A flat-type membrane bioreactor(FMBR ) for aerobic whole cell immobilization was developed and its performance for the citric acid production was investigated using Aspergillus niger (KCTC 1232). The reactor consisted of three layers. The top layer contained flowing air for oxygen supply, the middle layer had stationary cells, and the bottom layer had flowing aqueous nutrients. The initial pH of the culture medium played an important role in citric acid production and the lower initial pH of the culture medium resulted in a higher citric acid yield. Under air and pure oxygen aerations the volumetric productivity reached 0.20 and 0.40g/Lh. Furthermore, the productivity improved with the increase of the culture medium feed rate.
The cells of Rhodococcus rhodochrous M33, which produce a nitrile hydratase enzyme, were immobilized in acrylamide-based polymer gels. The optimum pH and temperature for the activity of nitrile hydratase in both the free and Immobilized cells were 7.4 and 45$\^{C}$, respectively, yet the optimum temperature for acrylamide production by the immobilized cells was 20$\^{C}$. The nitrile hydratase of the immobilized cells was more stable with acrylamide than that of the free cells. Under optimal conditions, the final acrylamide concentration reached about 400 g/L with a conversion yield of almost 100% after 8 h of reaction when using 150 g/L of immobilized cells corresponding to a 1.91 g-dry cell weight/L. The enzyme activity of the immobilized cells rapidly de-creased with repeated use. However, the quality of the acrylamide produced by the immobilized cells was much better than that produced by the free cells in terms of color, salt content, turbidity, and foam formation. The quality of the aqueous acrylamide solution obtained was found to be of commercial use without further purification.
The Pseudomonas sp. strain NGK1 (NCIM 5120) was immobilized in calcium alginate, agar, and polyacrylamide gel matrices. The salicylic acid-producing capacity of freely suspended cells was compared with immobilized cells in batches with a shake culture and continuous culture system in a packed bed reactor. Freely suspended cells ($4\times10^{10}cfu/ml$) produced 12 mM of salicylic acid, whereas cells immobilized in calcium alginate ($1.8\times10^{11}$cfu/g beads), agar ($1.8\times10^{11}$cfu/g beads), and polyacrylamide ($1.6\times10^{11}$cfu/g beads) produced 15, 11, and 16mM of salicylic acid, respectively, from naphthalene at an initial concentration of 25 mM. The continuous production of salicylic acid from naphthalene was investigated in a continuous packed bed reactor with two different cell populations. The longevity of the salicylic acid-producing activity of the immobilized cells from naphthalene was also studied in semi continuous fermentations. The immobilized cells could be reused 18, 13, and more than 20 times without losing salicylic acid-producing activity in calcium alginate-,agar-, and polyacrylamide-entrapped cells, respectively. The study reveals a more efficient utilization of naphthalene and salicylic acid production by the immobilized Pseudomonas sp. strain NGK1 as compared to the free cells.
This research is to investigate the reaction kinetics by air-lift bioreactor using calcium hydroxide, the neutralization agent and immobilization media, for removing ethylene glycol remained after chemical pretreatment. It was found that the optimum hydraulic retention time was obtained as 24.2hours at the optimum F/M ratio of 1.32kg-$TCOD_{Mn}$/day.kg-MLVSS, and then, infiuent $TCOD_{Mn}$ and MLVSS concentration were 3,290mg/l and 2,472mg/l, respectively. During the steady state, the kinetics constants such as maximum specific substrate removal rate, half saturation velocity coefficient, yield coefficient and endogenous respiration coefficient were estimated in the base of $TCOD_{Mn}$ as substrate concentration. And they were 1.47day$^{-1}$, 3.95mg/l, 0.391 and 0.092day$^{-1}$, respectively. And also, the oxgen use coefficients for cell synthesis, a', and energy of maintenance, b', were obtained as 0.4kg-O$_{2}$/kg-$TCOD_{Mn}$ and 0.056day$^{-1}$, at the steady state by the experimental result of oxygen uptake rate.
Lactobacillus reuteri NK33 (NK33) and Bifidobacterium adolescentis NK98 (NK98) alleviate immobilization stress-induced depression. To understand the gut microbiota-mediated mechanisms of NK33 and NK98 against depression, we examined their effects on Escherichia coli K1 (K1)-induced depression and gut dysbiosis in mice. NK33, NK98, and their mixtures (1:1, 4:1, and 9:1) mitigated K1-induced depression and colitis. NK33 and NK98 additively or synergistically increased BDNF+/NeuN+ cell population and suppressed NF-κB action in the hippocampus. They alleviated gut dysbiosis by reducing the Proteobacteria population and increasing the Clostridia population. These results suggest that NK33 and NK98 may alleviate depression and colitis by ameliorating gut dysbiosis.
Solid phase peptide synthesis method, which was introduced by Merrifield in 1963, has spawned the concept of combinatorial chemistry. In this review, we summarize the present technologies of solid phase peptide synthesis (SPPS) that are related to combinatorial chemistry. The conventional methods of peptide library synthesis on polymer support are parallel synthesis, split and mix synthesis and reagent mixture synthesis. Combining surface chemistry with the recent technology of microelectronic semiconductor fabrication system, the peptide microarray synthesis methods on a planar solid support are developed, which leads to spatially addressable peptide library. There are two kinds of peptide microarray synthesis methodologies: pre-synthesized peptide immobilization onto a glass or membrane substrate and in situ peptide synthesis by a photolithography or the SPOT method. This review also discusses the application of peptide libraries for high-throughput bioassays, for example, peptide ligand screening for antibody or cell signaling, enzyme substrate and inhibitor screening as well as other applications.
Three strains capable of degrading a chlorophenol were isolated by selective enrichment from soils contaminated with industrial wastewater. A Pseudomonas solanacearum TCP114 could use 2,4,6-trichlorophenol (TCP) as sole carbon and energy source, while two strains of Pseudomonas testosteroni CPW301 and Arthrobacter ureafaciens CPR706 could use 4-CP. All isolates also grew well on phenol. The degradation of one component by a pure strain was strongly affected by the presence of other compounds in the medium, CPW301 and CPR706 entirely lost the ability to degrade 4-CP and phenol in the presence of TCP. TCP114 also lost the ability to degrade phenol when 4-CP was added to the culture medium. These restrictions on the degradability could be overcome by employing defined mixed cultures (TCP114 and one strain of 4-CP degrading strains). All three components were successfully degraded by defined mixed cultures through their cooperative activities. It was also demonstrated that defined mixed cultures could be immobilized by using calcium alginate for the semi-continuous degradation of the three component mixture. Immobilization could not only accelerate the degradation rate, but also allowed the reuse of the cell mass several times without loss of the cells' degrading capabilities.
In this study, in order to develop a continuous production process of lactosucrose in a packed-bed reactor, Sterigmatomyces elviae ATCC 18894 was selected and mutated. The mutant strain of S. elviae showed 54.3% higher lactosucrose production than the wild type. Reaction conditions such as temperature, pH, substrate concentration and flow rate were also optimized. Under optimized reaction conditions ($50^{\circ}C$, pH 6.0, 25% sucrose and 25% lactose as substrate, flow rate 1.2 ml/min), the maximum concentration of lactosucrose (192 g/l) was obtained. In a packed-bed reactor, continuous production of lactosucrose was performed using S. elviae mutant immobilized in calcium alginate, and about 180 g/l of lactosucrose production was achieved for 48 days.
A fructosyltransferase from Aureobasidium pullulans was immobilized onto a polystyrene-type anionic ion-exchange resin and the production of fructo-oligosaccharides was Investigated by the immobilized enzyme. The optimum pH and the temperature of immobilized enzyme were found to be pH 5.0, $55^{\circ}C$ respectively. The thermal stability of the enzyme was greatly enhanced after immobilization. The reaction profiles of the immobilized enzyme was almost identical to those of the free cells and the soluble enzyme. The immobilized enzymes were stable up to 20 cycles without loss of initial activity in a repeated-batch operation $50^{\circ}C$.
Controlled pore glass bead was modified with bovine serum albumin (BSA), and glutathione (GSH) was immobilized through three kinds of linkers on top of BSA. Bis(3-sulfo-N-hydroxysuccinimide suberate) sodium salt $(BS^3)$, N-hydroxysuccinimide 3-(2-pyridyldithio)propionate (SPDP), or N-hydroxysuccinimide 4-maleimidobutyrate (GMBS) was introduced into the BSA-bound matrix. Subsequently, GSH was immobilized by addition of thiol side chain into the maleimido moiety, replacing a disulfide group, or formation of an amide group upon releasing 3-sulfo-N-hydroxysuccimide group. It was observed that conjugation methodology played a critical role for activity of the immobilized GSH. SDS-PAGE chromatogram showed that the matrix of glutathione immobilized on BSA through GMBS manifested high selectivity towards glutathione-S-transferase (GST) in cell lysate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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