The purpose of this study was to evaluate on the biodegradability, biocompatibility and tissue regenerative capacity of synthetic biodegradable $mernbranes-Resolut^{(R)}$, $Guidor^{(R)}$ and $Biomesh^{(R)}$. To evaluate the cell attachment on the membranes, in vitro, the number of gingival fibroblasts attached to each membrane was counted by hemocytometer. Cytotoxicity test for the membranes was performed by MTT test with gingival fibroblast For evaluation of guided- bone regenerative potential, the amount of new bone formation in the rat calvarial defects(5mm in diameter) beneath the membranes was observed for two weeks and examined of the specimens by Massons trichrome staining. Biodegradability was observed for 2, 4, 8 and 12 weeks after implantation of each materials under the skin of rats and examined the specimens with H & E staining. The number of cell attachment were the greatest in $Biomesh^{(R)}$ and followed by $Resolut^{(R)}$. Cell viability of three membranes was almost similar levels. Biodegradability of $Resolut^{(R)}$ was the highest among three membrane and the potential of guided bone regeneration was the greatest in the $Biomesh^{(R)}$ and $Resolut^{(R)}$ was followed. These results suggested that commercially available biodegradable membranes were non-toxic and highly potential to guided bone regeneration.
폐암의 주된 원인으로 알려진 흡연은 그 악성세포 발현기전이 아직 정확히 규명된 바 없다. 이에 저자들은 흡연에 의한 발암성의 지표로 흡연 중에 특이적으로 존재하는 강력한 발암물질인 NNK(4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone)를 이용하여 흡연에 따른 폐암의 발생과 그 Protein kinase C (PKC) isoform과 관련된 기전에 관한 연구를 시도하였다. 대상 및 방법: 인체 상피세포를 NNK에 노출시킨 후 saturation density, soft agar colony formation, cell aggregation 및 foci의 출현 등의 양상을 파악하여 세포 발암성 여부를 관찰하였으며 NNK를 15분간 노출시킨 후 PKC의 변화는 세포 내 PKC isoform의 양을 cytosolic fraction과 membrane fraction으로 분리하여 측정하여 분석하였다. 결과: NNK 투여군에서 saturation density, soft agar colony formation, cell aggregation 및 foci의 출현 시기 등의 세포 발암성을 뚜렷이 나타내었으며 PKC isoform분석의 경우 PKC-$\alpha$의 membrane fraction의 뚜렷한 증가를 보였으며 이러한 활성은 용량-의존적인 형태를 유지하였다. PKC-$\varepsilon$은 NNK 처리 시 용량-의존적으로 cytosol fraction의 감소 및 membrane fraction의 증가를 뚜렷하게 보였고 NNK에 의한 PKC-λ의 변화는 감지되지 않았다. 결론: 본 연구는 화학적 발암물질인 NNK가 인체발암화에 관여함을 재차 확인하면서 초기 과정에 관여하는 PKC isoform의 변화를 분석함으로써 total PKC활성이 아닌 isoform 각각에 대한 변화를 확인하였다는 점에서 앞으로 인체상피세포 기원의 폐암 생성 기전 연구에 기여할 것으로 생각한다.
Rev is an essential regulatory protein for HIV-1 replication. Rev (11-20) is known as the significant region regarding the function of a nuclear entry inhibitory signal (NIS) of Rev. In this study, anticandidal effects and mechanism of action of Rev (11-20) were investigated. The result exhibited that Rev (11-20) contained candidacidal activities. To understand target site(s) of Rev (11-20), the intracellular localization of the peptide was investigated. The result showed that Rev (11-20) rapidly accumulated in the fungal cell surface. The cell wall regeneration test also indicated that Rev (11-20) exerted its anticandidal activity to fungal plasma membrane rather than cell wall. The fluorescent study using 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene (DPH) further confirmed the membrane-disruption mechanism(s) of Rev (11-20). The present study suggests that Rev (11-20) possesses significant potential regarding therapeutic agents for treating fungal diseases caused by Candida species in humans.
Papyriflavonol A (PapA), a prenylated flavonoid [5,7,3',4'-tetrahydroxy-6,5'-di-(${\gamma},{\gamma}$-dimethylallyl)-flavonol], was isolated from the root barks of Broussonetia papyrifera. Our previous study showed that PapA has a broad-spectrum antimicrobial activity against pathogenic bacteria and fungi. In this study, the mode of action of PapA against Candida albicans was investigated to evaluate PapA as an antifungal agent. The minimal inhibitory concentration (MIC) values were 10~25 ${\mu}g/ml$ for C. albicans and Saccharomyces cerevisiae, Gram-negative bacteria (Escherichia coli and Salmonella typhimurium), and Gram-positive bacteria (Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus). The kinetics of cell growth inhibition, scanning electron microscopy, and measurement of plasma membrane florescence anisotrophy revealed that the antifungal activity of PapA against C. albicans and S. cerevisiae is mediated by its ability to disrupt the cell membrane integrity. Compared with amphotericin B, a cell-membrane-disrupting polyene antibiotic, the hemolytic toxicity of PapA was negligible. At 10~25 ${\mu}g/ml$ of MIC levels for the tested strains, the hemolysis ratio of human erythrocytes was less than 5%. Our results suggest that PapA could be a therapeutic fungicidal agent having potential as a broad spectrum antimicrobial agent.
Park, Sang-Hee;Lee, Ah-Reum;Choi, Keonwoo;Joung, Soyoung;Yoon, Jong-Bok;Kim, Sungjoo
BMB Reports
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제52권12호
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pp.712-717
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2019
Translocase of outer mitochondrial membrane 20 (TOMM20) plays an essential role as a receptor for proteins targeted to mitochondria. TOMM20 was shown to be overexpressed in various cancers. However, the oncological function and therapeutic potential for TOMM20 in cancer remains largely unexplored. The purpose of this study was to elucidate the underlying molecular mechanism of TOMM20's contribution to tumorigenesis and to explore the possibility of its therapeutic potential using colorectal cancer as a model. The results show that TOMM20 overexpression resulted in an increase in cell proliferation, migration, and invasion of colorectal cancer (CRC) cells, while siRNA-mediated inhibition of TOMM20 resulted in significant decreases in cell proliferation, migration, and invasion. TOMM20 expression directly impacted the mitochondrial function including ATP production and maintenance of membrane potential, which contributed to tumorigenic cellular activities including regulation of S phase cell cycle and apoptosis. TOMM20 was overexpressed in CRC compared to the normal tissues and increased expression of TOMM20 to be associated with malignant characteristics including a higher number of lymph nodes and perineural invasion in CRC. Notably, knockdown of TOMM20 in the xenograft mouse model resulted in a significant reduction of tumor growth. This is the first report demonstrating a relationship between TOMM20 and tumorigenesis in colorectal cancer and providing promising evidence for the potential for TOMM20 to serve as a new therapeutic target of colorectal cancer.
Ceramide analogs are potential chemotherapeutic agents. We report that a ceramide analog induces apoptosis in human prostate cancer cells. The ceramide analog induced cell death through an apoptotic mechanism, which was demonstrated by DNA fragmentation, the cleavage of poly ADP ribose polymerase (PARP), and a loss of membrane asymmetry. Treating the cells with ceramide analog resulted in the release of various proapoptotic mitochondrial proteins including cytochrome c and Smac/DIBLO into the cytosol, and a decrease in the mitochondrial membrane potential. In addition, the ceramide analog decreased the phospho-Akt and phospho-Bad levels. The expression of the antiapoptotic Bcl-2 decreased slightly with increasing Bax to Bcl-2 ratio. These results suggest that the ceramide analog induces apoptosis by regulating multiple signaling pathways that involve the mitochondrial pathway.
Disulfiram is a drug used to treat alcohol dependence. Recent studies have shown that disulfiram also has anti-cancer effects. Considering that many anti-cancer agents have side effects, including immunosuppression, it is important to check if disulfiram has some cytotoxicity to immune cells. In this study, mouse spleen cells were treated with disulfiram and the metabolic activity was measured. Disulfiram increased the cell death of spleen cells according to annexin V-FITC/PI staining analysis. In addition, disulfiram decreased the mitochondrial membrane potential of spleen cells. The toxicity of disulfiram was concentration dependent. Interestingly, disulfiram affected the population of lymphocytes and the subset of spleen cells was altered. This study provides clinicians and researchers with valuable information regarding the toxicity of disulfiram to mouse spleen cells, particularly lymphocytes.
석유기반 플라스틱의 대체제인 폴리하드록시부틸레이트(polyhydroxybutyrate, PHB)의 기존 추출방법은 분자량 감소 및 물성 변형을 일으킨다. 본 연구에서는 기능화 된 탄소나노튜브(carbon nanotube, CNT)를 부착한 돌기형 탄소나노튜브 분리막의 여과를 통해 물리적 파쇄를 발생시켜 미생물 내 축적된 PHB를 추출하고자 하였다. 돌기형 탄소나노튜브 분리막의 물리적 파쇄를 확인하기 위해 대장균 용액으로 여과 실험을 수행하여 불활성화를 관찰하였다. 또한 PHB를 축적한 미생물 용액의 여과를 수행하여 PHB가 추출되었는지 확인하였더니 가장 대표적인 추출방법인 chloroform과 비교하여도 여과로 인한 추출이 4% 높은 성능을 가진 것을 관찰하였다. 본 결과를 통해 친환경적 바이오 플라스틱 회수를 위한 돌기형 탄소나노튜브 분리막의 적용 가능성을 확인하였다.
Object : Objective: This study was conducted to investigate the anti-cancer effects of Mylabris phalerata (반모) in some kinds of cancer cells. Materials and Methods: Some kinds of cancer cells lines were treated. We used nine kinds of cancer cell lines, such as stomach cancer cells (Kato), lung cancer cells (Calu-1, NCI-H 1395), urinary bladder cancer cells (HS789T), bone cancer cells (Saos-2), brain cancer cells (SK-N-MC), liver cancer cells (Hep-G2), skin cancer cells (Mo-1) and prostate cancer cells (PC-3) with the water decoction of Mylabris phalerata. The histological changes of all cell lines in the media (RPMI-1640) containing the decoction of Mylabris phalerata were observed and we examined cell death assay by trypan blue exclusion testing was examined. Finally, the change of mitochondrial membrane potential was measurd and the inhibitory effect of Mylabris phalerata on cell increase was examined by analyzing the cell cycle. Results: In histologic change all cancer cell lines showed withdrawn and floating appearance that is typical in cellular impairment. Most of the cell lines showed over 50% death rate after 24 hours in trypan blue exclusion tests. Especially the stomach, urinary bladder. brain and liver cell lines showed over 30% death rate after 12 hours. All cell lines treated with Mylabris phalerata were less stained than the control group and the mitochondrial membrane potential in the Mylabris phalerata treated cell lines was markedly lower than that in the control group. The measurement of DNA quantity in all cell lines showed the disappearance of the peak and the thickened left axis, which suggests that all cellular DNA degraded. Conclusion: Mylabris phalerata had cytotoxicity on various kinds of cancer cell lines and the mechanism of that was the impairment of mitochondria by the breakdown of the mitochondrial cell membrane. We propose that this is in part attributable to the destruction of DNA in cancer cells.
Changes in the both inward current and conductance of membrane by the fertilization were observed using the one microelectrode voltage clamp(or switch clamp) technique. Unfertilized eggs and both 1- and 2-cell stage eggs after fertilization were donated from the superovulated mouse (ICR, more than 6 weeks old) treated with PMSG(pregnant mare serum gonadotropin, Sigma) and HCG(human chorionic gonadotropin, Sigma) and naturally mated ones, respectively in this experiment. Membrane potential was held at -90mV and the voltage step was applied from -80mV to 50mV with interval of 10mV or 20mV for 300ms. since both of amplitudes and time courses in the membrane currents were various according to the states of cells and clamping condition, results were presented by their $averages{\pm}SEM$(standard mean error)and ratios or percentages. Inward currents began to appear in response to the step depolarization from -60mV and reached its maximum at -50mV. However, since the potential was not clamped evenly during the voltage step, current-voltage(I-V) relationship might be positively shifted 10 or 20mV. From the steady-state currents plotted in the I-V curve, outward rectification was markedly observed. Peak inward currents$(i_{in})$ at -50mV were $-0.62{\pm}0.23nA$(n=4),$-0.52{\pm}0.25nA$(n=5) and $-0.37{\pm}0.25nA$(n=6), in the 1-cell stage, 2-cell stage fertilized eggs and in the unfertilized eggs, respectively. Pure inward current (difference between steady-state and peak, $i_{in. pure}$) were $-1.01{\pm}0.23nA$, $-0.69{\pm}0.43nA$ and $-0.68{\pm}0.29nA$, respectively in the 1-cell stage fertilized eggs, unfertilized eggs and 2-cell stage fertilized eggs. These results suggested that the outward current in fertilized eggs of 2-cell stage was more increased than those in the unfertilized eggs. Pure inward currents in the all stages of eggs showed a similar fashion in the I-V relationship from -50mV to 50mV and reversal potential at 50mV. Time constant of inactivation$({\tau})$ in the inward current was decreased as the membrane potential was depolarized in the unfertilized and 2-cell stage eggs but in the 1-cell stage eggs t was not likely to be affected significantly. Slope conductances were 14.2nS, 8.9n5 and 7.7nS in the 1-cell, 2-cell stage fertilized eggs and the unfertilized eggs, respectively. Membranes between two cells within a zona pellucida seem to be electrical-connected in the 2-cell stage eggs from the observation made in the analysis for the electronic spread and decay to the current stimuli. Both of inward current and membrane conductance were increased after fertilization in the mouse eggs. Inward current seems to be carried by the same ion or through the same channels up to the 2-cell stage and ion that carried inward current was thought to play important function after fertilization in the mouse eggs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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