The ultrastructure of oocytes during oogenesis and oocyte degeneration associated with follicle cells in female Sinonovacula constricta(Lamarck, 1818) were investigated by electron microscope observations. Ovarian follicles are surrounded by a matrix of vesicular connective tissue cells(VCT cells). VCT cells contain large quantities of glycogen particles and several lipid droplets in their cytoplasm. It is suggested that VCT cells act as a source of nutrients for vitellogenesis during oogenesis. In early vitellogenic oocytes, several coated vesicles, which appear at the basal region of the oocyte, lead to the formation of membrane-bound vesicles via endocytosis. The uptake of nutritive materials in coated vesicles formed by endocytosis appears through the formation of coated pits on the oolemma during vitellogenesis. During the late stage of oogenesis, yolk precursors(yolk granules), mitochondria and lipid droplets are present in the cytoplasm of late vitellogenic oocytes. In particular, proteinaceous yolk granules containing several different components are intermingles and form immature yolk granules. In the mature oocyte, small immature yolk granules are intermingled and form large mature yolk granules. Vitellogenesis occurs through a process of autosynthesis, involving combined activity of the Golgi complex, mitochondria and rough endoplasmic reticulum in the cytoplasm of vitellogenic oocytes. The process of heterosynthesis is where extraovarian precursors are incorporated into oocytes by endocytosis at the basal region of early vitellogenic oocytes before the formation of the vitelline coat. Follicle cells appear to play an important role in vitellogenesis and oocyte degeneration. The functions of attached follicle cells to the oocyte during oocyte degeneration are phagocytosis and digestion of phagosomes originating from oocyte degeneration. After digestion of phagosomes, it is assumed that the function of follicle cells can permit a transfer of yolk precursors necessary for vitellogenesis and allows for the accumulation of glycogen and lipid during oocyte degeneration, which can be employed by vitellogenic oocytes. Follicle cells of S. constricta may possess a lysosomal system for induction of oocyte breakdown and might resorb phagosomes in the cytoplasm for nutrient accumulation during oocyte degeneration.
The dual-function protein redox factor-1 (Ref-1) is essential for base excision repair of oxidatively damaged DNA and also governs the activation of many redox-sensitive transcription factors. We examined the role of Ref-1 in regulation of nitric oxide (NO) synthesis employing adenoviral-mediatedoverexpression of Ref-1 in bradykinin-stimulated endothelial cells. Intracellular NO was detected with the NO-sensitive fluorophore DAF-2. Overexpression of Ref-1 potentiates bradykinin-stimulated NO production in endothelial cells. And, cells ifected with AdRef-1 showed higher fluorescence intensity compared with uninfected or AdD1312-infected cells. In parallel with this, over expression of Ref-1 also stimulated endothelial NO synthase (eNOS) enzyme activity, compared with unifected or AdD1312-infected cells, in bradykinin-stimulated cells as well as in unstimulated cells. These results suggest that Ref-1 implicates in endothelium-dependent vasorelaxation resulting from NO production in vascular system.
Cheong, Hyeonsook;Paudyal, Dilli Parasad;Jun, Jae Yeoul;Yeum, Cheol Ho;Yoon, Pyung Jin;Park, Chan Guk;Kim, Man Yoo;So, Insuk;Kim, Ki Whan;Choi, Seok
Molecules and Cells
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v.20
no.2
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pp.235-240
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2005
Extracts of pine needles (Pinus densiflora Sieb. et Zucc.) have diverse physiological and pharmacological actions. In this study we show that pine needle extract alters pacemaker currents in interstitial cells of Cajal (ICC) by modulating ATP-sensitive $K^+$ channels and that this effect is mediated by prostaglandins. In whole cell patches at $30^{\circ}C$, ICC generated spontaneous pacemaker potentials in the current clamp mode (I = 0), and inward currents (pacemaker currents) in the voltage clamp mode at a holding potential of -70 mV. Pine needle extract hyperpolarized the membrane potential, and in voltage clamp mode decreased both the frequency and amplitude of the pacemaker currents, and increased the resting currents in the outward direction. It also inhibited the pacemaker currents in a dose-dependent manner. Because the effects of pine needle extract on pacemaker currents were the same as those of pinacidil (an ATP-sensitive $K^+$ channel opener) we tested the effect of glibenclamide (an ATP-sensitive $K^+$ channels blocker) on ICC exposed to pine needle extract. The effects of pine needle extract on pacemaker currents were blocked by glibenclamide. To see whether production of prostaglandins (PGs) is involved in the inhibitory effect of pine needle extract on pacemaker currents, we tested the effects of naproxen, a non-selective cyclooxygenase (COX-1 and COX-2) inhibitor, and AH6809, a prostaglandin EP1 and EP2 receptor antagonist. Naproxen and AH6809 blocked the inhibitory effects of pine needle extract on ICC. These results indicate that pine needle extract inhibits the pacemaker currents of ICC by activating ATP-sensitive $K^+$ channels via the production of PGs.
We generated gene expression data from the tissues of 50 gastric cancer patients, and applied meta-analysis and gene set analysis to this data and three other stomach cancer gene expression data sets to define the gene expression changes in gastric tumors. By meta-analysis we identified genes consistently changed in gastric carcinomas, while gene set analysis revealed consistently changed biological themes. Genes and gene sets involved in digestion, fatty acid metabolism, and ion transport were consistently down-regulated in gastric carcinomas, while those involved in cellular proliferation, cell cycle, and DNA replication were consistently up-regulated. We also found significant differences between the genes and gene sets expressed in diffuse and intestinal type gastric carcinoma. By gene set analysis of cytogenetic bands, we identified many chromosomal regions with possible gross chromosomal changes (amplifications or deletions). Similar analysis of transcription factor binding sites (TFBSs), revealed transcription factors that may have caused the observed gene expression changes in gastric carcinomas, and we confirmed the overexpression of one of these, E2F1, in many gastric carcinomas by tissue array and immunohistochemistry. We have incorporated the results of our meta- and gene set analyses into a web accessible database (http://human-genome.kribb.re.kr/stomach/).
The present studies were conducted to evaluate the effects of activin-A on gonadotropins (GTHs) release in testosterone-treated immature rainbow trout Oncorhpynchus mykiss. The administration of testosterone elevated pituitary level of GTH II but not of GTH I. In this study using primary cultures of dispersed pituitary cells in static incubation, dose-dependent increases in GTH II release was observed in the activin-treated group at day 3 of incubation (long-term incubation), but not at day 1 of incubation (short-term incubation). Dopamine, a potent inhibitor of gonadotropin-releasing hormone (GnRH)-stimulated GTH II release in rainbow trout, was only partially effective in decreasing actvin-induced GTH II release. Furthermore, salmon GnRH (sGnRH)-stimulated GTH II release was not potentiated by the pretreatment with activin. However, the control mechanisms of GTH I release by activin and other hormones were not observed in the all tested experiments. The results of these studies support the contention that in contrast with the usual stimulatory effects of activin on GTH release in mammals, activin exerts long-term stimulatory actions on GTH II release in rainbow trout. The control mechanism of GTH I release, however, is a question that remains to be elucidated.
Interleukin-4(IL-4) is known to be a major cytokine regulating immunoglobulin E(IgE) response by the induction of IgE production and type II IgE receptor(IgER II: CD23) expression. Recently, however, the role of neuroendocrine factors has been implicated in modulating the IgE response. Among various neuroendocrine growth factors, we investigated the effects of the insulin-like growth factor-1(IGF-1) since IL-4 and IGF-1 share common intracellular signaling molecules, such as the insulin receptor substrate-1/2(IRS-1/2) to induce a specific cellular response. In the human peripheral blood mononuclear cell (PBMC) cultures, IGF-1 was capable of inducing a substantial level of IgE production in a dose-dependent manner. It also noticeably upregulated the IL-4-induced or IL-4 plus anti-CD40-induced IgE production. Similarly, the IGF-1-induced IgE production was enhanced by IL-4 or anti-CD40 in an additive manner, which became saturated at high concentrations of IGF-1. Although IGF-1 alone did not induce IgER II (CD23) expression, it augmented the IL-4-induced surface CD23 expression in a manner similar to the action of anti-CD40. These results imply that IGF-1 is likely to utilize common signaling pathways with IL-4 and anti-CD40 to induce IgE and IgER II expression. In support of this notion, we observed that IGF-1 enhanced the IL-4-induced signal transducers and activators of transcription 6(STAT6) activation and independently induced $NF-{\kappa}B$ activation. Both of these bind to the IgE(C) or IgER II (CD23) promoters. Together, our data suggest that IL-4 and IGF-1 work cooperatively to activate STAT6 and $NF-{\kappa}B$. This leads to the subsequent binding of these transcription factors to the $C{\varepsilon}$ and CD23 promoters to enhance the expression of IgE and IgER II. The observed differential ability of IGF-1 on the induction of IgE vs. IgER II is discussed based on the different structure of the two promoters.
The effect of tryptophan or serotonin on the early stage of chick brain development has been morphologically investigated using an electron microscope. The electron micrographs of neural plate cells of 1-day chick embryo treated with tryptophan or serotonin showed irregularity, evagination and disruption of nuclear membrane and nuclear chromatin condenstation, nucleolar margination and segregation. Hypertrophy of stalks, vesicles and vaculoes were seen and dilated and disrupted rough endoplasmic reticulum and underdeveloped neurotubules were also observed. In mesenchyme cells of tryptophan or serotonin administered 18 hr embryo, irregular nuclear membrane, swollen mitochondria, dilated rough endoplasmic reticulum and very large yolk granules were observed. Furthermore, DNA, RNA and protein contents of the embryos treated with typtophan or serotonin were considerably lower than those of control group. The amount of tubulin of the experimental groups was also greatly lower than that of control, suggesting that the impairment of microtubule formation occurred. Tryptophan or serotonin administration might depress the biosynthesis, of nucleic acid and protein including some enzymes tested. It seems that the serotonin formed from exogeneous tryptophan might inhibit the degradation of yolk granule by feedback regulation mechanism so as to impair microtububle and microvilli formation followed by a malformation of chick embryos.
We have developed a couple of new luciferase reporter plasmida with very low background reporter actlvltlea. One can be used to measure the promoter strength, after insertion of some promoter fragment into the reporter plasmid, and the other, with very low basal promoter actlvltlea, allis In studying eukaryotic transcriptional regulators. The latter reporter plasmid contains such cli elements as a 17 nucleotide long inftlator, Spl.blndIng sftes, GAL4 binding sltea, and bInding sitea for a certain Drosophila homeodomain proteins. In an attempt to construct an improved reporter plaimid by fadlltating transcriptional termination and minimizing any interference by cryptic promoters which may be preaent in the reporter pleamld DNA, we have inserted transsrlptional termination-related signals, a three tandem repeat of SV4O polyadenylatlon signal (AAA) and the putative transcrtptional termination signal (UMS) of the mouse c-mos gene, Into just upstream of the initIator, and the promoter actlvitiea were measured by a transIent expression assay employing the Drosophila Schneider line 2 cells. As expected, the basal promoter activitIes decreased maximally when both transcription termination related elements were inserted. Moreover, the reporter plasmld with the two elements allowed more sensitive measurement of transcriptional activation than the reporter piasmid without them. Theae reporter plasmids can be used for studying transcriptional regulators of higher organisms Including mammals as well as Droiophlla melanogaiter.
Specific affinity binding sites for atrial natriuretic peptide (ANP) were Investigated in the pig ovarian tissues by in vitro autoradiographic techniques. In the pig ovary, the highest binding sites for 12514abeiled rANP(l~28) were localized in the granulosa cell layer of the forncles. The binding sies on theca layer of the ovarian follicles were mainly localized in the external layer, but none was observed In the Internal layer. In the corpus luteum, the binding site was not observed. The specific bindings of 200 pM of l2Sl4abelled rANP(l~28) to granulosa and theca externa layers were reversed completely by excess concentration (1 ~4) of unlabelled rANP(l~28) but not by 10 ~ of unrelated peptides, human angiotensin II and arginine vasopressin. The binding was also displaced by 1 ~ of desiGIn18, Ser19, Gly2O, leu21, Gly22I ANP(4~2g) (C- ANF) as a spedfic ligand of the ANP clearance receptor. Therefore these results indicate ~hat the biological and the clearance ANP receptors exist in the theca externa and granulosa layer of the pig ovary, and suggest that the ANP receptors may be related with the regulatory lundion of the ovarian follicular development including oocyte maturation.
Studies on the anatomical observation of Bamboos distributed in East-South Asia for systematic botany were scarecely reported except for the morphological studies on Bamboos, which was investigated by Dr. Hiroshi Usui, present author and others. Recently it has been certain that it could be hardly classify some species of bamboo family without this work. For this reason the author reported the anatomical studies on Korean bamboos in 1959, and furthermore the author intended to identify the two species of Pleioblastum Simoni Nakai in Korean bamboos by studying the characteristics of internal structure and qualitative assay of free amino acid containg in Pleioblastus Simoni Nakai(1), (2). In view of fact that there is some differences between two species, it is likely to be identifiable completely different species one another. Furthermore, a lot of characteristics surveyed by the author were as follow: It was reassumed that two species cultivated under same conditions for three years were different alternately in the species of Pleioblastus Simoni Nakai. At the same time, these studies could clarify some evolutional processes of bamboo family. On the other hand, it was found that two species had not only the obvious difference in aerenchyma, the size of thickwalled parenchyma and bulliform cell, but also the internode of Pleioblastus Simoni Nakai(1) is longer than the other, the speed of growing is more rapid, the leaf of former is narrow and that of latter is wide. The free amino acids containg in each species were found as 18 kinds, especially Pleioblastus Simoni Nakai (2) had not Histidine in spite of containg in Pleioblastus Simoni Nakia(1). From the characteristics and the experiments described above, it seemed to the author that Pleioblasus Simoni Nakai (1) which was growing at the region of Ulsan in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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