인삼모상근의 생장에 영향을 미치는 auxin과 CH의 효과를 규명하기 위하여 auxin류인 IBA, MA, NAA와 아미노산 화합물인 CH를 각각 농도별로 처리하여 MS 고체배지와 액체배지에서 50일간 배양후 수거하여 생중량과 건중량을 측정하여 농도별로 생장률을 측정한 결과, 인삼모상근의 생장에 미치는 auxin의 효과는 고체배양시에는 IBA를 1 mg/L의 농도로 암배양하는 것이 가장 효과적이었으며, NAA 1 mg/L의 농도로 광배양 하는 것도 효과적이었다. 반면에 IAA와 CH는 인삼모상근의 생장에 효과가 없었다. 액체배양시에는 IAA와 NAA를 처리했을 때 농도의 증가에 따른 생장의 증가는 보이지 않고 생장의 감소 없이 거의 일정하게 그 수준이 유지되었으며 IBA와 CH는 모두 인삼모상근의 생장을 오히려 억제하는 경향이었다.
본 논문에서는 카제인 가수분해물의 in vivo 상에서 혈압강하 효과를 알아보고, 혈압강하 기능을 갖는 기능성 펩타이드로서의 활용 가능성을 검토하기 위하여 안전성 검사를 실시하였다. 카제인 가수분해물의 소화관 단백질 분해효소 (펩신, 트립신, 카이모트립신) 내성 시험 결과 카제인 가수분해물은 소화관 효소 처리에 의하여 ACE 저해효과에 차이가 없었으며, 자연발증고혈압쥐를 이용한 혈압강하 실험에서 500 mg/kg을 경구 투여한 결과 12.9% (-28.88 mmHg, P<0.05) 저하하였고, 이들 가수분해물을 30% 난황으로 유화할 경우 15.9% (-30.76 mmHg, P<0.01)의 혈압이 감소하여 난황으로 유화에 의해 다소 혈압강화 효과가 증가하였다. 장기 투여에 의한 혈압강하 효과에서 35일 부터 수축기혈압 감소효과가 나타났으며 12.46% (P<0.05) 감소하였다. 가수분해물의 장기투여에 의한 자연발증고혈압쥐의 체중변화는 대조구와 비교하여 차이가 없었다. 혈압강하 효과를 가지는 카제인 가수분해물의 안전성을 조사한 결과 간장장애 지표로서 사용되는 GOT, GPT 활성에 차이가 없었다. 간장 비대 등의 장기 비대 현상도 없었고 조직병리학적 검사에서도 차이가 없었다. ACE 저해활성을 가지는 카제인 가수분해물은 혈압강하제와 비교하였을 때 비교적 낮은 활성을 나타내지만 항상 섭취하는 식품 중에 존재한다는 점에서 그 유용성이 기대되며, 고혈압 예방을 위한 기능성 식품이나 의약품으로서 개발하기 위해서 앞으로 ACE 저해 펩타이드에 대한 체계적인 안전성 검사가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
The antioxidant capacity of porcine splenic hydrolysate (PSH) was studied in vitro and in vivo. Peptide hydrolysates were prepared, using the proteolytic enzyme $Alcalase^{(R)}$. The molecular weights of PSH were 37,666, 10,673, 6,029, and 2,918 g/mol. Rats were fed a 5% (w/v) PSH diet, instead of a casein diet, for 4 wk. The food intake, body weight gain, and liver weight of rats in the PSH group were similar to those in the control (CONT) group. There were no differences in the serum total cholesterol, triglyceride, total protein, or albumin levels between PSH and CONT groups. However, the level of in vivo hepatic lipid peroxidation in PSH group was significantly lower than that in CONT. In vivo hepatic catalase and glutathione peroxidase activities in the PSH group were significantly higher than those in the control group. The in vitro protein digestibility of PSH was lower than that of casein. The in vitro trolox equivalent antioxidant capacity of PSH was significantly higher than that of the peptide hydrolysate from casein. The in vitro radical scavenging activities of PSH were significantly higher than those of the peptide hydrolysate from casein. The present findings suggest that porcine splenic peptides improve the antioxidant status in rats by enhancing hepatic catalase and GSH-Px activities, and indicate a potential mechanism of radical scavenging activity during gastrointestinal passage.
한국초지조사료학회 1999년도 제24회 정기총회 및 프로그램, 제37회 학술발표회 및 특별강연 초록
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pp.74-74
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1999
Bentgrass의 형질전환식물 생산을 위하여 유전자총 (Gene-gun) 및 Agrobacterium기법을 이용하여 형질전환을 시도한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 캘러스의 유도 및 증식 : Bentgrass (Agrostis palustris)의 종자를 MS-5 배지 (MS 기본배지, 2,4-D 5mg/L, casein hydrolysate 2g 포함)에 치상하여 캘러스를 유도하였다. 유도된 캘러스는 증식을 위하여 MS-3 배지 (MS기본배지, 2,4-D 3mg/L, casein hydrolysate 2g 포함)에서 2주 간격으로 subculture 하였다.(중략)
The experiments were performed to investigate the effects of protein and protein hydrolysates on lipid metabolism in the hyperlipidemic/hypercholesterolemic rat model induced by feeding fat-enriched diet. In Except 1 male rats were fed four semi-purified high fat and cholesterol diets that contained different nitrogen source, casein(C), casein hydrolysate(CH), corn gluten(G) and corn gluten hydrolysate(GH), for 6 weeks. In Expt. 2 rats were fed high fat and cholesterol diet for 4 weeks to induce hyperlipidemia and hypercholesterolemia. Then the rats were divided into 4 groups and were fed the four kinds of above experimental diets for 4 weeks consecutively. The contents of total lipid , cholesterol and triglyceride in blood, liver and feces were determined. Serum lipid concentrations of CH, G and GH were significantly lower than that of C. Serum cholesterol concentrations of hydrolysate groups(CH and GH) were significantly lower than those of intact protein groups(C and G). Serum HDL -cholesterol concentration tended to increase by hydrolysate intake. The total lipid, cholesterol contents in liver showed similarity results as above. Fecal lipid excretions of CH, G, and GH groups were significantly higher than that of C group. These results indicate that hypolipidemic and /or hypocholesterolemic effect of corn gluten or protein hydrolysates were detected in the process of inducing hyperlipidemia by high-fat and cholesterol diet or after inducing hyperlipidemia.
This study was carried out to investigate an optimum condition for the high angiotensin-l converting enzyme (ACE) inhibitory activity and the yield on enzyme concentration, casein concentration, and hydrolysis time. The optimum condition was performed by response surface methodology for acquirement of casein hydrolysate of milk which shows high ACE inhibitory activity, Among 8 tested enzymes, Protamex showed the highest activation degree with 77.03 unit/g from casein. Their hydrolysis degrees of flovourzyme 500MG, protamex, mixture from 1% casein were 85.5, 88.5, and 93.5%, respectively. The ranges of enzyme concentration (0.25-1.25%), casein concentration (2.5-12.5%), and hydrolysis time (20-100 min) as 3 independent variables through preliminary experiments of the yield of casein hydrolysate and ACE inhibitory activity, and it shows optimum response surface at a saddle point. It shows enzyme concentration (0.64%), casein concentration (8.38%), and hydrolysis time (55.81 min) in the yield aspect and showed the highest activity at enzyme concentration (0.86%), casein concentration (5.97%), and hydrolysis time (63.86 min) in ACE inhibitory aspect. The $R^2$ value of a fitted optimum formula on the hydrolysis yield was 0.9751 as the significant level of 1%. The $R^2$ value of a fitted optimum formula on ACE inhibitory activity is 0.8398, and the significance is recognized in the range of 5%.
본 연구에서는 casein 펩타이드 분획물이 정상 및 고지방식을 섭취한 흰쥐에서의 혈청 및 조직의 지질 농도에 미치는 섭취효과를 검토하고자 하였다. 정상 지방식이 (7% soybean oil & cholesterol-free; Expt I)를 섭취한 흰쥐는 정상 혈청 지질농도를 나타내는 것으로, 분배설량이 약간 증가하는 경향을 나타내긴 하였지만 이때 casein 펩타이드 분획물군의 혈청,간조직의 지질농도에 대한 효과는 유의적인 차이가 없었다. 하지만, 순환기계질환의 주요 인자인 HDL/LDL비는 친.소수성 펩타이드에서 유의적으로 높은 경향을 나타내었다. 고지방 콜레스테롤식이 (18% beef tallow & 1% cholesterol; Expt II)를 급여하였을 경우, 친.소수성 펩타이드 분획물군에서 분중으로의 총지질, 총콜레스테롤 및 중성지방의 배설량이 유의 적 (p<0.05)으로 또는 증가하는 경향을 나타내었다. 이런 결과, 고지방식이를 급여했을 때 친.소수성펩타이드 분획물군이 casein군에 비해 혈중 및 간조직 중의 지질 농도가 낮아지는 경향을 나타냈다. 또한 HDL/LDL비도 casein군에 비해 친.소수성 펩타이드 분획물군에서 높게 관찰되는 것으로, 이는 고 혈증 위험요소를 저하시키는 효과가 있는 것으로 사료되었다. 친.소수성 펩타이드 분획물(CL & CB)의 아미노산 조성 결과, 친.소수성 펩타이드 식이의 glycine과 methionine함량은 casein 식이의 조성과 거의 비슷한데, arginine과 lysine함량은 casein 식이의 조성과 상당히 달랐다. 또한 혈중 지질농도를 낮추는 것으로 보고되어지는 arginine/lysine 비와 glycine/methionine 비는 친.소수성 펩타이드 분획물 식이(CL & CB)에서 낮게 관찰되었다. 이러한 결과는 동물실험 결과와 같이 고찰해볼 때, 아미노산 조성이 혈중 및 조직 중의 지질저하 효과에 미치는 영향이 그다지 크지 않은 것으로 사료되었고, 앞으로 이에 대한 연구가 더욱 필요하였다. 친.소수성 casein 펩타이드 분획물의 지질 대사에 미치는 영향을 관찰하여 보았을 때, 고지혈증 및 고콜레스테롤혈증 흰쥐에서 혈중 및 간조직의 지질함량을 저하 시키는 효과가 있는 것으로 나타났다. 이에 가능한 기전으로는 분중으로의 지질 배설량을 증가시킨 것에 기인한 것으로 해석되었으며, 섭취기간이 길어질수록 효과가 확실해질 것으로 기대되었다. 또한 casein 펩타이드 분획물의 아미노산 조성비의 차이라기보다는 펩타이드 자체의 효과임이 시사되었다.
Kim, Wan-Seop;Davis, Sean;Wong, Grace;Demain, Arnold-L.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권4호
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pp.560-563
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2003
During our previous studies on the relationship between nutrient requirements of S. hygroscopicus C9 and rapamycin biosynthesis, we developed chemically-defined media containing among other nutrients, aspartic acid, arginine, histidine, or ammonium sulfate. However, these media (“Cheng et al. medium” and “Lee et al. medium”) showed very slow growth characterized by a very long lag phase of growth. In an attempt to develop a chemically-defined or semi-defined medium to support more rapid growth and increased cell production, we have carried out studies to shorten the lag phase. Of the various additives tested, vitamin-free casein acid hydrolysate was the most significant by shortening the lag phase by 2-3 days. Mixtures of amino acids failed to replace casein acid hydrolysate. The active principle passed through an ultrafilter with a molecular weight cutoff of 1,000 and thus may be a peptide. The present work has yielded a semi-defined medium which should be useful for further growth studies on S. hygroscopicus C9.
오차드그래스의 종자배양에서 형성된 캘러스를 현탁배양하여 배양기간별 부정배 형성정도와 식물체 재분화율 등에 대한 몇 가지 실험을 수행하여 얻은 결과를 요약하면 다음과 같다. 종자유래의 캘러스를 현탁배양하였을 때, 세포 모양이 둥근것과 그들의 세포괴는 배양 50일 후에 최대치를 나타내었고 그 이후는 감소하였다. 현탁배양 기간에 따른 갤러스의 부정배 형성과 식물체 분화율은 배양 60일째 가장 높았으며, 그 이후는 감소하는 경향이었다. 현탁배양에서 배지 내에 첨가되는 casein hydrolysate (CH)의 적정농도는 $4\;g/{\ell}$인 것으로 나타났다.
산 casein으로부터 FPLC를 이용하여 gel permeation column으로 ${\kappa}-Casein$을 분획한 다음, 이를 chymosin, pepsin, trypsin 으로 각각 처리하여 3% TCA에서 soluble한 부분을 증류수로 투석(MW cut-off 1kDa)시킨 후 ACE저해 효과를 측정한 결과, trypsin으로 분해 시킨 경우 ACE 저해율이 94.7%로 가장 높게 나타났으며, chymosin 가수분해물은 가장 낮았다. GMP를 투석막의 종류에 따라 투석 시킨 후 $IC_{50}$을 측정한 결과, MW cut-off 의 크기가 증가할수록 ACE저해효과는 감소하는 것으로 나타났으며, MW cut-off 2 kDa의 경우가 가장 높은 저해율을 보였고 MW cut-off 5kDa에서는 저해율이 가장 낮았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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