This study was conducted to explore the immune activity, anticancer activity and nitrile scavenging activities of methanol extracts from the various organs of four Korean resource plants. The immune responses from both human T and B cell line was significantly enhanced in the cell growth compared to control while the cell growth was influenced at a certain period of culture. The results revealed that the cell growth of both human T and B cell was altered in a time dependent manner. Among tested several resource plants, the flower extract of E. japonicum demonstrated a pronounced cytotoxicity against HCT-116 cell with an IC50 value $132.08{\mu}g\;ml-1$. The flower extract from Corylopsis coreana had a promising scavenging activity against pH 1.2 compared to other species. Taken together, the studied resource plants have influenced significantly in response to immunity and also have the potential cytotoxicity and nitric scavenging activities. However, the species E. japonicum exhibited the pronounced activities from several resource plants. The result from this investigation suggests that the extracts of studied resource plant could be an addition to basic medicine for some diseases.
This study was performed to evaluate the effect of Carthami tinctorius(HH) on osteoblast function and gene expression. The osteoblasts separated from the rat calvariae were cultivated to evaluate the cell function, and MG-63 cell was also cultivated for the test of mRNA synthesis. In this experiments, cell proliferation of rat calvarial cells was increased by HH. PKC activity, intracellular free calcium level and collgen synthesis from calvarial cells were increased by HH, but not PKA activity. And the mRNA of $PLA_2$, COX-2, and $PGE_2$ synthase from MG-63 were decreased by HH, but the mRNA of prostacyclin synthase was increased. It is concluded that HH might increase the proliferation of calvarial cell resulted from augumentation of osteoblast activity and its mRNA synthesis.
The cytotoxic effect of benzoic acid and related compounds on the growth of normal cell lines and human oral epithelioid cell line was evaluated by the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and 2,3-bis-[2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl]-2H-tetrazolium-5-caboxanilide (XTT) methods. 3,4,5-Trihydroxybenzoic acid decreased the cell viability of human oral epithelioid cells and the cell adhesion activity of human oral epithelioid cells. Under the light microscopy, 100 ${\mu}M$ 3,4,5-trihydroxybenzoic acid showed the highest cytotoxic activity. From these results, we can propose that 3,4,5-trihydroxybenzoic acid has a potential anticancer activity.
Mitochondria are important sensor of apoptosis. $H_2O_2-induced$ cell death rate was enhanced by serum deprivation. In this study, we investigated whether serum deprivation using 0.5 or 3 % FBS induces apoptotic cell death through mitochondrial enzyme activation as compared to 10 % FBS. Apoptotic cell death was observed by chromosome condensation and the increase of sub-G0/G1 population. Serum deprivation reduced cell growth rate, which was confirmed by the decrease of S-phase population in cell cycle. Serum deprivation significantly increased caspase-9 activity and cytochrome c release from mitochondria into cytosol. Serum deprivation-induced mitochondrial changes were also indicated by the increase of ROS production and the activation of mitochondrial enzyme, succinate dehydrogenase. Mitochondrial enzyme activity increased by serum deprivation was reduced by the treatment with rotenone, mitochondrial electron transport inhibitor. In conclusion, serum deprivation induced mitochondrial apoptotic cell death through the elevation of mitochondrial changes such as ROS production, cytochrome c release and caspase-9 activation. It suggests that drug sensitivity could be enhanced by the increase of mitochondrial enzyme activity in serum-deprived condition.
The intracellular free radicals produced at different stages of cell cycle of Saccharomyces cerevisiae ATCC 24858 were investigated by means of electron spin resonance(ESR) spectroscopy. The synchronized cells by repeated starvation and refeeding revealed different ESR spectral pattern compared to that of asynchronized cells. Each spectrum centered at g=2.005, which indicates free radicals. The relative spin concentration was maximat at the end of DNA increase. The variation of the relative spin concentration at each distinct stage of the cell cycle was evaluated in relation to ascorbate concentration, L-galactonolactone oxidase activity, and ascorbate oxidase activity. The highest activities of L-galactonolactone oxidase and ascorbate oxidase were detected just before and at the maximum of relative spin concentration, respectively. And ascorbate concentration fluctuated through each stage of cell cycle with the changes of relative spin concentration, L-galactonolactone oxidase activity, and ascorbate oxidase activity. Thus it is suggested that intracellular free radicals should be related to cell cycle, interacted with ascorbate, and may play an important role in the cell cycle of Saccharomyces cerevisiae.
Cloned staphylococcal peptidoglycan hydrolase was used in determining the physiological characteristics of peptidoglycan hydrolase. This enzyme hydrolyzed the bacterial cell walls and released the N-terminal alanine, but not the reducing groups. This cloned gene product was localized in the cytoplasm of transformed Escherichia coli. Activity gels indicated the enzyme had an Mr of about 54,000, which was consistent with the deduced Mr from sequencing of the cloned gene. The activity bound to CM-cellulose but not DEAE-cellulose resin, indicating it as a basic protein. Enhanced enzyme activity in a low concentration of cations, and inhibited enzyme activity in a solution with dissolved phospholipids, suggested that the activity and the availability of this basic protein may be regulated between negatively charged and positively charged cellular molecules. The activity against boiled crude cell wall was much greater than against purifed cell wall, suggesting protein associated with crude cell wall may aid in the binding of the peptidoglycan hydrolase The cloned peptidoglycan hydrolase showed positive activity on whole cells of some lysostaphin-resistant coagulase-negative staphylococci. The cloned enzyme may be an alternative for lysostaphin for lysis of staphylococci.
Experiment was performed to investigate the immunotoxicity of cadmium administered orally and the effect of ginseng petroleum ether fraction on it. Mice were given 3, 30, or 300 ppm cadmium as cadmium chloride orally in the drinking water and injection of ginseng petroleum ether fraction intraperitoneally for 4 weeks. Mice were sensitized and challenged u'ith sheep red blood cells (5-HBC). Immune response was evaluated by delayed type hypersensitivity (DTH), Rosette forming cell (RFC), phagocyte activity, and natural killer cell activity (NK cell activity). In the present study, cadmium suppressed the cellular immunity, It also depressed phagocyte activity very significantly in all cadmium-administered groups, NK cell activity in the cadmium-300 ppm administered group. Ginseng petroleum ether fraction showed restoring effect on the decrease in RFC by cadmium-administration. Remarkably, it showed very significant restoring effect on the depression of phagocyte activity induced by cadmium-administration. From this result, we suppose that the anti-tumor effect of ginseng ether or petroleum ether extract, which has been reported by some other researchers, is mainly due to the increase of phagocyte activity by it's administration.
Moxibustion is one of major healing technique in oriental medicine. It has been widely used in many diseases such as rheumatoid arthritis, Hashimoto disease, breech presentation, etc. However, till now, effects of moxibustion on NK cell activity and relations between sympathetic nerve system(SNS) and the immune alteration induced by moxibustion were not well studied. This study was designed to evaluate effects of moxibustion on NK cell activity and the intervention of SNS in the alteration of NK cell activity induced by moxibustion. Splenic NK cytotoxity was measured in a standard 4-h 51Cr release assay. We measured the NK cytotoxity at after moxibustion stimulation for 1,3,5, and 7 days, and also measured the NK cell cytotoxity after 3 and 7 days burn stimulation with similar temperature. IL-2, IL-4, INF-γ in serum were measured by rat IL-2, IL-4, INF-γ ELISA TEST KIT. To evaluate the effects of sympathectomy on alteration of NK cell cytotoxity, 6-hydroxydopamine(6-OHDA : 5Omg/kg) was used. We showed that NK cell activity of moxibustion stimulation group increased at the 3rd day, and declined at 7th day in comparison with that of contol group. In moxibustion stimulation group, NK cell activity of 3 day stimulation group was significantly higher than sham group. On the contrary, in burn stimulation group, NK cell activity was significantly higher than that of sham groups at 3rd, 7th days. Patterns between moxibustion and burns were different. INF- γ level of 3 days moxibustion stimulation group significantly higher than sham group. IL 2 level among groups were not different. IL-4 was not detected in serum with this method. Sympathectomy abolished the NK cell activity alteration induced by moxibustion. The results suggest that moxibustion induces the alteration of NK cell activity, along with INF-γ and SNS is related to these effects.
This study was performed to examine the anti-cancer effect of Red Ginseng in the DENGalN-PH-induced hepatic tumor model system in rats. One hundred of male SPF Sprague-Dawley rats(6weeks old) were randomly divided into five groups. Rats in groups 1, 2, 3, and 4 were administered to diethylnitrosamine intraperitoneally 200 mg/kg body weight for the caner initiation. Rats in group 5 were given to saline as a control. On two weeks after cancer initiation, rats in groups 1 and 3 were fed on diet containing 0.01% of acethylaminofiuorene(AAF) which is strong cancer-promotor for 6 weeks, while rats in groups 2 and 4 were fed on water containing 0.05% of phenobarbital which is weak cancer.promotor for 6 weeks. Rats in groups 1 and 2 were treated with diet containing 3% of Red Ginseng for six weeks(from 9th week till 15th week after cancer initiation). Rats in all groups were necropsied time-sequencially at 8, 15, and 36 weeks. The hepatic lesions of rat treated with carcinogens expressed glutathione S-transferase placental form(GST-P) at 8 week. The GST-P positive foci of rats treated with AAF were larger than that of any other rats, while the GST-P positive foci of rats treated with AAF and red ginseng were significantly decreased. This anti-cancer effect of Red ginseng might be involved in the enhacement of natural killer cell activity. To know whether there is direct relationship between Red Ginseng and natural killer cell activity, the activity of natural killer cell was examined after treatment AAF, AAF+Red ginseng and Red ginseng only, respectively. Comparing with natural killer cell activity in AAF-treated group, natural killer cell activity was significantly activated in AAF+ Red ginseng-treated group. This indicated that Red ginseng might enhance natural killer activity after treatment carcinogen in rats. These results suggested that Red ginseng might have a cancer prevention ability by promoting natural killer cell activity during hepatocarclnogenesis.
The migration and proliferation of periodontal ligament cells are desired goal of periodontal regeneration therapy. PDGF and $TGF-{\beta}1$ are well known to regulate the cell activity of mesenchymal origin cell. The purpose of this study was to determine the effects of these growth factors on human gingival fibroblast and periodontal ligament cell actvity, and to identify the regulatory effect of $TGF-{\beta}1$ on the response to PDGF by MIT assay. Human gingival fibroblast and periodontal ligament cells were cultured from extracted teeth for non-periodontal reason. Cultured human gingival fibroblast and periodontal ligament cells in vitro were treated with polyperpetide growth factor PDGF and $TGF-{\beta}1$ in both a dose and time - dependent manner. Cell morphology were determined by inverted microscope and cell acitivity were determined by MIT assay. The result of this study demonstrated that PDGF and $TGF-{\beta}1$ were not changed the morphology of these cell compared with control group. PDGF or $TGF-{\beta}1$ increased cell activity of periodontal ligament cell in dose and time dependent manner but gingival fibroblast were decreased to the level of control group at third day. Additionally, incubation with $TGF-{\beta}1$ addition to PDGF resulted in a enhanced cell activity of PDGF. Therefore, cell acitivty of gingival fibroblast were not changed compared with control group. This stiudy demonstrates that PDGF and $TGF-{\beta}1$ are major mitogens for human periodontal ligament cell in vitro, and $TGF-{\beta}1$ is a regulator of cell activity to PDGF in human gingival fibroblast and periodontal ligament cell.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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