타원형인 S. ellepsospora이었다. 3. Cellulomonas속의 세균들은 C.fimi 1균주, C.gelida 1균주, C. flavigena 2균주 및 C. aurogena 1 균주이 었다. 4. 분리균 C. aurogena는 5탄당인 arabinose 와 xylose를 자화하는 성질이 Bergey's Manual에 수록된 균과 달라 새로운 변종으로 판명되었다.

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섬유소 분해균 Cellulomonas uda CS 1-1의 분류학적 연구 (Taxonomic Studies on the Cellulolytic Bacterium Cellulomonas uda CS 1-1)

  • 김미석;윤민호;최우영
    • 농업과학연구
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    • 제34권2호
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    • pp.99-109
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    • 2007
  • 섬유소 분해균 Cellulomonas sp. CS 1-1에 대하여 종 수준으로 분류학적 위치를 규명하기 위하여 7개 type strain 균주와 함께 생리적 및 생화학적 특성을 조사하고 DNA 상등성 및 지방산의 조성 등을 분석하여 비교한 결과, CS 1-1의 콜로니 형태는 circular, entire, smooth, convex하며, 담황색을 띤 $0.3{\sim}0.5{\times}0.8{\sim}1.2{\mu}m$ 크기의 간균이었다. 생리학적 특징으로서 비운동성의 통성혐기성 중온균으로서 Gram양성, catalase양성, oxidase음성, 탄수화물 발효성 등의 표현형은 Cellulomonas 속의 타종과 동일하였으며, 특히 D-ribose, raffinose, rhamnose, xylitol, acetate, L-lactate, propionate, aspartate, proline 등 조사한 모든 탄소원의 이용성이 없었으며, 반면에 sacchrose, arabinose 및 amylose의 이용성은 양성으로 판정되었다. G+C 함량 74.76 mol %, 주요 지방산과 quinone 성분은 전형적인 Cellulomonas의 12-methyltetradecanoic acid (anteiso-$C_{15:1}$)과 MK-$9(H_4)$이었으며, DNA의 상동성 비율은 C. uda ATCC 491과 70%, C. fimi ATCC 15724와 54~59 %, C. gelida 및 C. bibula와도 46~48%의 상동성을 나타내었다. 이상의 결과는 CS1-1이 현재 Cellulomonas 속에 인정된 7개의 type species 중 C. uda ATCC 491 균주와 가장 높은 근연성을 나타냄으로서 C. uda에 속하는 novel species로 분류될 수 있다.

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농산방자원의 이용에 관한 연구 (제9유) 섬유소단세포단백질의 아미노산 조성 및 그의 영향학적 가치 (Studies on Microbial Utilization of Agricultural Wastes (Part IX) Analsis of Cellulosic Single Cell Protein and Their Amino Acid Patterns)

  • 김병홍;배무
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제5권4호
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    • pp.167-169
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    • 1977
  • 볏짚을 기질로 생산한 삼종의 단세포단백질의 성분 및 아미노산의 조성을 분석하였다. 이들의 조성을 조단백질 52.2∼70.3%, 조지방 11.6∼13.9%, 회분 11.5∼18.1% 이었으며, 단백가는 80.0, 61.8, 78.0이였다. 이 결과를 바탕으로 이들의 단백질원으로의 가치를 검토하였다.

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Overproduction and Secretion of $\beta$-Glucosidase in Bacillus subtilis

  • Kim, Jeong-Hyun;Lee, Baek-Rak;Moo, young-Pack
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제8권2호
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    • pp.141-145
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    • 1998
  • Overproduction of intracellular ${\beta}$-glucosidase was attempted by modifying the promoter region of a ${\beta}$-glucosidase gene cloned from Cellulomonas fimi and expressing it in Bacillus subtilis DB 104. A strong engineered promoter, BJ27UΔ88, was fused to the ${\beta}$-glucosidase gene after removing its native promoter. An effective Shine-Dalgamo sequence (genel0 of phage T7) was inserted between the promoter and the ${\beta}$-glucosidase structural gene. The modified gene was overexpressed in B. subtilis and produced 1121.5 units of ${\beta}$-glucosidase per mg protein which is about $12\%$ of total intracellular protein. Secretion of overproduced intracellular ${\beta}$-glucosidase was attempted by using the signal sequence of the Bacillus endoglucanase gene as well as an in-frame hybrid protein of endoglucanase. The hybrid protein was normally secreted into the culture medium and still retained ${\beta}$-glucosidase activity.

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티미딜산 생성효소 활성이 높은 메토트렉세이트-내성 균주의 검색 (Screening of Methotrexate-Resistant Strains with High Thymidylate Synthase Activity)

  • 곽인영;이종수
    • 약학회지
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    • 제36권4호
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    • pp.345-349
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    • 1992
  • Thymidylate synthase activity from extracts of various methotrexate-resistant strains was measured by spectrophotometric assay. Methotrexate-resistant strains of Lactobacillus, Pseudomonas sp., Micrococcus sp. HS-1, Klebsillela pneumonae, Cellulomonas fimi and Serratia marcescens elevated thymidylate synthase levels, especially, Pseudomonas sp. KL-9 resistant to $10^{-9}M$ methotrexate have a 156-fold increase in thymidylate synthase, which suggests that Pseudomonas sp. is a convenient source of thymidylate synthase. Several methotrexate strains of yeast were tested, however, their enzyme activity was generally lower than that of bacteria tested.

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