Thousand actinomycetes and 50 soil samples were used for the isolation of microorganisms producing yeast cell wall lytic enzymes. Among 493 strains producing large clear zones on autolysed washed yeast (AWY), 117 strains were selected on living yeast cell agar plates. With the method of lytic activity, one strain (St-1702) was selected, which was temporarily identified as Streptomyces eurythermus. The optimal condition for enzyme production of this strain was partially determined as follows: incubation of the strain for 3 days at 30$\circ$C in the medium containing 2% freeze dried yeast cell, 1% glucose, 1% K$_{2}$HPO$_{4}$, 0.01% MgSO$_{4}$'7H$_{2}$O, 0.5% peptone, and 0.2% (NH$_{4}$)$_{2}$CO$_{3}$ with pH 7.0. The protoplast formation of yeast by using the enzyme produced by this strain was compared with commercial enzymes.
Bone marrow (BM) cell harvesting is a crucial element in the isolation of mesenchymal stem cells (MSCs). A simple method for harvesting cat BM cells is described. The results show that a large number of BM cells can rapidly be harvested from the cat by this simple procedure. MSCs prepared by density-gradient method were spindle-shaped morphology with bipolar or polygonal cell bodies and strongly positive for CD9 and CD44 and negative for CD18 and CD45-like. They were capable of differentiation to adipocytic and osteocytic phenotypes when exposed to appropriate induction media. The advantages of this method are its rapidity, simplicity, low invasiveness, and low donor attrition and good outcome.
Nek2 is a mammalian protein kinase that is structurally homologous to NIMA, a mitotic regulator in Aspergillus nidulans. We recently observed that the Nek2 protein was localized in multiple sites within a cell in a cell cycle state-specific manner. This suggests that Ndk2 is involved in diverse cellular functions during the cell cycle progression. To have a better understanding on cellular functions in which Nek2 participates, we carried out yeast two-hybrid screening and isolated six candidate clones whose products interact with Nek2. Most of Nek2-interacting proteins (NIPs) appear cytoplasmic, suggesting that Nek2 is involved in cellular functions in cytoplasm. Further experiments are under progress to confirm their interactions with Nek2 and to understand their biological significance.
A colostral protein that augments natural killer (NK) cell activity was isolated from bovine colostrum. This protein, designated matemal immunity enhancing factor (MIEF), increased NK cell-mediated cytotxicity against human tumor targets wheb added to cultures of resting peripheral blood lymphocytes. The NK cell stimulatory activity of the MIEF was demonstrated at the concentrations as low as 0.1-0.01 $\mu$g/ml. Purified MIEF showed an apparent molecular weight of 22,000 in SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The unusual biochemical characteristics of the MIEF distinguish it from other cytokines. The MIEF was soluble at a cold tgemperature, and precipitated by raising the temperature. This themal precipitability was reversible, and dependent on the concentration, pH and ionic strength. Maximal precipitation was observed at neutral pH, and higher ionic strength.
The development of routine techniques for the isolation and in vitro maintenance of conducting airway epithelial cells in a differentiated state provides an ideal model to study the factors involved in the regulation of the expression of mucocilicary differentiation. Several key factors and conditions have been identified. These factors and conditions include the use of biphasic culture technique to achieve mucociliary differentiation and the use of such stimulators, the thickness of collagen gel substratum, the calcium level, and vitamin A, and such inhibitors, the growth factors EGF and insulin, and steroid hormones, for mucous cell differentiation. Using the defined culture medium, the life cycle of the mucous cell population in vitro was investigated. It was demonstrated that the majority of the mucous cell population in primary cultures is not involved in DNA replication. However, the mucous cell type is capable of self-renewal in culture and this reproduction is vitamin A dependent. furthermore, differentiation from non-mucous cell type to mucous cell type can be demonstrated by adding back a positive regulator such as vitamin A to the “starved” culture. Cell kinetics data suggest that vitamin A-dependent mucous cell differentiation in culture is a DNA replication-independent process and the process is inhibited by TGF-${\beta}$1.
슈반세포의 수초화에 대한 연구는 일차 슈반세포의 분리와 배양의 성공에 의해 가능해지고 있다. 본 연구에서는 슈반세포의 근원으로서 마우스 배아의 척수신경절이 사용되었다. 이 방법에는 세 가지 단계가 있다. 첫 단계는 배아의 척수신경절의 파쇄이고 두 번째 단계는 섬유아세포로부터 슈반세포-뉴런 연합체의 기계적인 분리에 의한 슈반세포의 전구세포의 확장이며 세 번째 단계는 뉴런으로 부터 슈반세포의 분리와 분리된 슈반세포의 확장이다. 우리는 본 과정을 통해 짧은 시간이내에 슈반세포-뉴런 연합체와 슈반세포를 고순도로 분리하였다.
Spermatogonial stem cells originate from gonocytes and undergo self-renewal and differentiation to generate mature spermatozoa via spermatogenesis in the seminiferous tubules of the testis in male mammals. Owing to the unique capacity of these cells, the spermatogonial stem cell transplantation technique, which enables the restoration of male fertility by transfer of germlines between donor and recipient males, has been developed. Thus, spermatogonial stem cell transplantation can be used as an important next-generation reproductive and breeding tool in livestock production. However, in large animals, this approach is associated with many technical limitations and inefficiency. Furthermore, research regrading spermatogonial stem cell transplantation in stallions is limited. Therefore, this review article describes the history and current knowledge regarding spermatogonial stem cell transplantation in animals and challenges in establishing an experimental protocol for successful spermatogonial stem cell transplantation in stallions, which have been presented under the following heads: spermatogonial stem cell isolation, recipient preparation, and spermatogonial stem cell transplantation. Additionally, we suggest that further investigation based on previous unequivocal evidence regarding donor-derived spermatogenesis in large animals must be conducted. A detailed and better understanding of the physical and physiological aspects is required to discuss the current status of this technique field and develop future directions for the establishment of spermatogonial stem cell transplantation in stallions.
According to the experiment on pure-isolation and the related contaminants of Chlorella, the phenomena of the ecological distributions of Chlorella in Korea have been manifested in several areas and also the aim that in going to do culture, biological and physiological study of Chlorella is carried out. Contaminants very oftenly occupied on the colony of the strains taken in order to fulfil pure-isolation of Chlorella, but in accordance with being piled up the minute research on this subject, I can obtain the desirable results as follows: 1. For the pure-isolation, the duration chose the time from May to September 1957 so that may easily isolate from contaminant water with utilizing the antibiotic substances. 2. To take long time, 36-48 hours until growth of nascent through the non-sporulated, it originates from the difference of the cultured media. In addition to the above mention, the mechanism of growth until nascent through the sporulated must not always require the ligh. However the supply of metabolic energy depend upon its nutritional conditions per phase. 3. The culture of Chlorella should be based on the lower culturing except adding especial conditions such as reagent concentration of media, artifical shake of media and other facts due to the natural conditions. And also these strains grew not only in distilled water but 2% NaCl solution without any abnormality in cell it self. I, therefore, guess it is possible to culture in sea-water under phasic environment. 4. In the experiment of ammonia detection, it is caused by the sampling surroundings to contain the minute quantity of ammonia in strain No. M 918; that is the place to be plenty of Carbohydrate on behalf of protein. 5. To compare the absorption curve of chlorophyll of higher plant with that of Chlorella, the absorption zone made mostly the Same ones each other but a little absorption grade dose not clearly appear. The colony which formed giant type grows with intensive colour and green band on surrounding of the colony and after that it was changed into all the green colour and developed up to end. 6. At first phase for a week, the development of Chlorella suspends the normal condition as in vivo but after a few days, the colour of chlorophyll gradually changed into blue-yellow which secrete the mucous substances on the agar media. The cell was flew out the contained substances itself on leaving the cell wall only, or the various micro-organism diffused on the outer-region of the cell.
Yu, Jae Sik;Roh, Hyun-Soo;Baek, Kwan-Hyuck;Lee, Seul;Kim, Sil;So, Hae Min;Moon, Eunjung;Pang, Changhyun;Jang, Tae Su;Kim, Ki Hyun
Journal of Ginseng Research
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제42권4호
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pp.562-570
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2018
Background: Lung cancer is the leading cause of cancer-related death worldwide. In this study, we used a bioactivity-guided isolation technique to identify constituents of Korean Red Ginseng (KRG) with antiproliferative activity against human lung adenocarcinoma cells. Methods: Bioactivity-guided fractionation and preparative/semipreparative HPLC purification were used with LC/MS analysis to separate the bioactive constituents. Cell viability and apoptosis in human lung cancer cell lines (A549, H1264, H1299, and Calu-6) after treatment with KRG extract fractions and constituents thereof were assessed using the water-soluble tetrazolium salt (WST-1) assay and terminal deoxyribonucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) staining, respectively. Caspase activation was assessed by detecting its surrogate marker, cleaved poly adenosine diphosphate (ADP-ribose) polymerase, using an immunoblot assay. The expression and subcellular localization of apoptosis-inducing factor were assessed using immunoblotting and immunofluorescence, respectively. Results and conclusion: Bioactivity-guided fractionation of the KRG extract revealed that its ethyl acetate-soluble fraction exerts significant cytotoxic activity against all human lung cancer cell lines tested by inducing apoptosis. Chemical investigation of the ethyl acetatesoluble fraction led to the isolation of six ginsenosides, including ginsenoside Rb1 (1), ginsenoside Rb2 (2), ginsenoside Rc (3), ginsenoside Rd (4), ginsenoside Rg1 (5), and ginsenoside Rg3 (6). Among the isolated ginsenosides, ginsenoside Rg3 exhibited the most cytotoxic activity against all human lung cancer cell lines examined, with $IC_{50}$ values ranging from $161.1{\mu}M$ to $264.6{\mu}M$. The cytotoxicity of ginsenoside Rg3 was found to be mediated by induction of apoptosis in a caspase-independent manner. These findings provide experimental evidence for a novel biological activity of ginsenoside Rg3 against human lung cancer cells.
개인 휴대통신의 서비스 대역에 대응하는 4중 대역 p-HEMT SP6T 스위치를 구현하였다. 낮은 삽입손실과 높은 격리특성을 달성하기 위하여, 트랜지스터 단위소자의 최적화를 통해 On-Off간 상호 보완적 관계를 고려하였으며, 특히 송수선간 격리 특성의 경우, 큰 커패시터 삽입을 통하여 우수한 격리 특성을 달성하는 동시에 단일의 전압제어와 백비아를 사용한 접지를 통해 소형화를 달성하였다. 구현된 SP6T 스위치는 $950um{\times}100um$의 크기를 가지며 공정상 게이트 우물의 오류를 감안할 때, 각 주파수 대역에서 우수한 삽입손실 및 격리특성을 확인 할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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